[发明专利]一种检测海水氮限制的微藻分子生物学方法有效
| 申请号： | 201010280143.4 | 申请日： | 2010-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN102399857A | 公开（公告）日： | 2012-04-04 |
| 发明（设计）人： | 俞志明;刘云;宋秀贤;曹西华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种检测海水氮限制的微藻分子生物学方法，主要以中肋骨条藻为指示藻种，根据其硝酸盐转运蛋白基因的相对表达量来指示水体中氮限制的程度。主要包括以下步骤：a.提取中肋骨条藻RNA并反转录为cDNA；b.以硝酸盐转运蛋白基因为目的基因，以18S核糖体RNA基因为内参基因，采用SYBR Green I染料染色法实时荧光定量硝酸盐转运蛋白基因的表达量；c.通过比较不同区域硝酸盐转运蛋白基因的表达量对水体氮限制的状况进行评价。本发明提供了一种估算海水中氮限制的新方法，预测浮游植物的生长乃至赤潮的发生动态。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 海水 限制 分子生物学 方法 | ||
【主权项】：
一种检测海水水体中氮限制的微藻分子生物学方法，其特征在于：包括以下步骤：a.采集生长有中肋骨条藻的待检测海水，提取RNA并反转录，得到cDNA；b.以所得cDNA为模板，硝酸盐转运蛋白基因为目的基因，18SrRNA为内参基因，进行real‑time PCR，测定NRT基因的表达量；C.根据NRT基因的表达量判断水体中氮营养盐的限制情况；硝酸盐转运蛋白基因的表达量随着硝酸盐浓度的降低而升高，二者呈负相关关系，因此可以根据中肋骨条藻硝酸盐转运蛋白基因的表达量对水体中氮限制的状况作出准确定性评价。
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