[发明专利]可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法有效
申请号: | 200910112854.8 | 申请日: | 2009-11-12 |
公开(公告)号: | CN101705219A | 公开(公告)日: | 2010-05-12 |
发明(设计)人: | 倪辉;蔡慧农;肖安风;李利君;杨远帆 | 申请(专利权)人: | 集美大学 |
主分类号: | C12N9/66 | 分类号: | C12N9/66;C12R1/125 |
代理公司: | 厦门市新华专利商标代理有限公司 35203 | 代理人: | 渠述华 |
地址: | 361021 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明公开了一种新型蛋白酶的生产方法,用该方法生产出的蛋白酶具有较强的弹性蛋白酶活性,能高效地水解淡水鱼及鱼类加工下脚料。该蛋白酶的生产方法可概述为:用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期,加入从鱼鳞或鱼皮提取的胶原蛋白及triton-100,将发酵温度提高2-3℃,继续发酵16h,弹性蛋白酶活力可达到650U/mL,总蛋白酶活力可达到2216U/mL;提取蛋白酶并制成粉状酶制剂,该酶制剂的总蛋白酶活力为1.8万U/g,弹性蛋白酶活力为5423U/g;用该蛋白酶制剂对淡水鱼及鱼类加工下脚料进行水解,可大大提高水解效率。 | ||
搜索关键词: | 高效 水解 淡水鱼 鱼类 下脚料 蛋白酶 生产 方法 | ||
【主权项】:
一种可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶的生产方法,其工艺步骤包括:(1)菌种活化;(2)种子制备;(3)用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期;(4)加入从鱼鳞或鱼皮中提取的胶原蛋白诱导蛋白酶的产生,添加triton-100并提高发酵温度促进蛋白酶的分泌,这样可以在短期内产生大量的蛋白酶,该蛋白酶具有很强的弹性蛋白酶活性;(5)蛋白酶的分离与制剂。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于集美大学,未经集美大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/200910112854.8/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:渣处理滚筒在线移出支撑装置
- 下一篇:舞台卷扬机
- 同类专利
- 重组的弹性蛋白酶蛋白质及其制备方法和用途-201410767370.8
- F·N·弗兰纳诺;K·布兰德;M·D·翁;B·C·丁 - 普罗特昂治疗公司
- 2008-12-04 - 2019-06-11 - C12N9/66
- 本发明涉及制备、纯化、配制生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的方法及所述生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的用途。描述了制备治疗学有用的弹性蛋白酶蛋白质的重组方法及含所述弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物。还公开了新的重组弹性蛋白酶蛋白质及蛋白质制剂。描述了使用含本发明的弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物治疗和预防生物管道疾病的方法。
- 重组的弹性蛋白酶蛋白质及其制备方法和用途-201410187187.0
- F·N·弗兰纳诺;K·布兰德;M·D·翁;B·C·丁 - 普罗特昂治疗公司
- 2008-12-04 - 2017-10-03 - C12N9/66
- 本发明涉及制备、纯化、配制生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的方法及所述生物学上有活性的重组弹性蛋白酶蛋白质的用途。描述了制备治疗学有用的弹性蛋白酶蛋白质的重组方法及含所述弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物。还公开了新的重组弹性蛋白酶蛋白质及蛋白质制剂。描述了使用含本发明的弹性蛋白酶蛋白质的药物组合物治疗和预防生物管道疾病的方法。
- 一种制备弹性蛋白酶的方法-201310615991.X
- 刘乃山;张晓涵;刘君;李静洁 - 青岛康原药业有限公司
- 2013-11-23 - 2014-03-26 - C12N9/66
- 本发明公开了一种制备弹性蛋白酶的方法。本发明的技术方案是将动物胰脏经过绞碎,灵活运用胰酶水解、丙酮沉淀、磷酸缓冲液盐溶、硫酸铵盐析等现代蛋白纯化技术,制备弹性蛋白酶。本发明操作简单、成本低,非常适用于规模化大生产。
- 一种利用微生物液态发酵生产弹性蛋白酶酶制剂的方法-201310398828.2
- 高兆建;张桂英;张建萍;侯进慧;陈尚龙;张从省 - 徐州工程学院
