[发明专利]重组杆状病毒及其构建方法和应用有效
申请号: | 201010115505.4 | 申请日: | 2010-03-01 |
公开(公告)号: | CN101899421A | 公开(公告)日: | 2010-12-01 |
发明(设计)人: | 袁世山;郑浩;高飞;郑海红;韦祖樟;龙进学;刘长龙;庄金山;于丹丹;孙志;王小敏;邓宇;李燕华;蔺涛;周艳;刘萍 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/40;C12N5/10;A61K48/00;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/93 |
代理公司: | 上海大邦律师事务所 31252 | 代理人: | 周东萍 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明公开一种重组杆状病毒,该重组杆状病毒包含:编码猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性病毒颗粒蛋白的核苷酸序列。本发明还公开了重组杆状病毒的构建方法及应用。本发明的重组杆状病毒,在昆虫细胞、以及PRRSV敏感和非敏感哺乳细胞中都能成功表达出感染性PRRSV颗粒,可用于研制PRRSV疫苗,以及建立体外培养病毒的培养体系。 | ||
搜索关键词: | 重组 杆状病毒 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种重组杆状病毒,其特征在于,该重组杆状病毒包含:编码猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性病毒颗粒蛋白的核苷酸序列。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院上海兽医研究所,未经中国农业科学院上海兽医研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201010115505.4/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 合成嵌合痘病毒-201780078546.0
- 戴维·埃文斯;瑞安·诺伊斯;塞思·莱德曼 - 戴维·埃文斯;瑞安·诺伊斯;塞思·莱德曼
- 2017-11-02 - 2019-11-08 - C12N7/01
- 本发明总体上涉及合成嵌合痘病毒、包含此类病毒的组合物以及用于产生此类合成嵌合痘病毒的系统和方法的开发和用途。合成嵌合痘病毒非常适合活病毒疫苗和药物制剂。
- 新型噬菌体以及包含其的组合物-201580020154.X
- 金载沅;申恩美;裴基德 - CJ第一制糖株式会社
- 2015-03-13 - 2019-11-05 - C12N7/01
- 本发明涉及新型噬菌体ΦCJ27(KCCM11465P)以及包含该噬菌体作为有效成分的组合物。此外,本发明涉及通过使用噬菌体ΦCJ27(KCCM11465P)或组合物预防和/或治疗由非人类动物的产肠毒性大肠杆菌(ETEC)引起的感染性疾病的方法。
- 一种具有肿瘤靶向性的重组痘苗病毒及其制备方法、用途-201810384001.9
- 丁月娣;黄飚;邓黎莉;范俊;彭莹;周彬 - 江苏省原子医学研究所
- 2018-04-25 - 2019-11-01 - C12N7/01
- 本发明公开了一种具有肿瘤靶向性的重组痘苗病毒及其制备方法、用途,该重组痘苗病毒包括将胞嘧啶脱氨酶基因序列插入痘苗病毒的基因组中得到的能够表达胞嘧啶脱氨酶蛋白的重组痘苗病毒,所述痘苗病毒为天坛株广9,所述胞嘧啶脱氨酶基因编码的是酵母胞嘧啶脱氨酶,胞嘧啶脱氨酶基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的重组痘苗病毒能够大量表达胞嘧啶脱氨酶蛋白,且表达的胞嘧啶脱氨酶蛋白活性高,能够有效将5‑FC前体转变为化疗药物5‑FU。
