[发明专利]O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒及方法无效
申请号: | 200910096030.6 | 申请日: | 2009-01-23 |
公开(公告)号: | CN101487057A | 公开(公告)日: | 2009-07-22 |
发明(设计)人: | 朱水荣 | 申请(专利权)人: | 浙江省疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人: | 黄美娟;冷红梅 |
地址: | 310051浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供了一种O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒。本发明针对O157:H7的O抗原编码rfbE、志贺样毒素stx2、H鞭毛抗原编码flic基因分别设计LAMP引物,提供一种特异性强、灵敏度高的O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒及检测方法。本发明有益效果主要体现在:(1)不需要使用昂贵、精密的仪器设备,仅需一金属裂解仪/恒温水浴装置;(2)耗时短,在恒温条件下进行反应,1小时左右即可完成;(3)白光下通过肉眼目测反应体系颜色变化即可进行结果判断,操作简便;(4)本发明方法简易、快速、特异、敏感,在快速检测方面有着较为广泛的应用前景。 | ||
搜索关键词: | o157 h7 大肠菌 环介导 等温 扩增 快速 检测 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
1. O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒,主要包括特异性扩增引物、Bst DNA聚合酶、脱氧核糖核苷酸混合物、PCR缓冲液,其特征在于:所述特异性扩增引物序列如下:rfbE FIP:CTCTCTTTCCTCTGCGGTCCGATGTTTTTCACACTTATTGGAT;rfbE BIP:TAAGGAATCACCTTGCAGATAAACTAGTACATTGGCATCGTGT;rfbE F3:AACAGTCTTGTACAAGTCCA;rfbE B3:GGTGCTTTTGATATTTTTCCG;rfbE LB:CGAAACAAGGCCAGTTTTTTACC;stx2 FIP:GGTTAATAACAGACACCGATGTGGACAGAGATATCGACCCCT;stx2 BIP:TAAGGAATCACCTTGCAGATAAACTAGTACATTGGCATCGTGT;stx2 F3:GTCTCTTCGTTAAATAGTATACGG;stx2 B3:GGCCACATATAAATTATTTTGCTC;flic FIP:GCCGGATACGCGGTCAATTTCACTCCGATTCTGACCTGGACT;flic BIP:TGAACGTGCTGGCGAAAGACGTTTCAGGTCGATCGTGATGG;flic F3:GAACTGACGGTTCAGGCC;flic B3:AGCCATTCAGACCCAGAGT。
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