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[发明专利]编码突变体的核酸分子、重组蛋白及其应用-CN202310397789.8在审
发明人：郭豫杰;杨国宇;潘佳佳;查光明;皇甫明明;王月影;钟凯;李和平;鲁维飞;朱河水;韩立强;王江;郭爽 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2023-04-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/57 文献下载
摘要：本发明涉及生物工程领域，尤其涉及编码突变体的核酸分子、重组蛋白及其应用。本发明提供了编码突变体的核酸分子，所述突变体包括单突变体、三突变体和/或多突变体中的一种或多种；编码所述单突变体的核酸分子经编码野生型TEV蛋白酶突变获得；编码所述三突变体的核酸分子经编码所述单突变体的核酸分子突变获得；编码所述多突变体的核酸分子经编码所述三突变体的核酸分子突变获得。本发明筛选到一条高表达TEVP的基因序列：31C‑3MP‑S219V，可极大地提高TEVP在原核细胞中的表达量，为TEV蛋白酶的高效表达和生产提供了一种经济、操作简单的方法。
编码突变体核酸分子重组蛋白及其应用

[发明专利]基于AAV病毒的基因编辑表达盒-CN201811054213.7有效
发明人：褚贝贝;杨国宇;王江;刘忠虎;汪新建;钟凯;鲁维飞;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2018-09-11 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及基因编辑领域。具体而言，本发明涉及基于AAV病毒的基因编辑表达盒。更具体而言，本发明涉及基于AAV病毒的基因编辑表达盒，以及包括所述表达盒的载体和利用所述表达盒或载体的基因编辑方法。
基于 aav 病毒基因编辑表达

[发明专利]基于AAV病毒的基因编辑表达盒-CN201811054096.4在审
发明人：褚贝贝;杨国宇;王江;刘忠虎;汪新建;钟凯;鲁维飞;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2018-09-11 - 公布日： 2020-03-17 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及基因编辑领域。具体而言，本发明涉及基于AAV病毒的基因编辑表达盒。更具体而言，本发明涉及基于AAV病毒的基因编辑表达盒，以及包括所述表达盒的载体和利用所述表达盒或载体的基因编辑方法。
基于 aav 病毒基因编辑表达

[发明专利]构建多sgRNA表达载体的方法-CN201811054251.2在审
发明人：褚贝贝;杨国宇;王江;刘忠虎;汪新建;钟凯;鲁维飞;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2018-09-11 - 公布日： 2020-03-17 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及基因编辑领域。具体而言，本发明涉及构建多sgRNA表达载体的方法。更具体而言，本发明涉及通过同源重组构建包含串联的靶向不同基因组位点的N个sgRNA的表达载体的方法。
构建 sgrna 表达载体方法

[发明专利]一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法-CN201510389502.2有效
发明人：杨国宇;舒静超;王月影;耿娟;李和平;朱河水;钟凯;鲁维飞;韩立强;王江;申欢欢;刘起涛 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2015-07-06 - 公布日： 2019-03-15 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为，在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时，通过基因工程手段，在口蹄疫蛋白的C端增加His6‑MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性；所述His6表示6个组氨酸标签，MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比，表达量有较为明显提高，同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白（MBP），所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显，因而具有较好的推广应用价值。
一种提高免疫口蹄疫蛋白可溶性方法

[发明专利]一种猪akirin2基因启动子及其应用-CN201410204418.4有效
发明人：郭豫杰;杨国宇;高会贞;王月影;钟凯;鲁维飞;韩立强;张超 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2014-05-12 - 公布日： 2016-10-26 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用，其核苷酸序列如SEQ：ID：1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明提供寡核苷酸引物序列、克隆载体、表达载体、转化的宿主、外源蛋白表达的方法。这些为进一步开展猪akirin2基因在猪的肌卫星细胞及其他相关细胞中调控的研究提供了基础，同时可用于哺乳动物细胞中进行外源蛋白的表达及转基因研究。
种猪 akirin2 基因启动子及其应用

[实用新型]一种组织采样器-CN201520447041.5有效
发明人：王林枫;杨改青;杨国宇;侯晗琦;朱超;王腾飞;郭晶晶;张绡绡;朱河水;王月影;韩立强;鲁维飞;钟凯;郭豫杰;李宏基 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2015-06-26 - 公布日： 2015-11-18 - 主分类号： G01N1/02 文献下载
摘要：本实用新型提供一种组织采样器，包括沿前后方向延伸的针芯采样组件，针芯采样组件具有设置于前端的采样部，组织采样器还包括用于随采样部一同进入采样体中的观察定位装置，观察定位装置包括用于照射采样体的待采集区域的照明装置和用于采集所述待采集区域图像的摄像头，所述组织采样器还包括用于显示摄像头采集图像以供使用者观察的显示屏。在进行活体采样时，观察定位装置随针芯采样组件一同进入采样体中，照明装置打开，摄像头采集图像传输至显示屏上，以供使用者确认采样位置。由于在采样时可利用摄像头确保采样目标位置和深度，这样可以避免出现错采和漏采的问题，进而可以提高采样正确性。
一种组织采样

