本发明提供了检测分枝杆菌基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测分枝杆菌基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分多种常见细菌、真菌、支原体、工程细胞以及与分枝杆菌进化关系较近的细菌等干扰性DNA。
本发明公开了一种检测可复制性慢病毒的探针、引物、试剂盒及其应用。所述试剂盒包括引物对和探针,所述引物对包括上游引物和下游引物,所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明建立的检测方法具有较高的灵敏度,假阳性低,可联合细胞培养法应用于CAR‑T细胞、慢病毒载体及载体生产终末细胞样品中的可复制性慢病毒检测,也可用于已有RCL安全性数据积累的CAR‑T细胞样本的快速放行检测,本发明的试剂盒可有效的作为细胞治疗产品生产环节中的质控手段。
本发明提供了检测牛基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测牛基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分猪、CHO、Vero、人、NS0、MDCK、E.coli、毕赤酵母和Sf9等干扰性DNA。
本发明涉及生物检测领域,尤其涉及用于定量检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对、检测试剂及检测方法,所述引物对至少包含4组引物对;其中:各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示区段;各组引物对扩增获得的扩增产物的长度分别为100bp以下、100‑200bp、200‑500bp以及500bp以上。本发明能够用于分析生物制品中的MDCK残留DNA片段,有利于改进工艺、提高产品质量。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷,从获得样品到给出检测报告只需4h;灵敏度高,定量限均为30 fg/rxn;专属性强,能区分E.coli、CHO细胞、NS0细胞、Vero细胞、毕赤酵母或人类等干扰性DNA。所建立的方法能够用于定量检测生物制品中MDCK残留DNA片段大小分布情况。
本发明提供了检测猪基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测猪基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分牛、CHO、Vero、人、NS0、MDCK、E.coli、毕赤酵母和Sf9等干扰性DNA。
本发明提供了检测Vero细胞基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测Vero细胞基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:15所示区段。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分CHO细胞、毕赤酵母或人类等干扰性DNA,能够检测Vero细胞DNA片段大小分布。
本发明提供了检测产黄青霉菌基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测产黄青霉菌基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分CHO细胞、Vero细胞、大肠杆菌、毕赤酵母、293T细胞、NS0细胞、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌以及铜绿假单胞菌等干扰性DNA。
本发明提供了检测大肠杆菌细胞基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测大肠杆菌细胞基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分CHO细胞、毕赤酵母或人类等干扰性DNA,还能用于对食品或保健品作溯源,从而所检测的食品或保健品是天然来源的。
本发明提供了检测小鼠细胞,例如NS0或SP2/0细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测小鼠细胞基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作不仅简便快捷、灵敏度高,还能区分真核宿主细胞,例如CHO细胞、Vero细胞,毕赤酵母菌、大鼠细胞,特别是人类的干扰性DNA以及原核宿主细胞,例如大肠杆菌的干扰性DNA。
本发明涉及生物检测领域,尤其涉及用于检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对、及检测方法,所述引物对至少包含4组引物对;其中:各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示区段;各组引物对扩增获得的扩增产物的长度分别为100bp以下、100‑200bp、200‑500bp以及500bp以上。本发明能够用于分析流感疫苗中间品、成品中的MDCK残留DNA片段,有利于改进工艺、提高产品质量,用于产品质量控制和放行。同时利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷,从获得样本到给出检测报告只需4h;灵敏度高,定量限均为30 fg/rxn;专属性强,能区分E.coli、CHO细胞、NS0细胞、Vero细胞、毕赤酵母或人类等干扰性DNA。
本发明涉及生物检测领域,尤其涉及检测玫瑰孢链霉菌残留DNA的引物对、包含该引物对的检测试剂及试剂盒,以及利用该引物对玫瑰孢链霉菌残留DNA的检测方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。本发明中的引物对能够针对玫瑰孢链霉菌残留DNA特异性结合,并且能够区分其他真核细胞,不会与其他的DNA发生干扰,同时具有极高的精密度,在较宽的浓度范围内依然能够保持线性要求,并且重复性能良好。此外,玫瑰孢链霉菌DNA参考品碎片化并不影响qPCR的检测,且该检测方法还具有操作简便快捷的优势。
本发明提供了检测毕赤酵母细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测毕赤酵母细胞基因组DNA的方法,所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作不仅简便快捷、灵敏度高,还能区分真核宿主细胞,例如Vero细胞、CHO细胞,特别是人细胞的干扰性DNA。