[发明专利]利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白GDI2的方法有效
| 申请号： | 201110185013.7 | 申请日： | 2011-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN102286580A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 孙爱友;魏东芝;王学东;徐瑞;董玉国;张星;王丽华 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 林君如 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白GDI2的方法，将已完成构建大肠杆菌经一级、二级种子培养后，按接种量3wt％将二级种子培养液接种到发酵罐中，控制发酵温度为37℃、pH为7.0，待发酵液中溶氧出现明显上升时开始流加补料培养基，使菌体在恒定的比生长速率条件下进行生长，最终实现高细胞密度发酵，最终菌浓OD可达到116，经0.2mM IPTG诱导4h后，获得肿瘤转移抑制蛋白GDI2。与现有技术相比，本发明可有效的减少发酵过程中的非最有经济阶段，且发酵策略控制简单、目的蛋白产量较高，具有较大的工业化应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 大肠杆菌 累积 生产 肿瘤 转移 抑制 蛋白 gdi2 方法 | ||
【主权项】：
利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白GDI2的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：将大肠杆菌工程菌经一级种子培养基培养及二级种子培养基培养后，按接种量3wt％将二级种子培养液接种到发酵罐中进行发酵培养，发酵罐中的培养基采用优化过的LB培养基，控制发酵温度为37℃、pH为7.0，待发酵液中溶氧出现明显上升时开始流加生长阶段补料培养基，菌浓OD达到116时开始流加诱导阶段补料培养基，调节诱导阶段补料培养基流加速率降低比生长速率，最后经异丙基‑β‑D‑硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导，获得肿瘤转移抑制蛋白GDI2。
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