- 一种利用盘鲍凝集素减轻痘苗病毒毒副作用的方法-201810364908.9
- 李恭楚 - 李恭楚
- 2018-04-23 - 2019-10-29 - C12N7/01
- 本发明涉及基因工程技术领域。痘苗病毒在治疗肿瘤过程中引发的毒副作用需要得到有效的缓解,本发明提供一种通过携带盘鲍凝集素(HddSBL)基因来减轻痘苗病毒治疗肿瘤时的毒副作用的方法;进一步地,本发明提供了一种携带盘鲍凝集素基因的痘苗病毒。本发明通过动物实验证实,HddSBL能够降低痘苗病毒在C6动物模型中引起的副作用,延长小鼠的存活时间;而且HddSBL是通过降低痘苗病毒诱导的肿瘤组织IL‑2释放来减轻痘苗病毒在治疗肿瘤时引发的毒副作用。
- 一种带荧光标记的重组病毒的纯化方法-201910650817.6
- 李有文;米丽开姆·托合提尼亚孜;童剑军;张雪萍;何川川 - 塔里木大学
- 2019-07-18 - 2019-10-29 - C12N7/01
- 本发明公开了一种带荧光标记的重组病毒的纯化方法,包括以下步骤:步骤1、KLP2基因缺失的山羊痘病毒的重组:1)培养绵羊睾丸原代细胞并铺细胞板,待细胞培养找满80%左右,用羊痘病毒疫苗株感染细胞。2)病毒重组;步骤2、重组病毒的纯化:1)挑取带荧光的重组病毒:2)病毒纯化;3)继续纯化:对上一步挑取的带荧光病毒反复冻融,按照步骤2中的2)的操作,再稀释接毒,再挑,一般3‑4代后就可以得到纯化的重组病毒。
- 一种表达VP2基因的重组Ⅰ型马立克氏病病毒疫苗毒株-201910786990.9
- 孙鹏;楚电峰;侯玉超;杜元钊;范根成;刘相娥 - 青岛易邦生物工程有限公司
- 2019-08-24 - 2019-10-18 - C12N7/01
- 本发明构建了一株表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株并对其应用进行了探究。本发明利用同源重组技术,将包含传染性法氏囊病毒VP2基因和CMV启动子序列的基因片段CMV‑VP2及含flp识别位点的Kana基因插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗SC9‑1株的UL45/UL46基因之间,构建获得在UL45/UL46基因间插入CMV‑VP2表达框和Kana表达框的重组质粒,而后通过阿拉伯糖将Kana基因诱导掉,得到只含有CMV‑VP2表达框的重组质粒,由其拯救获得表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。研究表明,本发明获得的疫苗株具有与亲本毒SC9‑1疫苗株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性,并且能够同时抵抗MDV超强毒株以及IBDV超强毒株的攻击。由此可见,本发明获得的表达IBDV‑VP2基因的重组MDV疫苗株可用于预防鸡传染性法氏囊病和马立克氏病。
- 表达基因VII型新城疫病毒融合蛋白的重组火鸡疱疹病毒候选疫苗株及制备方法-201910648492.8
- 吴艳涛;白雪雁;张小荣;张成成;郭梦娇;曹永忠 - 扬州大学
- 2019-07-18 - 2019-10-15 - C12N7/01
- 本发明属于基因工程疫苗技术领域,具体涉及一种表达基因VII型新城疫病毒融合蛋白的重组火鸡疱疹病毒候选疫苗株及制备方法。所述表达基因VII型新城疫病毒融合蛋白的重组火鸡疱疹病毒候选疫苗株命名为rHVT‑NDV‑VII‑F,它的保藏号是CCTCC NO:V201904。该重组病毒能表达基因VII型NDV F蛋白,与当前国内流行的NDV野毒株基因型完全匹配,可作为用于预防NDV感染的基因工程疫苗候选株。
