[发明专利]一种L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐的制备方法有效
申请号: | 201010256510.7 | 申请日: | 2010-08-18 |
公开(公告)号: | CN102373245A | 公开(公告)日: | 2012-03-14 |
发明(设计)人: | 苏建勇;郑南华;张建宇 | 申请(专利权)人: | 上海汉飞生化科技有限公司 |
主分类号: | C12P13/02 | 分类号: | C12P13/02;C12N11/02 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 赵志远 |
地址: | 200041 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐的制备方法,通过精氨酸酶转化生产L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐包括以下步骤:(1)固定化酶的制备,(2)转化条件的优化,(3)产物提取和精制工艺步骤。与现有技术相比,本发明具有生产成本低、生产条件温和、转化体系中杂质较少、工艺步骤简单、生产操作安全、纯度高,能合成符合透光要求的合格产品。每升反应溶液中含有300-320g的L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐,α-酮戊二酸转化率达90%以上等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 鸟氨酸 酮戊二酸盐 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种L 鸟氨酸 α 酮戊二酸盐的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)固定化酶的制备取三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂,用碳酸钾溶液浸泡6 18h后过滤,再将滤出的三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂与碳酸钾、溴化氢按重量比为1∶(0.1 0.6)∶(0.2 0.5)配制成溶液,于冰浴中反应5 60min,调节pH值至7 10,再加入精氨酸酶,使其与三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂的重量比为(0.002 0.01)∶1,于1 10℃反应12 48h,洗涤后用饱和食盐水浸泡0.5 3h,再利用去离子水洗净至溶液中检测不出氯离子,即得固定化酶,保存于水中;(2)转化条件的优化将步骤(1)中制得的固定化酶与精氨酸、乙酸锰按重量比1∶(1 3)∶(0.004 0.02)混合,加入去离子水中,搅拌,采用乙酸调节pH值至9.0 9.4,在35 40℃下,反应15 18h得固定化酶混悬液;(3)产物提取及精制将步骤(2)中的固定化酶混悬液过滤后,向滤液中加α 酮戊二酸、活性炭,于20℃以下搅拌反应5 30min后,过滤,加入醇类,搅拌0.5 1h,析出L 鸟氨酸 α 酮戊二酸盐2∶1,搅拌3 5h,再经降温至20℃以下、离心、干燥即得产品。
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