本发明提供了检测EGFR基因多个突变位点的检测剂组合物及试剂盒。本发明首先提供了一种用于检测人EGFR基因18‑21外显子多个突变位点的检测剂组合物,其包括SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6、SEQ ID No.7、SEQ ID No.8、SEQ ID No.9、SEQ ID No.10和SEQ ID No.11。本发明还提供了相关检测试剂盒及检测方法。本发明可同时检测EGFR基因51种突变,每种突变的检出率基本一致,检测灵敏度可达0.1%,同时适用于cfDNA和组织DNA中的突变检测。