- 一种重组杆状病毒、貉细小病毒重组亚单位疫苗及其制备方法-201910505871.1
- 倪佳;任飞;唐毓;赵江平;吕文雪;闫如勋;许皓;王春霞;李云松;杨升 - 吉林特研生物技术有限责任公司
- 2019-06-12 - 2019-10-11 - C12N7/01
- 一种重组杆状病毒、貉细小病毒重组亚单位疫苗及其制备方法,涉及兽用生物制品及生物领域。本发明的一种重组杆状病毒,已于2019年4月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC NO.17486,命名为重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒ACMPV‑VP2。本发明首先构建了能够表达RDPV VP2蛋白的重组杆状病毒,将其接入昆虫细胞生产RDPV亚单位疫苗。所制备的疫苗含有重组RDPV衣壳蛋白,而不含有RDPV病毒基因组成分,从而避免了病毒扩散和基因组释放的风险。本发明避免了传统疫苗制备工艺存在的成本高的缺点,填补了目前没有貉子专用细小病毒疫苗的空白。
- 一种同时预防人3型腺病毒-人55型腺病毒-人7型腺病毒的多表位疫苗候选株-201710054988.3
- 蒋再学;陆小梅;田新贵;钟柏茂;周荣 - 东莞市儿科研究所
- 2017-01-24 - 2019-10-11 - C12N7/01
- 本发明涉及重组病毒基因工程技术领域,具体涉及一种同时预防人3型腺病毒‑人55型腺病毒‑人7型腺病毒的多表位疫苗候选株,在人3型腺病毒六邻体的HVR2区、HVR5区分别插入人55型腺病毒中和抗原表位55R2、人7型腺病毒中和抗原表位7R5,该疫苗候选株可以诱导同时抗人3型、7型、55型腺病毒的免疫反应,利用该疫苗候选株可以制备预防人3型、7型、55型腺病毒的三价疫苗。
- 表达猪流行性腹泻病毒S1基因重组伪狂犬病病毒的构建-201910524213.7
- 陈素娟;郑思文;彭大新;秦涛 - 扬州大学
- 2019-06-18 - 2019-10-08 - C12N7/01
- 本发明涉及生物技术领域,提供了表达猪流行性腹泻病毒S1基因重组伪狂犬病病毒的构建方法,用于猪伪狂犬病和流行性腹泻的防控。其构建方法包括:重组病毒rPRV‑TX‑gE‑/TK‑的构建与重组病毒rPRV‑gE‑/TK‑‑S1的构建。研制的表达猪流行性腹泻病毒主要保护性抗原基因S1基因的重组伪狂犬病毒疫苗rPRV‑gE‑/TK‑‑S1,与常规疫苗相比,不仅可以为这两种猪病的防控提供疫苗候选株,而且可以起到一针防两病的功能。
- 一种快速构建3型鸭甲肝病毒反向遗传株的方法-201910551110.X
- 程安春;文兴建;汪铭书 - 四川农业大学
- 2019-06-24 - 2019-10-01 - C12N7/01
- 本发明涉及一种快速构建3型鸭甲肝病毒反向遗传株的方法。将3型鸭甲肝病毒全基因组分为大小相近的三个片段进行PCR扩增,第一个片段的5'端添加巨细胞病毒早期启动子,在第二个片段的2A基因中引入同义突变作为遗传标记位点,在病毒基因组第三个片段的3'端添加丁型肝炎病毒核酶序列和猴空泡病毒早期mRNA多腺苷酸化信号序列,完成3型鸭甲肝病毒感染性亚基因组复制子的构建,与转染试剂混合后转染原代鸭胚成纤维细胞,复制子自发重组,最终获得含有遗传标记的3型鸭甲肝病毒。利用该方法可快速获得3型鸭甲肝病毒突变株,这为研究3型鸭甲肝病毒的致病机理、开发新型疫苗等提供了有利的工具。
- 一类腺依赖病毒病毒重组质粒、重组病毒及构建方法-201910647322.8
- 赵文渊 - 天津润德生物科技有限公司;赵文渊
