[发明专利]一种生物保鲜菌剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用于水果蔬菜的生物保鲜菌剂及其制备方法。所说的生物保鲜菌剂的制备方法是：(1)从新鲜的乙烯跃变性果实中筛选得到能利用ACC的菌株；(2)将上述(1)得到的菌株用抗利福平标记方法，通过回接再分离选取能在果实或蔬菜植株内部和表面能定值的菌株；(3)纯化上述(2)筛选到的菌株ACC脱氨酶的酶活，选取酶活单位在0.2U/mg以上的菌株，再经2－3次反复回接再分离和ACC脱氨酶酶活测定，选其中酶活性和定植性保持不变的菌株即为目标菌株；(4)将上述(3)筛选得到的菌株，经菌种复壮等步骤得到果蔬生物保鲜菌剂。通过本发明的方法，能获得果蔬保鲜菌剂，能有效延缓果实成熟，增加蔬菜水果的保藏期。

主权项

1、一种生物保鲜菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)果蔬内生酶活菌的获得：取新鲜的乙烯跃变性的果实，表面消毒后取果皮和果肉相连部分，在无菌匀浆器中研磨成浆液，用无菌水稀释，稀释液在富积假单胞菌的PAF培养基中富积培养，富积培养后的细菌转接到以ACC为唯一氮源的ADF培养液中培养，然后稀释分离所有能利用ACC的细菌，并纯化菌株；(2)定植菌株的筛选：上述(1)得到的菌株用抗利福平标记方法，通过回接再分离选取能在果实或蔬菜植株内部和表面定值7天达105cfu/mL以上的菌株；(3)具有ACC脱氨酶酶活高的菌株的获得：分别纯化上述(2)筛选到的菌株，测定各个菌株的ACC脱氨酶的酶活，选取酶活单位在0.2U/mg以上的菌株，再经2-3次反复回接再分离和ACC脱氨酶酶活测定，选择其中酶活性和定植性保持不变的菌株即为目标菌株；(4)将上述(3)筛选得到的菌株，经菌种复壮及一级菌种、二级菌种、种子罐、发酵罐培养，再离心收集菌体、冷冻干燥等步骤得到果蔬生物保鲜菌剂。