[发明专利]含Kringle 5基因的工程菌的发酵工艺以及纯化Kringle 5蛋白的工艺无效
| 申请号： | 200810150872.0 | 申请日： | 2008-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN101671713A | 公开（公告）日： | 2010-03-17 |
| 发明（设计）人： | 边六交;党红艳;杨晓燕;陈超 | 申请（专利权）人： | 陕西北美基因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/22;C07K1/18;C07K14/435;C12R1/19 |
| 代理公司： | 西安智邦专利商标代理有限公司 | 代理人： | 徐 平 |
| 地址： | 710069陕西省西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及含Kringle 5基因的工程菌的发酵工艺以及纯化Kringle 5蛋白的工艺，确定了适宜于重组工程菌生长和Kringle 5蛋白表达的最佳培养基，通过正交实验方法，对其重组菌的发酵条件进行了优化；并对发酵后的Kringle5蛋白采用金属亲和层析、阳离子交换层析二步法进行纯化，在带有梯度洗脱并同时能显示紫外和电导参数装置的高、中、低层析仪上进行；活性检测用抑制鸡胚绒尿囊膜新生血管生长的试验。本发明明显提高了Kringle 5蛋白的表达量，可以方便、快速地纯化Kringle 5蛋白，其纯度和生物活性均可达到要用标准。本发明生产工艺简单，回收率高，并可线性放大到工业规模化生产。 | ||
| 搜索关键词： | kringle 基因 工程 发酵 工艺 以及 纯化 蛋白 | ||
【主权项】：
1、含Kringle 5基因的工程菌的发酵工艺是，其特征在于：设计了15种不同的发酵培养基，在摇瓶培养方式下，通过测定工程菌在15种培养基中的比生长速率和目的蛋白kringle5的表达量，确定了适宜于工程菌生长和目的蛋白表达的培养基；采用优化后的培养基，通过正交试验，确定了最佳的发酵工艺；按照摇瓶培养优化后的条件，在micro DCU-400型20L自控罐中进行分批培养，确定了最佳的溶氧范围大约为40％。
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