本发明属于虾蟹类基因工程技术领域,涉及脊尾白虾雄性性别分化控制基因EcIAG及引导RNA与应用。本发明所涉及的脊尾白虾IAG(EcIAG)基因序列为列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列;基于该序列设计合成的引导RNA分别为序列列表中SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示的核糖核酸序列,将EcIAG‑gRNA1、EcIAG‑gRNA2与商品化Cas9蛋白共同混合后注射脊尾白虾的受精卵,可以特异性靶向EcIAG基因第二外显子的两个PAM识别位点,对两个PAM位点中间的DNA序列进行切割,实现EcIAG基因的敲除,在EcIAG基因敲除个体观察到脊尾白虾的性逆转。