[发明专利]啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测试剂及检测方法有效

专利信息
申请号: 201110319087.5 申请日: 2011-10-20
公开(公告)号: CN102382903A 公开(公告)日: 2012-03-21
发明(设计)人: 郭立新;段维军;闻伟刚 申请(专利权)人: 中华人民共和国北仑出入境检验检疫局;宁波检验检疫科学技术研究院
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94
代理公司: 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 代理人: 程晓明
地址: 315800 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测试剂及检测方法,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为61bp,引物HLV-F序列:CGTGGAACGGCTCCTTCTT;引物HLV-R序列:AGAGTTGTATCCACCGGGTAGTTT;探针HLV-P序列:CACCAGCCGGAGTT,该探针的5'含有FAM报告荧光染料,扩增目标片段的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示;检测方法包括总RNA的提取和实时荧光PCR反应,该RT-PCR反应是引物扩增与探针检测同时进行,整个检测过程完全闭管,不需PCR后处理,消除了PCR产物的污染,减少了检测步骤,节省了时间,并且对啤酒花潜隐类病毒特异和敏感;因此本发明提供一种操作灵敏、快速、准确的检测啤酒花潜隐类病毒的检测试剂及方法。
搜索关键词: 啤酒花 潜隐 类病毒 实时 荧光 rt pcr 检测 试剂 方法
【主权项】:
啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT PCR检测试剂,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为61bp,其特征在于引物和探针序列为:引物HLV F: 5' CGTGGAACGG CTCCTTCTT 3';引物HLV R:5' AGAGTTGTAT CCACCGGGTA GTTT 3';探针HLV P:5' CACCAGCCGG AGTT 3',该探针的5'端含有FAM报告荧光染料,3'端为含有不发荧光的淬灭基团并具有MGB分子;扩增目标片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
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