[发明专利]一种利用RNA恒温扩增的结核分枝杆菌核酸检测试剂盒无效
| 申请号： | 201010184457.4 | 申请日： | 2010-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN101886124A | 公开（公告）日： | 2010-11-17 |
| 发明（设计）人： | 方亮;于明辉;居金良 | 申请（专利权）人： | 上海仁度生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201201 上海市张江高*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用超声波破碎细菌释放出靶标RNA及恒温核酸同步放大检测技术(SAT)对结核分枝杆菌(TB)进行检测的试剂盒，包含TB稀释液、TB反应液、TB检测液、SAT酶液、TB阳性对照、TB阴性对照。本发明的检测试剂盒特异性高、灵敏度高，且扩增产物RNA在自然环境下易于降解而污染低。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 rna 恒温 扩增 结核 分枝杆菌 核酸 检测 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种利用RNA恒温扩增的结核分枝杆菌核酸检测试剂盒，包括：(1)TB稀释液：为含RNase抑制剂的灭菌DEPC水溶液；(2)TB反应液：为含dNTPs和NTPs扩增所需组份，具体包含Tris 10～50mM，MgCl210～40mM，dNTP 0.5～5mM，NTP 1～10mM，PVP40 1～10％，KCl 5～40mM；(3)TB检测液：为恒温扩增时必需的TB引物和TB荧光探针溶解在TE溶液中配制而成，引物探针序列均选自长516bp TB 16S rRNA基因保守区，序列见序列表SEQ.ID.NO14；(4)SAT酶液：为恒温扩增时必需的多酶组分体系，含T7RNA聚合酶200～2000U/反应、M-MLV反转录酶400～4000U/反应、2～10mM HEPES pH7.5、10～100mMN-acetyl-L-cysteine、0.04～0.4mM zinc acetate、10～100mM trehalose、40～200mM Tris-HCl pH8.0、40～200mM KCl、1～10mM EDTA、2～20％(v/v)TritonX-100、10～40％(v/v)glycerol；(5)TB阳性对照；为含102～105CFU/ml结核分枝杆菌的菌液；(6)TB阴性对照：为不含有SEQ.ID.NO14核酸序列或不含有结核分枝杆菌的的溶液。
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