本发明提供了一种STAT3抑制多肽及其制备方法和应用,涉及抗肿瘤药物技术领域。本发明所述抑制多肽具有包括如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,能够与肿瘤细胞中高表达的STAT3相结合,通过阻止STAT3二聚体化,促进肿瘤细胞凋亡,抑制增殖和迁移;同时对正常细胞毒性较小,具有优秀的选择性。本发明采用微波促进Fmoc/tBu正交保护固相合成策略高效快速地合成上述抑制多肽,极大的提高了多肽合成的效率,缩短了合成周期;而且微波促进固相合成新型STAT3抑制多肽的粗品纯度大于80%,方便工业化生产,因此所述STAT3抑制多肽及其可药用盐可以潜在的用于抗肿瘤的临床治疗中,具有广阔的开发前景。