- 2013-09-05 - 2014-03-12 - C12N9/66
- 发明涉及一种利用微生物液态发酵生产弹性蛋白酶酶制剂的方法,其特征在于选用地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis)ELAT4(CGMCC5700)作为弹性蛋白酶生产的菌种,经地衣芽孢杆菌菌种活化、种子液制备、发酵液培养、深层液体通风发酵和弹性蛋白酶酶制剂成品制备步骤,而制得弹性蛋白酶酶制剂。本发明制得的液体酶活力达到352U/ml、固体酶制剂酶活力达到2512u/g。本发明具有提高产弹性蛋白酶的效率、增强弹性蛋白酶的活性和降低生产成本的优点,且生产过程无废固物处理问题,对环境无污染。本发明适用于大批量生产弹性蛋白酶。
- 通过单点突变缺失结构中的盐键提高PAE酶活的方法-201310368569.9
- 边斐;毕玉平;彭振英;杨连群;于金慧;宣宁;张燕 - 山东省农业科学院生物技术研究中心
- 2013-08-21 - 2013-12-18 - C12N9/66
- 本发明提供一种通过单点突变缺失结构中的盐键提高PAE酶活的方法。利用定点突变技术,通过缺失催化腔附近的单个盐键,将形成盐键3的Asp201-Arg205中的Asp201定点突变为Ala,构建突变体D201A,提高了PAE的活力。本发明不但对揭示M4家族金属蛋白酶的结构和功能关系具有重要意义,同时,由于很多M4家族蛋白酶是重要的医学、工业用酶,因此本发明对该家族蛋白酶的分子改造研究和相关新产品的开发也具有重要指导意义。
- 一种通过缺失单个盐键来提高PAE比活力的方法-201310366716.9
- 边斐;毕玉平;彭振英;马德源;杨连群;范仲学;陈高 - 山东省农业科学院生物技术研究中心
- 2013-08-21 - 2013-12-11 - C12N9/66
- 本发明提供一种通过缺失单个盐键来提高PAE比活力的方法。利用定点突变技术,通过缺失催化腔附近的单个盐键,本发明提高了PAE的活力,本发明不但对揭示M4家族金属蛋白酶的结构和功能关系具有重要意义,同时,由于很多M4家族蛋白酶是重要的医学、工业用酶,因此本发明对该家族蛋白酶的分子改造研究和相关新产品的开发也具有重要指导意义。
- 一种深海弹性蛋白酶的低成本制备方法-201310228836.2
- 张玉忠;赵慧琳;杨洁;陈秀兰;秦启龙;苏海楠;解彬彬;张熙颖;周百成 - 山东大学
- 2013-06-08 - 2013-09-25 - C12N9/66
- 本发明涉及一种深海弹性蛋白酶的低成本制备方法,步骤如下:(1)将深海细菌接种于液体种子培养基,经培养,获得种子培养液;(2)将种子培养液接种于发酵培养基,经发酵培养后,离心取上清,制得发酵液;(3)将发酵液过夜透析,离心,经DEAE-Sepharose Fast Flow层析后经梯度洗脱,取第一个洗脱峰的洗脱液,制得深海细菌弹性蛋白酶。本发明用屠宰厂副产品牛心管代替弹性蛋白,进行细菌菌株CF6-2胞外弹性蛋白酶的产酶发酵,发酵成本降低70%以上,具有很好的环境效益和社会效益。
- 基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法和该弹性蛋白酶的医药用途-201110163759.8
- 阎智慧;张楷 - 天津金斯坦生物科技有限公司
- 2011-06-17 - 2011-11-23 - C12N9/66
- 本发明公开了一种基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法和该弹性蛋白酶的医药用途,属于基因工程领域。本发明利用人中性粒细胞裂解液,取含有基因组DNA的上清液,扩增获得中性粒细胞弹性蛋白酶的基因片段ELA2,连接克隆质粒转化大肠杆菌,构建弹性蛋白酶的PET-28a-ELA2表达质粒,在大肠杆菌中表达弹性蛋白酶,收集菌体,超声裂解菌液,镍柱洗脱后获得纯化的弹性蛋白酶。这样设计的本发明,利用弹性蛋白酶的表达基因,获得足量稳定的基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶,为临床检测和试验研究提供弹性蛋白酶原料,并为制备弹性蛋白酶高效抗体提供特异性抗原。
- 可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法-200910112854.8
- 倪辉;蔡慧农;肖安风;李利君;杨远帆 - 集美大学
- 2009-11-12 - 2010-05-12 - C12N9/66
- 本发明公开了一种新型蛋白酶的生产方法,用该方法生产出的蛋白酶具有较强的弹性蛋白酶活性,能高效地水解淡水鱼及鱼类加工下脚料。该蛋白酶的生产方法可概述为:用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期,加入从鱼鳞或鱼皮提取的胶原蛋白及triton-100,将发酵温度提高2-3℃,继续发酵16h,弹性蛋白酶活力可达到650U/mL,总蛋白酶活力可达到2216U/mL;提取蛋白酶并制成粉状酶制剂,该酶制剂的总蛋白酶活力为1.8万U/g,弹性蛋白酶活力为5423U/g;用该蛋白酶制剂对淡水鱼及鱼类加工下脚料进行水解,可大大提高水解效率。
- 专利分类