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[发明专利]一种利用固定化密孔菌降解养殖废水中抗生素的方法-CN201910763497.5有效
发明人：廖祥儒;田乔鹏;赖邓婷;孟迪;翟李欣;管政兵;蔡宇杰 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-08-19 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： C02F3/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用固定化密孔菌降解养殖废水中抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将密孔菌Pycnoporus sp.SYBC‑L10接种于菌包中，静置条件下培养30‑40天菌丝长满培养基；S2、首先将含有四环类抗生素或磺胺类抗生素的养殖废液pH调整至3.0‑6.0，后缓慢加入菌包中，静置孵育一段时间放出液体即可。本发明提供了一种利用固定化密孔菌降解养殖废水中抗生素的方法，既廉价又高效去除养殖废水中四环类和磺胺类抗生素的方法，与传统的物理化学法相比，绿色安全，环境友好，符合可持续发展需求，在未来治理环境中的抗生素应用中具有广阔的应用前景。
一种利用固定化密孔菌降解养殖水中抗生素方法

[发明专利]一种来自短小芽孢杆菌的ω-转氨酶及在生物胺化中的应用-CN201811219769.7有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;杨邵岚;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-10-19 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12P13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种来自短小芽孢杆菌的ω‑转氨酶及在生物胺化中的应用，属于生物工程技术领域。本发明首次从Bacillus pumilus W3中分离、鉴定了ω‑转氨酶基因，并选用大肠杆菌重组表达系统生产密码子优化后的ω‑转氨酶能大幅提高其产量，使更易达到工业化应用要求。本发明发现该ω‑转氨酶以(R)‑α‑phenethylamine为底物时，最适作用pH为7.0，最适作用温度为45℃；同时，该R‑ω‑转氨酶pH稳定性及温度稳定性都非常好，对实验组(以(R)‑α‑phenethylamine为底物)的催化活性优于对照组(以(S)‑α‑phenethylamine为底物)，表明该重组ω‑转氨酶具有很好选择性合成R‑手性胺的功能，具有较大应用潜力。
一种来自短小芽孢杆菌转氨酶生物中的应用

[发明专利]一种能够催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体-CN201811449434.4有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;殷方荣;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-11-03 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种能够催化西他沙星五元环中间体的，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶212位置处的L突变成M，215位置处的I突变成M，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体L212M/I215M催化效率Kcat/Km为0.64min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为77.37％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
一种能够催化沙星五元环中转氨酶突变体

[发明专利]一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体I215F-CN201811449478.7有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;杨邵岚;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体I215F，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶215位置处的I突变成F，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体I215F催化效率Kcat/Km提高了1.92倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了3.79倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。
一种催化效率提高转氨酶突变体 i215f

[发明专利]一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体-CN201811449197.1有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;谢子豪;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，159位置处的Y突变成F，252位置处的T突变成A，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L/Y159F/T252A催化效率Kcat/Km为0.75min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为78.95％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
一种催化沙星五元环关键中间体转氨酶突变体

[发明专利]一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体-CN201811350818.0有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;杨邵岚;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-14 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶215位置处的I突变成M，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体I215M催化效率Kcat/Km提高了17.39倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了6.99倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。
一种催化效率提高转氨酶突变体

[发明专利]一种可催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体-CN201811449183.X有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;任润鲜;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种可催化西他沙星五元环中间体的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成W，159位置处的Y突变成F，215位置处的I突变成M，252位置处的T突变成A，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32W/Y159F/I215M/T252A催化效率Kcat/Km为0.49min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为77.14％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
一种催化沙星五元环中转氨酶突变体

[发明专利]一种能催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体-CN201811449438.2有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;殷方荣;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种能催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，190位置处的S突变成A，212位置处的L突变成M，215位置处的I突变成M，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L/S190A/L212M/I215M催化效率Kcat/Km为0.64min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为79.02％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。
一种催化沙星五元环关键中间体转氨酶突变体

[发明专利]一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体及其应用-CN201811450486.3有效
发明人：廖祥儒;翟李欣;赖英杰;杨邵岚;蔡宇杰;管政兵 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L催化效率Kcat/Km提高了21.84倍，催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时，突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了7.72倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。
一种催化效率提高转氨酶突变体及其应用