[发明专利]一种用于DisA表达的pEX-MBP重组质粒-CN201410525823.6在审
发明人：杨国宇;郭准;王江;王月影;郭豫杰;李和平;朱河水;钟凯;鲁维飞;韩立强;耿娟 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2014-10-09 - 公布日： 2015-01-21 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，涉及一种DisA表达过程中所使用的重组质粒pEX-MBP及其制备。所述pEX-MBP重组质粒的碱基序列如序列表所示。该重组质粒是在pBbB3a-GFP的基础上改造而成的。将该重组质粒用于制备可溶性的DisA蛋白时，以丙酸钠作为诱导剂。本发明所提供的pEX-MBP重组质粒，特异性的用于DisA蛋白的表达纯化，与传统的pET28α（+）载体所构建的重组质粒表达体相比，所表达的DisA蛋白可溶度较高；其次所构建的表达系统以丙酸钠作为诱导剂，成本低廉，而且对细菌没有毒性，因而适于表达DisA蛋白，且表达后的蛋白可特异性的切除相关标签蛋白，获得的DisA蛋白纯度较高。
一种用于 disa 表达 pex mbp 重组质粒

[发明专利]一种用于细胞永生化的真核重组微环表达载体-CN201410525855.6在审
发明人：王月影;张君;杨国宇;李和平;钟凯;朱河水;郭豫杰;鲁维飞;韩立强;张超;焦显芹 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2014-10-09 - 公布日： 2015-01-21 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种细胞永生化过程中所使用的真核重组微环表达载体Minicircle-MRPS18及其制备方法。该载体由微环质粒与猪的MRPS18基因重组构建，其碱基序列如序列表所示。该载体通过Tubofect试剂转染法转染Hela细胞可制备永生化细胞。本发明特异性的结合了Minicircle质粒载体与MRPS18基因的优点，所制备的真核重组微环表达载体，具有转基因持续表达时间长；不会引起真核细胞的应激非病毒式诱导系统，低免疫源性，安全稳定的优点；且该质粒表达载体表达GFP，便于跟踪反应；同时具备转染效率高、简单易用等优点，可以获得较好的永生化细胞制备效果。
一种用于细胞永生重组表达载体

[实用新型]一种剥离式长期血管瘘及其套针-CN201320310148.6有效
发明人：王林枫;杨国宇;朱河水;杨改青;王月影;韩立强;鲁维飞;钟凯;郭豫杰;李宏基 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2013-05-31 - 公布日： 2013-12-04 - 主分类号： A61B5/153 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种剥离式长期血管瘘及其套针，血管瘘包括轴线沿前后方向延伸的采血管，所述采血管的外周面上套设有沿采血管轴向导向滑动的套针，套针包括与采血管滑动配合的呈管状的套针本体，套针本体的前端具有由斜切口端面形成的、用于刺破血管壁的针尖，套针本体上还具有对套针施加前后移动的作用力的施力部。该结构的血管瘘，由于采血管在套针退出之前进入到血管内，采血管与套针之间具有动作的连续性，能够保证采血管快速、准确插入到血管内。
一种剥离长期血管及其

[发明专利]一种合成β-丙氨酰-牛磺酸的工艺-CN201210146445.1无效
发明人：杨国宇;韩立强;李卫华;郭豫杰;鲁维飞;李宏基;王月影;王林枫;朱河水 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2012-05-14 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： C07C309/15 文献下载
摘要：本发明提供了一种合成β-丙氨酰-牛磺酸的工艺，包括以下步骤：1)邻苯二甲酰基-β-丙氨酸(Pht-β-Ala)的合成2)邻苯二甲酰基-β-丙氨酰-牛磺酸(Pht-β-Ala-Tau)的合成；3)β-丙氨酰-牛磺酸(β-Ala-Tau)的合成；将步骤2)得到的产物用水合肼室温放置2天脱除N-Pht-β-Ala-Tau的保护基，得到β-Ala-Tau。本发明工艺中用到的混合酸酐法反应迅速、操作简单、耗费时间相对缩短，所用试剂都能容易买到而且价格也较低。
一种合成丙氨酰牛磺酸工艺

