本发明提供了一种水稻诱导抗病基因OsAAA1启动子,所述启动子受水杨酸诱导表达,该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其长度为2893bp。本发明同时还提供了所述水稻诱导抗病基因OsAAA1启动子的双元表达载体DX2181G,并提供了双元表达载体DX2181G的构建方法。本申请中成功构建了该启动子的双元表达载体DX2181G,通过农杆菌介导的遗传转化转入水稻品种日本晴,转基因植株阳性鉴定后,进行GFP观察分析来研究OsAAA1启动子的表达模式和OsAAA1基因的调控机制。
本发明公开了植物维管束发育基因sm‑Nvas的核苷酸序列、菌核病和稻瘟病抗性特征及其抗病性在作物育种的应用。该方法包括下列步骤,首先烟草突变体的获得及鉴定;其次是植物维管束发育基因sm‑Nvas的克隆;第三是植物维管束发育基因sm‑Nvas的遗传转化(受体包括水稻、拟南芥等);第四是转基因植株抗病性的鉴定(水稻稻瘟病;拟南芥及油菜菌核病);第五是该基因抗病性在作物育种的应用。本发明所涉及核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;拟南芥菌核病抗性特征如附图1所示;水稻稻瘟病抗性特征如附图3所示。
本发明提供了一种用于鉴定三系杂交水稻不育系骏1A的特异引物组合,包括ZJJU01、ZJJU02、ZJJU03和ZJJU04,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~8所示,本发明同时还提供了根据上述引物组合来鉴定三系杂交水稻不育系骏1A的方法,步骤如下:首先提取目标植物基因组,然后以基因组为模板,用权利要求1所述的特异引物组合进行PCR检测。本发明根据能鉴定三系杂交水稻不育系骏1A的ISSR引物扩增序列设计引物,通过PCR扩增,可以快速从其他水稻品种中鉴定三系杂交水稻不育系骏1A。本发明提供的三系杂交水稻不育系骏1A的鉴定方法,可用于上述水稻品种的纯度鉴定,进而在辅助其育种中进行应用。
本发明提供了一种水稻诱导抗病基因OsAAA1,所述基因受水杨酸和稻瘟病菌的双诱导,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。上述水稻诱导抗病基因OsAAA1编码的水稻抗病蛋白,该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明所提供的上述水稻诱导抗病基因OsAAA1能够应用于培育抗稻瘟病和白叶枯病的水稻品种。具体的应用方式为:根据所提供的水稻诱导抗病基因OsAAA1,构建超量表达载体;利用农杆菌介导的遗传转化将表达载体转入受体品种;在水杨酸诱导下,该品种对稻瘟病菌和白叶枯病菌均表现出抗菌性。
本发明提供了一种用于鉴定三系杂交水稻品种骏优522及其亲本的特异引物组合,包括JU01、JU02、JU03和JU04,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~8所示,本发明同时还提供了根据上述引物组合来鉴定三系杂交水稻品种骏优522及其亲本的方法,步骤如下:首先提取目标植物基因组,然后以基因组为模板,用权利要求1所述的特异引物组合进行PCR检测。本发明根据能鉴定三系杂交水稻品种骏优522及其亲本的ISSR引物扩增序列设计引物,通过PCR扩增,可以快速从其他水稻品种中鉴定三系杂交水稻品种骏优522及其亲本。本发明提供的三系杂交水稻品种骏优522及其亲本的鉴定方法,可用于上述水稻品种的纯度鉴定,进而在辅助其育种中进行应用。
本发明提供了一种烟草糖基转移酶诱导型启动子Sm-NgtP,该启动子Sm-NgtP分离于烟草糖基转移酶基因中,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。采用引物对启动子Sm-NgtP进行扩增,扩增得到5个5’端缺失的启动子片断,分别为启动子片段GTPA、GTPB、GTPC、GTPD和GTPE,利用上述五个启动子片段构建植物表达载体,得到植物表达载体pGTPA、pGTPB、pGTPC、pGTPD和pGTPE,研究上述植物表达载体的活性发现,GTPC为受甲基茉莉酸和水杨酸双重诱导的启动子,GTPD是组成型强表达启动子,GTPC启动子片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,GTPD启动子片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。