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[发明专利]一种基于串联表达口蹄疫病毒VLP的液相阻断ELISA抗体检测试剂盒-CN202110761444.7有效
发明人：陈平;钟鑫涛;张婷婷;李娜;李楠 -专利权人：嘉铭（固安）生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明提供一种基于串联表达A型和O型口蹄疫病毒VLP的液相阻断ELISA检测试剂盒，所述检测试剂盒含有串联表达的口蹄疫病毒A型和O型病毒样颗粒(VLP)。所述的试剂盒能同时检测两种血清型抗体，并且由于其串联表达的特性，两种表达量保持一致；产量高，相对于表达口蹄疫病毒单一血清型VLP，串联表达的总产量更高，大约提升30％左右，可以有效降低生产成本。基于类病毒颗粒液相阻断的方法检测准确性高，可以定量检测；使用类病毒颗粒代替灭活病毒安全性高，有效避免了制备过程中病毒泄漏或灭活不彻底等风险；应用范围广，只要得到病毒结构蛋白基因序列，就可以开发相应的VLP检测试剂盒；生产成本低：相对于基于灭活病毒的检测方法，本发明不需要高等级的生产设施。
一种基于串联表达口蹄疫病毒 vlp 阻断 elisa 抗体检测试剂盒

[发明专利]一种非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗及其构建方法-CN202110763761.2有效
发明人： 钟鑫涛;陈平;张婷婷;李娜;王书芳;祝志刚;徐文才;郑海权 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒疫苗，所述疫苗是通过构建非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体，并经293TD37细胞包装而获得。其中，非洲猪瘟病毒的四种抗原基因分别为EP402R、EP153R、I177L和K205Rubiqutin。非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体的构建，主要通过CRISPR/cas9敲除腺病毒载体的E1、E3、E2a和E4基因，构建了E1、E4区域的穿梭质粒，分别用于表达EP402R和EP153R、I177L和K205Rubiqutin基因，从而获得全新的腺病毒载体。该载体相对于第一代腺病毒载体，增加了约3kb的载体容量，再通过293TD37细胞系进行包装，获得滴度较高的重组腺病毒，用于制作非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗。本发明可以极大地提高腺病毒载体疫苗的容量，使用在一个腺病毒载体上同时表达非洲猪瘟四个独立抗原的方式，增强对非洲猪瘟病毒的特异性免疫反应。
一种非洲猪瘟重组病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗及其构建方法-CN202110763754.2有效
发明人：陈平;李娜;张婷婷;钟鑫涛;祝志刚;张利娟;李娅芳;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒疫苗，所述疫苗是通过构建非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体，并经293TD37细胞包装而获得。其中，非洲猪瘟病毒的四种抗原基因分别为P72、B602L、P30和P54。非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体的构建，主要通过CRISPR/cas9敲除腺病毒载体的E1、E3、E2a和E4基因，构建了E1、E4区域的穿梭质粒，分别用于表达P72和B602L、P30和P54基因，从而获得全新的腺病毒载体。该载体相对于第一代腺病毒载体，增加了约3kb的载体容量，再通过293TD37细胞系进行包装，获得滴度较高的重组腺病毒，用于制作非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗。本发明可以极大地提高腺病毒载体疫苗的容量，使用在一个腺病毒载体上同时表达非洲猪瘟四个独立抗原的方式，增强对非洲猪瘟病毒的特异性免疫反应。
一种非洲猪瘟重组病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗及其构建方法-CN202110762391.0有效
发明人：祝志刚;陈平;张婷婷;钟鑫涛;李娜;张利娟;王书芳;叶宏宇 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒疫苗，所述疫苗是通过构建非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体，并经293TD37细胞包装而获得。其中，非洲猪瘟病毒的四种抗原基因分别为F317L、A151R、P34和pp62。非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体的构建，主要通过CRISPR/cas9敲除腺病毒载体的E1、E3、E2a和E4基因，构建了E1、E4区域的穿梭质粒，分别用于表达EF317L和A151R、P34和pp62基因，从而获得全新的腺病毒载体。该载体相对于第一代腺病毒载体，增加了约3kb的载体容量，再通过293TD37细胞系进行包装，获得滴度较高的重组腺病毒，用于制作非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗。本发明可以极大地提高腺病毒载体疫苗的容量，使用在一个腺病毒载体上同时表达非洲猪瘟四个独立抗原的方式，增强对非洲猪瘟病毒的特异性免疫反应。
一种非洲猪瘟重组病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种串联表达的口蹄疫病毒VLP亚单位疫苗-CN202110762463.1在审
发明人：陈平;钟鑫涛;张婷婷;李娜;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： A61K39/295 文献下载
摘要：本发明提供一种串联表达的口蹄疫病毒VLP亚单位疫苗，所述疫苗含有通过SF9真核表达系统表达的串联的口蹄疫病毒A型和O型病毒样颗粒(VLP)。所述方案能表达A‑O‑VLP‑3Cmutant，由于其串联表达的特性，一次可以同时生产两价疫苗，并且两种抗原表达量保持一致；相对于表达口蹄疫病毒单一血清型VLP，串联表达基于使用2A蛋白酶切位点链接并且共用一个3C蛋白酶的特性，减少了3C蛋白酶表达，这使串联表达的总产量更高，大约提升30％左右；安全性高，有效避免了病毒泄漏或灭活不彻底等风险；应用范围较广，只要得到结构蛋白基因序列，就可以开发相应的VLP疫苗以及串联表达多种血清型或流行株的疫苗；成本低，一次生产即可获得双价疫苗，同时本发明不需要高等级的生产设施，采用的SF9昆虫细胞生产成本也远低于哺乳动物细胞。
一种串联表达口蹄疫病毒 vlp 单位疫苗