[发明专利]一种漆酶高效降解四环类和磺胺类抗生素的方法-CN201910763751.1在审
发明人：廖祥儒;田乔鹏;赖邓婷;孟迪;翟李欣;管政兵;蔡宇杰 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-08-19 - 公布日： 2019-12-17 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种漆酶高效降解四环类和磺胺类抗生素的方法，包括以下步骤：S1、采用密孔菌Pycnoporus sp.SYBC‑L10发酵产漆酶；S2、首先将含有四环类抗生素或磺胺类抗生素的废液pH调至3.0‑6.0，然后加入S1中得到的漆酶，同时加入小分子介体ABTS或者丁香醛，静置孵育一段时间即可。本发提供了一个可以高效降解环境中四环类和磺胺类抗生素的漆酶及方法，比已报道的类似漆酶效果明显快(降解50mg L
漆酶磺胺类抗生素高效降解四环类抗生素抗生素应用物理化学法环境友好传统的丁香醛小分子废液孵育降解介体密孔抗生素发酵应用治理安全

[发明专利]一种真菌发酵产6-羟基蜂蜜曲菌素的方法-CN201510443366.0有效
发明人：郑春英;徐慧超;谭佳音;翟李欣;李伟 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2015-07-24 - 公布日： 2018-09-11 - 主分类号： C12P17/06 文献下载
摘要：一种真菌发酵产6‑羟基蜂蜜曲菌素的方法，涉及一种产6‑羟基蜂蜜曲菌素的方法。本发明是要解决目前6‑甲氧基蜂蜜曲菌素原料紧缺的问题。方法：一、尖孢镰刀菌RE5的活化；二、在无菌条件下，用接种环挑取活化后的尖孢镰刀菌RE5的菌丝，接种于50mL马铃薯液体培养基中，培养得到种子液；三、取尖孢镰刀菌RE5种子液，以5％的接种量接种至马铃薯液体培养基中，共接种发酵20L，摇床发酵培养，真空抽滤，去除菌丝体，得RE5菌株发酵液，对RE5菌株发酵液进行色谱分离，即得到6‑羟基蜂蜜曲菌素。为工业化合成6‑甲氧基蜂蜜曲菌素提供原料，以解决6‑甲氧基蜂蜜曲菌素原料紧缺的问题。本发明用于产6‑羟基蜂蜜曲菌素。
一种真菌发酵羟基蜂蜜曲菌方法

[发明专利]一株产pseurotinA的甘草内生真菌-CN201510232930.4有效
发明人：郑春英;张萍;翟李欣;徐慧超 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2015-05-08 - 公布日： 2018-01-23 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：一株产pseurotin A的甘草内生真菌，涉及一株甘草内生真菌。本发明提供一株甘草内生真菌，其代谢物具有较好的抗菌活性，并能产生重要天然产物pseurotin A，可为新型抗菌药物的筛选提供参考。烟曲霉GRP13，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2015年4月1日，保藏编号为CCTCC NOM 2015186。本发明烟曲霉GRP13具有较好抑菌活性，能产生重要的生化试剂pseurotin A，烟曲霉GRP13可作为筛选新型抗菌物质的目的菌株进行开发利用，为研发新药及新型食品防腐剂提供参考。
一株产 pseurotin 甘草真菌

[发明专利]一种利用微生物发酵生产甘草次酸的方法-CN201410612699.7有效
发明人：郑春英;张萍;孔德崴;翟李欣 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2014-11-04 - 公布日： 2015-02-18 - 主分类号： C12P33/00 文献下载
摘要：一种利用微生物发酵生产甘草次酸的方法，涉及一种生产甘草次酸的方法。是要解决现有生产甘草次酸的方法存在生产工艺复杂、费用高、环境污染的问题。方法：一、甘草内生真菌RP4菌株的活化；二、甘草内生真菌RP4种子液的制备；三、甘草内生真菌RP4发酵液供试品的制备；四、甘草内生真菌RP4发酵液中甘草次酸的提取分离。本发明方法工艺简单，成本低，使用生物发酵来生产，不污染环境。用于生产甘草次酸。
一种利用微生物发酵生产甘草方法

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