- 2019-07-17 - 2019-10-01 - C12N7/01
- 本发明涉及一类1型腺依赖病毒重组病毒及生产方法,属于病毒改造及构建技术领域。本发明提供的1型腺依赖病毒重组病毒为:针对1型腺依赖病毒与腺依赖病毒受体(Adeno‑Associated Virus receptor,AAVR)的作用靶点区域氨基酸突变的1型腺依赖病毒(Adeno‑Associated Virus 1,AAV1)。本发明提供的腺依赖病毒重组病毒具有高纯度和高效价。(附图1)。
- 一类腺依赖病毒病毒重组质粒、重组病毒及构建方法-201910647327.0
- 夏玉龙;刘玉竹;郝国静 - 博鑫仪器(天津)有限公司
- 2019-07-17 - 2019-10-01 - C12N7/01
- 本发明涉及一类5型腺依赖病毒重组病毒及生产方法,属于病毒改造及构建技术领域。本发明提供的5型腺依赖病毒重组病毒为:针对5型腺依赖病毒与腺依赖病毒受体(Adeno‑Associated Virus receptor,AAVR)的作用靶点区域氨基酸突变的5型腺依赖病毒(Adeno‑Associated Virus 5,AAV5)。本发明提供的腺依赖病毒重组病毒具有高纯度和高效价。(附图1)
- 同时展示EV71病毒和CVA16病毒中和抗原表位的重组腺病毒-201910466052.0
- 王长兵;田新贵;许甜甜;朱冰 - 广州市妇女儿童医疗中心
- 2019-05-30 - 2019-09-27 - C12N7/01
- 本发明提供了一种能同时展示EV71病毒和CVA16病毒中和抗原表位的重组腺病毒,其中所述重组腺病毒的六邻体HVR1区插入有EV71病毒SP70中和抗原表位基因,所述重组腺病毒的六邻体HVR2区插入有CVA16病毒PEP55中和抗原表位基因。本发明还提供了该重组腺病毒的制备方法。本发明的重组腺病毒能够诱导机体产生有效的EV71病毒和CVA16病毒的中和抗体,从而预防由EV71病毒和CVA16病毒引起的手足口病。
- 一种TGF-β靶向的溶瘤腺病毒在肾癌治疗中的应用-201610961001.1
- 杨月峰;王立生;彭迪;王华;肖凤君;张晓燕;吴祖泽 - 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所;知光医学科技股份有限公司
- 2016-11-04 - 2019-09-27 - C12N7/01
- 本发明涉及生物技术和基因治疗领域,特别是提供了一种TGF‑β靶向的溶瘤腺病毒及其制备方法,及其在肾癌细胞中复制、杀伤和表达的验证,以及在肾癌治疗中的应用。该溶瘤腺病毒由端粒酶启动子TERTp调控病毒的复制,表达TGFβ受体可溶性片段与人IgG1 Fc的融合蛋白sTGFβRIIFc。该溶瘤病毒能够在肾癌细胞中大量复制并杀伤肿瘤细胞,同时表达目的蛋白sTGFβRIIFc;目的蛋白sTGFβRIIFc可以靶向TGF‑β信号,阻断TGF‑β介导的肿瘤转移,抑制TGF‑β引起的免疫抑制,从而达到治疗肿瘤及其转移的目的。
- 一种重组鸡痘病毒疫苗的制备方法-201910615903.3
- 金明兰 - 吉林建筑大学
- 2019-07-09 - 2019-09-24 - C12N7/01
- 本发明公开了一种重组鸡痘病毒疫苗的制备方法,要解决的是现有治疗RHD的疫苗中存在的问题。本发明具体步骤如下:步骤一,筛选重组鸡痘病毒中间转移载体;步骤二,制备CEF单层细胞;步骤三,鸡痘病毒细胞内同源重组;步骤四,鸡痘病毒的筛选。本发明应用基因重组技术,构建含有IL‑18的重组鸡痘疫苗,再经过加压筛选、鉴定、培养、浓缩后的毒力测定,免疫原性的检测,具有易培养、易储存、无毒性扩散、易生产、提高免疫效果、节省资金等优点,应用前景广阔。
- 一种表达埃博拉GP蛋白的重组黄热病毒的制备方法及应用-201410500030.9
