[发明专利]一种家蚕微粒子病的核酸分子杂交检测方法无效
| 申请号： | 01138357.7 | 申请日： | 2001-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN1428437A | 公开（公告）日： | 2003-07-09 |
| 发明（设计）人： | 白燕川;秦启联;赵力宾 | 申请（专利权）人： | 成都天友生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉科宏专利事务所 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种家蚕微粒子病的核酸分子杂交检测方法。该方法采用核酸分子杂交技术，提取家蚕微孢子虫的DNA，通过PCR，将PCR产物克隆到重组载体质粒中，用N.B.PCR产物经DIG标记制成分子探针，采用DNADotblot检测家蚕微粒子病病原孢子。本发明所提取的各种微孢子虫基因组质量好、含量高，所设计的引物为N.B.孢子所特有，引物与模板DNA特异性高度吻合，检测准确率＞98％，可在家蚕微粒子原孢子的早期，快速、定性、定量地进行检测，是一种方便、高效、准确的检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 家蚕 微粒子 核酸 分子 杂交 检测 方法 | ||
【主权项】：
1、一种家蚕微粒子病的核酸分子杂交检测方法，其特征在于，该方法采用蛋白酶K苯酚氯仿抽提法提取家蚕微孢子虫的DNA，测定其特异DNA片断，合成引物，通过聚合酶联反应(PolymeraseChainreaction，简称PCR)扩增得到PCR产物，将PCR产物微孢子虫特异DNA序列克隆到带有SP6噬菌体的启动子pGEN-3Z重组载体质粒中，经过重组质粒序列分析，用家蚕微孢子虫孢子(Nosemabombycis，简称N.B.)PCR产物(217bp，即217个碱基对)经异羟基洋地黄毒苷(即地高辛，Digoxigenin，简称DIG)标记制成分子探针，采用点杂交法(DNADotblot)检测家蚕微粒子病病原孢子。
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