本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种重组大米抗氧化肽及其制备方法和应用。该重组大米抗氧化肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将重组大米肽的抗氧化肽的基因序列插入pPICZα‑A载体，转入毕赤酵母GS115宿主细胞中，获得高效表达重组抗氧化肽酵母菌株，并将验证成功的阳性克隆菌株采用甲醇进行诱导表达，对最终的上清产物进行鉴定，并进行活性、稳定性及应用的研究。本发明得到的重组大米抗氧化肽具有很强的抗氧化作用，能够高效清除自由基，并且受温度、pH及酶的影响较小，稳定性较好，可以延缓食物腐烂变质，在食品保鲜、医药等方面有较好的应用前景。
本发明公开了罗汉参抗氧化肽的制备及纯化鉴定方法，制备方法为罗汉参清洗后去皮打浆，先加入α‑淀粉酶和糖化酶酶解、然后加入碱性蛋白酶、风味蛋白酶酶解；得到酶解液，酶解条件是pH8.0、温度35～45℃、加酶量为总质量的1‑6％、酶解时间为5.0‑7.0h；将罗汉参酶解液沸水浴灭酶并冷却，4℃条件下10000r/min离心15min，取上清液；将上清液进行过滤，得分子量≤1000的组分，经质谱分离鉴定获得SEQ ID NO:1的抗氧化肽序列，经过真空冷冻干燥获得罗汉参抗氧化肽粉。本发明以罗汉参为原材料，提供一种利用酶解法获得罗汉参多肽，并通过化学评价法评价其抗氧化活性，最后通过经多维液相质谱法对获得的罗汉参多肽进行纯化和表征，可以获得高活性的抗氧化肽及其氨基酸序列。