- 袁志明;张振清;黄弋;张波;蔡全信 - 中国科学院武汉病毒研究所
- 2014-09-25 - 2019-09-24 - C12N7/01
- 本发明公开了一种表达埃博拉GP蛋白的重组黄热病毒的制备方法及应用,通过将埃博拉病毒的edited GP插入到黄热病毒疫苗株(yellow fever17D,YF17D)的E和NS1之间,构建具有传代能力的重组病毒。病毒滴度达106PFΜ/ml,可检测到埃博拉GP蛋白的表达。该重组病毒能诱导小鼠产生对埃博拉病毒GP蛋白具有特异性结合作用的抗体。该重组病毒可进一步用于开发制备预防埃博拉的特异性抗血清,在埃博拉感染的应急治疗中得到应用。
- 一种腺病毒颗粒获得方法-201910534638.6
- 秦晓东;何祥一;曾飒;张志东 - 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 2019-06-20 - 2019-09-13 - C12N7/01
- 本发明公开了一种腺病毒颗粒获得方法,具体涉及腺病毒获取领域,具体操作步骤如下:S1、pshuttle‑cmv‑hTERT穿梭质粒的构建;S2、BJ5183/p超级感受态的制备;S3、同源重组腺病毒质粒构建;S4、腺病毒颗粒收集。本发明通过pshuttle‑cmv‑hTERT穿梭质粒的构建、BJ5183/p超级感受态的制备、同源重组腺病毒质粒构建以及腺病毒颗粒收集共四个步骤,能够稳定的获取腺病毒,且每次获取的腺病毒颗粒数都能够保持稳定,相比于现有技术中腺病毒的获取,获取效率以及稳定性都得到了很大的提高。
- 去除VGF基因的重组天坛株溶瘤痘苗病毒及制备和应用-201910012884.5
- 马茜;汪洋 - 西安彤盛生物科技有限公司
- 2019-01-07 - 2019-09-06 - C12N7/01
- 本发明公开了一种去除VGF基因的重组天坛株溶瘤痘苗病毒,去除天坛株溶瘤痘苗病毒VGF基因,表达EGFP基因,其中VGF基因的碱基序列如序列表1所示。本发明还公开了该去除VGF基因的重组天坛株溶瘤痘苗病毒的制备方法及应用。本发明去除VGF基因的重组天坛株溶瘤痘苗病毒VTT‑VGFE,降低了天坛株溶瘤痘苗病毒的毒性,提高了天坛株溶瘤痘苗病毒的肿瘤选择性,且具有实时监测病毒颗粒在体内分布的功能,为痘苗病毒作为载体研发活疫苗及肿瘤生物治疗提供了良好工具,能够适用于治疗肺癌、肝癌、黑色素瘤等多种肿瘤。
- 一种表达HA基因的重组火鸡疱疹病毒及其应用-201910443329.8
- 谢青梅;封柯宇;申晓晨;蔺文成;张新珩;李鸿鑫 - 华南农业大学
- 2019-05-24 - 2019-09-06 - C12N7/01
- 本发明提供了一种表达禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒及其应用,是以病毒载体HVT‑BAC为平台,联合使用RED/ET重组技术和ccdB反向筛选技术通过两步重组法制备而来,其中,HA基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。其有益效果在于,本发明所使用的HA基因来自我国近年来广泛流行的H9N2毒株,对禽类具有广泛的免疫原性,本发明的制备方法实现了外源基因的快速、准确重组,所使用的筛选标记有利于减化筛选步骤,得到的重组病毒株能稳定传代,用该重组病毒株制备的疫苗可以刺激鸡体产生潜伏感染,引起终生免疫,为有效防控H9N2禽流感和马立克氏病提供技术支持,具有重要的生产指导意义。
- 用于I型黏多糖贮积症的基因治疗-201780083351.5
- 肯德里克·A·戈斯;杰弗里·B·帕森斯 - 蓝鸟生物公司
- 2017-12-06 - 2019-09-06 - C12N7/01
- 本发明提供了用于治疗MPS I的组合物和方法。
