本申请涉及病毒检测的技术领域,具体公开了一种非洲猪瘟病毒P32重组蛋白、及用于非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测的试剂盒。该非洲猪瘟病毒P32重组蛋白用于特异性结合非洲猪瘟病毒抗体,其氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示;该试剂盒包括所述非洲猪瘟病毒P32重组蛋白或包括包被所述非洲猪瘟病毒P32重组蛋白的酶标反应板;该试剂盒还包括酶结合物、标准阳性对照品、标准阴性对照品、样本稀释液、浓缩洗液、底物溶液、终止液;以及该试剂盒的检测方法、判定方法和用途。本申请提供的非洲猪瘟病毒P32重组蛋白及其试剂盒,能够用于非洲猪瘟病毒抗体的检测。