[发明专利]一种新型黑猩猩腺病毒载体及其构建方法和应用-CN202110760033.6在审
发明人：陈平;李娜;张婷婷;钟鑫涛;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明提供了一种新型黑猩猩腺病毒载体及其构建方法和应用，具备更高的病毒滴度，并提供了其病毒滴度的测定方法；创造性地通过穿梭质粒构建了黑猩猩腺病毒环状载体，并通过CRISPR/Cas9敲除E1、E3，构建了复制缺陷型黑猩猩腺病毒载体。所述黑猩猩腺病毒载体在人群中没有预存抗体存在，E1、E3的敲除具有安全性，同时与293细胞中人类腺病毒5型E1有显著差异性，可以极大地避免恢复突变(RCA)，更具有安全性。构建的新型冠状病毒疫苗，经过几十代的传代，疫苗的稳定性很强，不引起突变，在小鼠模型中能诱导很强的体液免疫以及细胞反应。
一种新型黑猩猩病毒载体及其构建方法应用

[发明专利]一种复制缺陷型Ad29腺病毒载体及其构建方法和应用-CN202110760575.3在审
发明人：陈平;张婷婷;李娜;钟鑫涛 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明提供了一种复制缺陷型Ad29腺病毒载体及其构建方法和应用，通过构建包含复制子、抗性基因的穿梭质粒，制备Ad29腺病毒环化质粒，并通过CRISPR/Cas9技术，找到最合适的敲除位点，设计最佳的特异性靶向gRNA，特异性敲除Ad29腺病毒E1、E3基因，更高效、便利地制得复制缺陷型Ad29腺病毒载体。该腺病毒在人群中流行度小，平均中和滴度低，可用于制备新冠疫苗，稳定性强，并能诱导很强的体液免疫以及细胞免疫。
一种复制缺陷 ad29 病毒载体及其构建方法应用

