本发明公开了雄性不育基因ZmSWEET6及其在创制玉米雄性不育系中的应用，ZmSWEET6包括2个旁系同源基因，分别具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，编码的蛋白质具有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示氨基酸序列。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在野生型玉米中同时定点突变ZmSWEET6的旁系同源基因，创制了sweet6a/6b突变体，导致完全雄性不育，发现了ZmSWEET6基因对玉米雄性生殖发育的调控功能。本发明还针对获得的sweet6a/6b雄性不育突变体设计了功能分子标记，通过分子标记辅助选择筛选创制出稳定的玉米雄性不育系，对玉米雄性育性控制和杂交种子生产具有重要意义。
本发明公开了玉米ZmENR1基因及其编码蛋白在玉米育性控制中的应用。本发明通过EMS诱变获得的雄性不育突变体enr1，鉴定出一个控制玉米雄花发育的ZmENR1基因，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。进一步通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在野生型玉米中定点突变该基因，创制出三个雄花完全败育的等位突变体，对玉米育性控制和杂交种子生产具有重要意义。本发明还针对enr1的三个等位雄性不育突变体设计了功能分子标记，在玉米雄性不育系培育、不育化杂交制种和分子标记辅助选择中具有重要应用价值。
