[发明专利]一种利用细菌纤维素膜做载体固定化白腐真菌的方法

摘要

一种利用细菌纤维素膜做载体固定化白腐真菌的方法，由以下步骤组成：白腐真菌的分离及其孢子液的制备、细菌纤维素膜的制备、细菌纤维素膜的改性处理和固定化细胞的制备。细菌纤维素膜用环氧氯丙烷、无水乙醇和高氯酸等处理后，以得到的改性细菌纤维素膜为载体与25％戊二醛溶液反应，经反复洗涤等处理，与白腐真菌孢子液混合，密封，4℃过夜，再反复洗涤，即得细菌纤维素膜固定化白腐真菌，经对木糖醇生产废水中有机物及色度连续3批处理试验表明，其处理效果未见明显下降，具有显著的稳定性。

主权项

1、一种利用细菌纤维素膜做载体固定化白腐真菌的方法，是由如下的过程和步骤组成：(1)白腐真菌White rot fungi的分离及孢子液的制备A. 白腐真菌的分离：取腐木2g加入灭菌后的100mL液体培养基中，置于生化培养箱中30℃恒温培养，随时观察培养基中菌的生长状况；所述的液体培养基中各组分占液体培养基质量用量百分比分别为：KH2PO4 0.02％，MgSO4·7H2O 0.005％，CaCl2 0.001％，葡萄糖1％，NH3Cl 0.02％，H2O2 0.05％，酒石酸钠0.028％，琥珀酸钠0.054％，马铃薯提取液为液体培养基体积的0.05％，其中马铃薯提取液为200g马铃薯在1L蒸馏水中煮沸30分钟后，用16层纱布过滤掉不溶物制得；121℃灭菌30分钟；48小时后，取该培养液10mL重复进行富集培养，经3次富集培养后，取最终富集液在固定培养基平板上进行涂布培养；所述的固体培养基中各组分占固体培养基质量用量百分比分别为：葡萄糖2％，KH2PO4 0.3％，MgSO4·7H2O 0.15％，维生素B1 0.0005％，琼脂1.2％，马铃薯提取液占固体培养基体积用量百分比为80％；121℃灭菌30分钟；24小时后，在平板上挑取白色绒形的菌种进行划线分离，待出现白色菌丝后，挑取单个菌落再划线分离，直至重复得到纯的单菌株，斜面保存，备用；