- 用于免疫接种水禽物种的重组禽疱疹病毒载体和疫苗-201510674289.X
- 彦尼克·贾丁;维尔莫斯·帕尔亚 - 法国诗华大药厂
- 2010-04-15 - 2019-09-03 - C12N7/01
- 本发明涉及用于免疫接种水禽物种的重组禽疱疹病毒载体和疫苗,更具体而言,本发明涉及用于水禽免疫接种的疫苗,所述疫苗基于活的重组马立克氏病病毒(在后文中称为rMDV)、更具体为火鸡重组疱疹病毒(在后文中称为rHVT病毒),其包含编码并表达水禽病原体的抗原性肽的至少一种核苷酸序列。还提供了免疫接种的方法。
- 重组欧洲禽源H1N1亚型猪流感疫苗株及其制备方法和应用-201510477308.X
- 于海;童光志;阮宝阳;宫晓倩;李泽君;汪秀会;刘晓敏 - 中国农业科学院上海兽医研究所
- 2015-08-06 - 2019-09-03 - C12N7/01
- 本发明公开了一种重组欧洲禽源H1N1亚型猪流感疫苗株,该重组疫苗株包含:欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒SH1株的HA和NA基因、以及PR8病毒的PA、PB1、PB2、M、NP和NS六个内部基因。本发明还公开了上述重组猪流感疫苗株的制备方法及应用。本发明的重组猪流感疫苗株,在MDCK细胞上具有较高的病毒滴度,经灭活后制备的重组高产细胞灭活疫苗能对欧亚禽源H1N1亚型猪流感病毒的攻击提供完全有效的免疫保护。
- 嵌合痘病毒组合物及其用途-201780062335.8
- Y·方;N·陈 - 希望之城
- 2017-08-09 - 2019-09-03 - C12N7/01
- 本文提供的尤其是病毒组合物及其施用方法。所提供的病毒组合物尤其包括治疗有效量的嵌合痘病毒,并且特别用于治疗癌症的方法。本文提供的嵌合痘病毒可进一步包括转基因。
- H5亚型禽流感重组鸭肠炎病毒rDEVΔUL2-H5株的构建及其应用-201710306408.5
- 杨承槐;李俊平;侯力丹;刘丹;毛娅卿;李岭;李启红;李慧姣;王乐元 - 中国兽医药品监察所
- 2017-06-02 - 2019-08-30 - C12N7/01
- 本发明涉及H5亚型禽流感重组鸭肠炎病毒rDEVΔUL2-H5株的构建及其应用。本发明设计构建了一株重组鸭肠炎病毒rDEVΔ UL2-H5,该毒株是表达5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组鸭肠炎病毒,可用于制备制备成活疫苗,可预防鸭瘟和鸡、水禽H5亚型禽流感;在构建过程中的缺失UL2基因、携带绿色荧光标记的重组鸭肠炎病毒载体(rDEVΔ UL2-GFP),可通过同源重组的方法,应用该载体表达外源基因,为鸭肠炎病毒作为载体构建抗鸭瘟和其他病原的新型重组疫苗打下基础。
- 一种犬细小病毒三价亚单位疫苗-201910442883.4
- 郭伟伟;刘大卫;向银辉;陈俭梅;范根成;杜元钊 - 青岛易邦生物工程有限公司
- 2019-05-25 - 2019-08-23 - C12N7/01
- 本发明提供一种犬细小病毒三价亚单位疫苗,其中抗原为犬细小病毒的VP2蛋白病毒样颗粒,是使用重组杆状病毒感染昆虫细胞后,培养收集获得的;其中重组杆状病毒,其携带有用于编码VP2蛋白的核苷酸片段;所述的VP2蛋白,其氨基酸序列分别为SEQ ID NO:7;SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9。本发明制备的疫苗免疫犬后能提高犬的抗体滴度,预防犬细小病毒的感染。
- 重组溶瘤流感病毒制备方法和应用-201710009595.0
- 杨鹏辉;王希良;张绍庚;任天宇;张培瑞;王兆海;孙芳 - 中国人民解放军第三〇二医院
