本发明公开了一种表达胶原酶的大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明一种蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus R75E分泌的一种胶原酶的氨基酸序列(如SEQ ID NO:1所示)与核苷酸序列(如SEQ ID NO:2所示)。本发明提供含有上述胶原酶基因在大肠杆菌中的表达菌。本发明提供一种含有表达所述DNA分子的重组大肠杆菌,所述重组大肠杆菌是在宿主菌中导入所述的大肠杆菌重组表达载体得到的大肠杆菌菌株。本发明提供一种纯化所述重组胶原酶的方法及在降解鱼鳞中Ⅰ型胶原蛋白方面的应用。本发明的重组胶原酶,能够高效降解天然的Ⅰ型胶原蛋白纤维,效果显著,可应用于农副产品中胶原蛋白的开发利用、水产品胶原蛋白的加工与利用、医疗以及食品工业生产中胶原酶的应用。
本发明公开了一种沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体的制备方法,旨在提供一种特异性好、灵敏度高、可与沙门氏菌感染宿主细胞的过程中分泌的内源性沙门氏菌效应蛋白SopB发生特异性结合的兔源多克隆抗体的制备方法。以沙门氏菌效应蛋白SopB全长氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的从N末端第29位至第168位共计139个氨基酸如SEQ ID NO:2所示的蛋白质序列为免疫原,采用常规多克隆抗体的制备方法制备抗血清;纯化抗血清,即得沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体。本发明的方法得到了沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体,有利于对沙门氏菌效应蛋白SopB的免疫印迹分析、免疫荧光染色激光共聚焦显微观察,以及人们对肠道致病菌感染机制的深入研究。