本发明公开了一种罗氏沼虾线粒体COI基因扩增引物,该引物序列为:上游引物序列为SEQ ID NO.1,即COIF:5'‑CAACGTAATTGTCACTGCCCACG‑3';下游引物序列为SEQ ID NO.2,即COIR:5'‑GTATCTGTGATCTGCTGGTGGGA‑3'。本发明的一种罗氏沼虾线粒体COI基因扩增引物可使获得的罗氏沼虾线粒体COI基因片段长度增加至1300 bp左右,且该引物具有条带单一、扩增效率高的特点,能够更好地满足后续罗氏沼虾线粒体基因组研究以及罗氏沼虾群体遗传多样性研究的需要。