[实用新型]组织采样器-CN201120091707.X无效
发明人：王林枫;杨国宇;张宏阳;杨改青;朱河水;李宏基;王月影;韩立强;钟凯;鲁维飞;郭豫杰;李琳 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2011-03-31 - 公布日： 2011-11-09 - 主分类号： A61B10/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种组织采样器，包括针芯及其外套设的针管，所述的针芯包括针头、组织取样段和拉杆，所述的针头、组织取样段和拉杆依次同轴连接，所述的组织取样段的外周面上开设有用于组织取样的凹槽，所述的针管临近针头一端的环形端面上沿针管长度延伸方向设置有刀刃，所述的刀刃上设有用于组织切割的工作段，所述的工作段的刀刃的延长线或刀刃延长线的切线与所述凹槽的槽沿间有夹角，且夹角不为0°，本实用新型通过斜刃剪切原理解决了现有组织采样器采样效果不理想的问题。
组织采样

[实用新型]自控复合血管瘘-CN201120080869.3无效
发明人：王林枫;杨国宇;杨改青;王月影;朱河水;钟凯;韩立强;鲁维飞;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2011-03-24 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： A61B5/153 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种自控复合血管瘘，该血管瘘包括管体，管体前端设有入血孔，且管体的外壁上还设有用于夹持血管壁的夹持机构，所述夹持机构包括在管体上前后套装的防脱件、止推件，防脱件与止推件之间连接有滑动设于管体上的连接滑套，所述防脱件是前端固连于管体外壁靠近入血孔处并与管体密封、后端固连于连接滑套并与连接滑套密封的变形套，防脱件具有在受到连接滑套施加的向前作用力下沿管体径向向外隆起变形时形成的前段筒体和后段筒体，所述防脱件前段筒体和后段筒体均为一体相接的软质材料，所述止推件为连接在连接滑套后端的用于与血管壁止推配合的套状结构。该血管瘘非常方便地将血管瘘固定在血管壁上，降低了固定瘘管的难度，缩短了手术时间，减小了对动物的创伤。
自控复合血管

[发明专利]一种血管瘘-CN200910309775.6无效
发明人：王林枫;杨国宇;李宏基;王月影;钟凯;杨改青;朱河水;韩立强;鲁维飞;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2009-11-16 - 公布日： 2010-11-03 - 主分类号： A61B5/15 文献下载
摘要：本发明涉及一种血管瘘，包括外管，外管内设置有隔离塞，隔离塞将外管分隔为前后两个腔，前腔为入血控制腔，入血控制腔上设置有入血孔，入血控制腔的外壁设置有防脱弹性球囊，外管段上还止退穿装有止退套托，外管的后腔内穿设有防脱控制管、阀控管和采血管，防脱控制管一端与防脱弹性球囊连通、另一端悬伸于外管外且连通有防脱控制阀囊；阀控管一端位于入血控制腔另一端悬伸于外管外，阀控管位于入血控制腔内的端部连通有弹性管，阀控管的另一端连通有采血通断控制阀囊，弹性管正对入血孔；采血管的一端与入血控制腔连通另一端悬伸于外管的后腔外，采血管悬伸于外管外的端部设置有通断控制阀；采血通断控制阀囊及防脱控制阀囊内均有收涨控制液。
一种血管

[实用新型]粪尿自分离代谢笼-CN200920314804.3无效
发明人：王林枫;杨国宇;李宏基;王月影;钟凯;杨改青;朱河水;韩立强;鲁维飞;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2009-11-16 - 公布日： 2010-09-01 - 主分类号： A01K1/03 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种粪尿自分离代谢笼，包括笼体，笼体的底部为漏粪板，所述漏粪板的下方对应设置有向下倾斜的集尿盘，该集尿盘向下倾斜的末端设置有出尿口，所述集尿盘的上方对应设置有滤网槽。本实用新型的粪尿自分离代谢笼在使用时，将实验用动物圈养于该代谢笼内，动物的代谢物抓粪便及尿液从笼体底部的漏粪板直接落到滤网槽上，粪便经倾斜的滤网槽向下滚落，并最终落入收粪槽内，而尿液通过滤网槽落入集尿盘内，并向下流淌进入集尿沟后经出尿口流入收尿容器内。这样就很容易地对动物的排泄物进行分类收集取样，而不会对动物造成任何的影响，适用于所有个体大小及性别的羊，大大降低了劳动强度。
分离代谢

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