[发明专利]谷胱甘肽冻干粉的制备方法

摘要

一种谷胱甘肽冻干粉的制备方法，涉及用反胶束萃取法制备还原型谷胱甘肽(GSH)冻干粉的方法。本发明方法以面包干酵母为原料，先制备含GSH的提取液及P₂₀₄反胶束溶液，后通过反胶束溶液对GSH提取液进行萃取，再用氯化钠溶液对萃取后的反胶束溶液进行反萃取，然后经过超滤、冷冻干燥制备出成品。本发明方法简单，制备条件温和，反萃取后的反胶束溶液可以再生利用，生产成本低；制备出的冻干粉中，GSH含量高达95.2％、回收率高达86.3％，并能制备出复合氨基酸浓缩液副产物。采用本发明制备出的GSH冻干粉，可广泛用作药物原材料、食品工业中的抗氧化保鲜剂和风味添加剂，还可用作饲料添加剂和面包酵母培养基等。

主权项

1.一种谷胱甘肽冻干粉的制备方法，其特征在于具体的方法步骤如下：(1)GSH提取液的制备以面包干酵母为原料，按照面包干酵母的重量∶蒸馏水的体积∶二甲苯的体积比为1∶2～3∶0.03～0.05的比例，先在面包干酵母中加入蒸馏水，搅拌混合均匀，再加入二甲苯，并搅拌混合均匀后，置于摇床上振荡5～8小时，然后再加入与混合液等体积的蒸馏水，再进行抽滤，弃滤渣，收集滤液，对滤液用稀盐酸调节pH值为1.0～3.0，然后，加入氯化钠固体，搅拌混合均匀，制备出氯化钠的摩尔浓度为0.05～0.2mol/L的还原型谷胱甘肽提取液；(2)反胶束溶液的制备以磷酸二辛酯为萃取剂，以正辛醇为稀释剂，将P204加入正辛醇中，搅拌均匀后，配制出P204的摩尔浓度为0.1～0.2mol/L的P204溶液，然后按P204溶液的P204∶蒸馏水的摩尔比为1∶5～20的比例，在P204溶液中加入蒸馏水，搅拌0.5～1.5小时；(3)萃取在第(1)步和第(2)步完成后，按第(1)步制备出的GSH提取液∶第(2)步制备的P204反胶束溶液的体积比为1∶2～4的比例，先将GSH提取液和P204反胶束溶液置于萃取器中，然后进行搅拌萃取10～45min，再用离心机以7000～9000r/min的速度，对其进行离心分离5～15min后，静置分层，分别收集上层反胶束相和下层水相，然后再次在收集的水相中，加入2～4倍体积的第(2)步制备出的P204反胶束溶液，再次进行萃取和离心分离，再次分别收集下层水相和上层反胶束相，如此重复萃取2～4次，最后合并各次收集的上层萃取有GSH的反胶束溶液；(4)反萃取第(3)步完成后，按第(3)步最后收集的萃取有GSH的反胶束溶液∶氯化钠的摩尔浓度为0.05～0.2mol/L的氯化钠溶液的体积比为1∶2～4的比例，先将萃取有GSH的反胶束溶液置于萃取器中，再加入氯化钠溶液，搅拌混合均匀，最后用氢氧化钠溶液调节其pH值为10.0～12.0，进行搅拌反萃取35～65min，再用离心机以7000～9000r/min的速度，对其进行离心分离5～15min，静置分层后，分别收集下层水相和上层反胶束相，然后，再次在收集的反胶束相中，再次加入2～4倍体积的氯化钠溶液，再次调节pH值，再次进行反萃取和离心分离，再次分别收集下层水相和上层反胶束相，如此重复反萃取2～4次，最后，分别合并各次收集的反萃取有GSH的下层水相和反萃取后的上层反胶束相；(5)制备GSH浓缩液第(4)步完成后，将第(4)步最后收集的反萃取有GSH的下层水相，置于截留分子量为1000的超滤器中，在压力为0.1～0.25Mpa下，进行超滤，当超滤截留液体积降低至原体积0.1～0.2时，补充蒸馏水至原体积，再进行超滤，如此重复，直至超滤滤过液中无氨基酸反应为止，再分别收集超滤截留液和超滤滤过液，然后将收集的超滤截留液，置于真空浓缩器中，在温度为60～70℃、真空度为0.06～0.08Mpa的条件下，进行真空浓缩，对收集的超滤滤过液，通过真空浓缩器，进行真空浓缩为复合氨基酸浓缩液；(6)制备GSH冻干粉在第(5)步完成后，将第(5)步制备出的GSH浓缩液，在-20～-15℃温度下，预冻1～2小时后，再置于冷冻干燥机中，在压力为30～50Pa、温度为-60～-50℃条件下，冷冻干燥20～30小时，就制备出白色的GSH冻干粉；(7)再生萃取剂在第(6)步完成后，在第(4)步最后收集的反胶束溶液中，加入无水硫酸钠干燥剂，加入的无水硫酸钠的质量为收集的反胶束溶液体积的2～5％，混合均匀后，静置吸水20～30小时，再用离心机以4000～6000r/min的速度，离心分离10～20min，分别收集上层萃取剂清液和下层沉淀，对收集的下层沉淀，在100～110℃下进行烘干。