[发明专利]检测酱油中大豆转基因成分的试剂盒及其使用方法

摘要

本发明公开了一种检测酱油中大豆转基因成分的试剂盒及其使用方法。本发明所述试剂盒包含酱油DNA提取试剂和PCR检测引物。本发明使用盐酸胍和CTAB法相结合的方式，有效地去除蛋白质和多糖等杂质，从而能从酱油中得到纯度较高的DNA，为PCR检测奠定良好基础。同时本发明以1个大豆内源基因和3个外源基因为检测对象，成功建立起四重PCR法，一次扩增就可以同时检测出酱油中的全部转基因成分，以大豆内源基因为参照，使检测结果更为容易判断和可靠。此试剂盒不仅适用于酱油的DNA提取，也可应用于大豆制品中转基因成分的检测，应用范围广。本发明中的四重PCR法是多重PCR检测转基因产品技术的又一创新，特异性强。

主权项

1、一种检测酱油中转基因大豆成分的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒由酱油DNA提取试剂和PCR检测引物；所述酱油DNA提取试剂由溶液I、溶液II、溶液III、溶液IV和溶液V组成；溶液I为pH 8.0，100mmol/L的三(羟基)氨基甲烷盐酸盐溶液；溶液II为DNA提取缓冲液，内含pH8.0、20mmol/L的乙二胺四乙酸、500mmol/L的NaCl和质量体积比为1.5％的十二烷基硫酸钠；溶液III包含质量体积比为2％的十六烷基三甲基溴化铵和体积百分比为0.2％的β-巯基乙醇；溶液IV为1.5mol/L的盐酸胍溶液；溶液V为20μg/ml的蛋白酶K溶液；所述PCR检测引物由检测大豆内标基因的引物与检测转基因外标基因的引物组成。