[发明专利]一种非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗及其构建方法-CN202110762389.3在审
发明人：李娜;陈平;张婷婷;钟鑫涛;张风苹;张利娟;祝志刚;王暄;李娅芳;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒疫苗，所述疫苗是通过构建非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体，并经293TD37细胞包装而获得。其中，非洲猪瘟病毒的四种抗原基因分别为L8Lubiqutin、I215L、I73Rhbsag和E146L。非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体的构建，主要通过CRISPR/cas9敲除腺病毒载体的E1、E3、E2a和E4基因，构建了E1、E4区域的穿梭质粒，分别用于表达L8Lubiqutin和I215L、I73Rhbsag和E146L基因，从而获得全新的腺病毒载体。该载体相对于第一代腺病毒载体，增加了约3kb的载体容量，再通过293TD37细胞系进行包装，获得滴度较高的重组腺病毒，用于制作非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗。本发明可以极大地提高腺病毒载体疫苗的容量，使用在一个腺病毒载体上同时表达非洲猪瘟四个独立抗原的方式，增强对非洲猪瘟病毒的特异性免疫反应。
一种非洲猪瘟重组病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种口蹄疫的三价重组腺病毒疫苗及其构建方法-CN202110762443.4在审
发明人：陈平;钟鑫涛;张婷婷;李娜;祝志刚;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种口蹄疫的三价重组腺病毒疫苗及其构建方法，通过构建口蹄疫病毒三种抗原基因共表达的重组腺病毒载体，并经AY293‑6015细胞包装而获得，能同时预防三种血清型口蹄疫。通过CRISPR/cas9敲除腺病毒载体的E1、E3和E4基因，构建E1、E4区穿梭质粒，分别用于表达A‑P12A、OBY‑P12A和OXJ‑P12A‑3C‑mutant基因；三种口蹄疫病毒结构蛋白共用1个3C蛋白酶形成VLP，相对于第一代腺病毒载体，增加了约3kb的载体容量，可获得滴度较高的重组腺病毒，用于制作口蹄疫的重组腺病毒疫苗，可以极大地提高疫苗容量。在一个腺病毒载体上同时表达口蹄疫三个流行株的独立完整结构蛋白抗原的方式，能同时预防口蹄疫病毒A型、O型BY株和O型XJ株，增强对口蹄疫病毒的特异性免疫反应。
一种口蹄疫重组病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗及其构建方法-CN202110763748.7在审
发明人：张婷婷;陈平;李娜;钟鑫涛;张风苹;祝志刚;徐文才 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种非洲猪瘟病毒疫苗，所述疫苗是通过构建非洲猪瘟病毒四种抗原基因共表达的重组腺病毒载体，并经293TD37细胞包装而获得。所述四种抗原基因分别为C129Rubiqutin、MGF5L6L、CP312R和MGF110‑4L。该载体的构建，主要通过CRISPR/cas9敲除腺病毒载体的E1、E3、E2a和E4基因，构建了E1、E4区域的穿梭质粒，分别用于表达C129Rubiqutin和MGF5L6L、CP312R和MGF110‑4L基因，从而获得全新的腺病毒载体。该载体相对于第一代腺病毒载体，增加了约3kb的载体容量，再通过293TD37细胞系进行包装，获得滴度较高的重组腺病毒，用于制作非洲猪瘟的重组腺病毒疫苗。本发明可以极大地提高腺病毒载体疫苗的容量，使用在一个腺病毒载体上同时表达非洲猪瘟四个独立抗原的方式，增强对非洲猪瘟病毒的特异性免疫反应。
一种非洲猪瘟重组病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种快速检测猪腺病毒的试剂以及方法-CN201711030142.2有效
发明人：陈平;李娜;钟鑫涛;张婷婷;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2017-10-30 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供一用于检测样本中猪腺病毒的试剂，其中，该试剂包括如下引物对，所述的引物为上游引物：（5’—3’）ATCTTGAAATCACAATTCTTCTG；下游引物：（5’—3’）CAAGGAGCAGYTGGTGGAG，Y为简并引物，为T或C；以及利用该试剂检测猪腺病毒的方法；这样的试剂或者方法检测猪腺病毒特异性强，灵敏度高，可以快速检测猪的腺病毒。
一种快速检测病毒试剂以及方法

[发明专利]一种腺病毒快速纯化方法-CN201910046551.4在审
发明人：陈平;钟鑫涛;李娜;孙东杰;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2019-01-18 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明属于病毒制备技术领域，具体涉及一种腺病毒的小规模（微量）快速纯化方法。本发明通过采用切向流超滤系统来降低病毒液中的污染性核酸酶的浓度，其中，所述的切向流超滤系统为Sartorius公司的Vivaspin超滤离心管。本发明所述方法经过有限次数的超离能够有效去除病毒液中的核酸酶，使得病毒回收率和所得到的病毒DNA纯度更高，具有所需设备简单、纯化周期短的优点。
一种病毒快速纯化方法

[实用新型]一种密封培养皿的底座-CN201721484806.8有效
发明人：陈平;李娜;钟鑫涛;张婷婷;李楠 -专利权人：嘉兴安宇生物科技有限公司
申请日： 2017-11-09 - 公布日： 2018-06-08 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：一种若干个密封培养皿的底座，包括基底和多个培养皿，其特征在于，所述基底包括底区、配合区和基台，所述底区位于基底的最下层，在底区的侧面设有防滑带，所述配合区位于底区的上方，所述基台位于基底的上表面，所述培养皿包括容器体、溢流槽和凸台，容器体位于基底内部，容器体的下端面高于基底的下端面，容器体的上端面低于配合区的上端面，且容器体的上端面高于基台，在容器体的上端面设有配合凹槽，溢流槽位于容器体的侧面内部，溢流槽的上端设有凸台，培养皿能够达到密封的效果，减少培养皿在培养过程中由于外界原因引起的培养液流失或者培养液污染，提高试验的准确性。
培养皿容器体基底上端面配合区溢流槽基台培养液密封下端面凸台底座配合凹槽外界原因侧面防滑带上表面最下层上端试验污染

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