本发明提供了一种LAMP引物组包含其的用于烟草靶斑病检测的试剂盒及其应用和检测方法,涉及分子生物学技术领域。所述LAMP引物组包括上游内引物FIP、下游内引物BIP、上游外引物F3和下游外引物B3,其中上游内引物FIP、下游内引物BIP、上游外引物F3和下游外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID No.1~4所示。上述4条引物是由烟草靶斑病菌AG3融合群的ITS序列作为靶标分子而设计得到的。因此,上述4条引物对烟草靶斑病具有较高的特异性和敏感性,进而包括该LAMP引物组的用于烟草靶斑病检测的试剂盒及其检测方法,其能够实现烟草靶斑病的快速检测,具有灵敏度高、特异性好的优点。