[发明专利]一种双启动子可诱导可分泌型穿梭质粒及其构建方法无效
申请号: | 201010255590.4 | 申请日: | 2010-08-17 |
公开(公告)号: | CN101948865A | 公开(公告)日: | 2011-01-19 |
发明(设计)人: | 乐科易;张培德 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N15/75 | 分类号: | C12N15/75;C12N15/66;A61K48/00;A61P31/04;A61P31/10 |
代理公司: | 上海世贸专利代理有限责任公司 31128 | 代理人: | 严新德 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明属于生物基因工程领域,提供了一种双启动子可诱导可分泌型穿梭质粒,由一个酶切的大肠杆菌pET-28a质粒和一个酶切的枯草杆菌pE194质粒构成,所述的酶切的大肠杆菌pET-28a质粒上插入有溶菌酶-抗菌肽功能片段和抗菌肽基因,本发明还提供了一种双启动子可诱导可分泌型穿梭质粒的构建方法,该穿梭质粒转入原核生物以融合方式表达毒蛋白、杀菌肽等蛋白对宿主不表现毒杀作用,本发明构建的穿梭质粒可以经IPTG或者乳糖诱导,以提高基因表达水平;也适合于外分泌表达,外分泌表达的目的蛋白处理方便又没有内毒素污染,由于具有双功能启动子,不同基因都可在合适的正确方向插入基因进行表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 启动子 诱导 分泌 穿梭 质粒 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种双启动子可诱导可分泌型穿梭质粒,其特征在于:由一个PstI酶切的大肠杆菌pET‑28a质粒和一个PstI酶切的枯草杆菌pE194质粒构成,所述的酶切的大肠杆菌pET‑28a质粒上插入有溶菌酶‑抗菌肽功能片段和抗菌肽基因,所述的溶菌酶‑抗菌肽功能片段由溶菌酶和抗菌肽基因融合而成。
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