- 2017-01-06 - 2019-08-23 - C12N7/01
- 本发明公开了重组溶瘤流感病毒制备方法和应用。本发明提供的重组溶瘤流感病毒,表达HTRP1与HTRP2;HTRP1为:A1)序列1所示蛋白质;A2)在序列1中经过取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基、由A1)衍生的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质;HTRP2为:B1)序列3所示蛋白质;B2)在序列3中经过取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基、由B1)衍生的蛋白质;B3)在B1)或B2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。本发明提供的重组溶瘤流感病毒可靶向杀伤肝癌细胞,而对正常宿主细胞无明显影响,可用于肝癌靶向治疗。
- 人博卡病毒1型感染性克隆的构建方法及其应用-201910333406.4
- 李毅;朱记平 - 武汉生物工程学院
- 2019-04-24 - 2019-08-13 - C12N7/01
- 本发明公开了一种人博卡病毒1型感染性克隆的构建方法及其应用,属于分子生物学及基因工程领域。将人博卡病毒的ITR区序列分为5个片段,分段连接到去除B19基因、添加多克隆位点的pB19‑4244d载体上,得到人博卡病毒1型感染性克隆。本发明的人博卡病毒1型感染性克隆,可用于制备基因治疗载体。酶切去除人博卡病毒1型感染性克隆的人博卡病毒基因1505nt‑4138nt,插入含启动子、外源基因的DNA片段,获得基因治疗载体。本发明构建的人博卡病毒1型感染性克隆可在细胞上有效复制,构建的人博卡病毒基因治疗载体可表达外源蛋白并对肿瘤细胞有杀伤效应。
- 一种靶向wnt信号通路溶瘤腺病毒的构建方法-201611091529.4
- 王毅刚;章健;金槿;马步云;李强;来维洁 - 浙江理工大学
- 2016-12-01 - 2019-08-13 - C12N7/01
- 本发明提供了一种靶向wnt信号通路溶瘤腺病毒的构建方法,包括将启动子插入pXC2‑Δ24中并连接到质粒中,酶切;将TSLC1基因与质粒连接,将连接产物与DH5α感受态细胞混合,酶切;将上述两个步骤得到的终产物连接,转化到含有全序列腺病毒骨架的质粒大肠杆菌中重组,产生E1A区由启动子控制代替E1A内源启动子的以及缺失E1A‑CR2区的24碱基的腺病毒骨架DNA质粒;腺病毒骨架DNA质粒用pacⅠ酶切线性转化后,转染到293A细胞中病毒包装,病变后,得到溶瘤腺病毒Ad.wnt‑E1A(Δ24)‑TSLC1。采用本发明的构建方法得到的溶瘤腺病毒对结肠癌细胞和肝癌细胞具有明显的杀伤效果。
- 重组腺病毒、和四价腺病毒疫苗及其制备方法-201610898984.9
- 田新贵;周荣;蒋再学;马强;李潇;周志超 - 广州呼研所医药科技有限公司;广州呼吸疾病研究所
- 2016-10-14 - 2019-08-09 - C12N7/01
- 本发明公开了一种重组腺病毒、和四价腺病毒疫苗及其制备方法,所述四价重组腺病毒疫苗,包括重组3型腺病毒株、重组7型腺病毒株、重组14型腺病毒株、以及重组55型腺病毒株。本发明首先通过制备包含不同六邻体基因片段在内的重组穿梭质粒,与重组人3型腺病毒基因组进行细菌内同源重组,获得六邻体基因片段被替换为7型、14型、55型的重组腺病毒基因组,转染细胞后拯救得到主要衣壳蛋白‑六邻体蛋白不同的重组人3型、7型、14型、55型重组腺病毒。纯化后按相同蛋白质含量混合,再用β‑内丙脂进行灭活,得到四价腺病毒疫苗,该四价腺病毒疫苗可以诱导出对四种血清型腺病毒的中和抗体应答,中和效价均为500‑1000。
- 专利分类