本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体St‑2‑2△C10及其应用。本发明提供一种7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是由氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的7α‑羟基类固醇脱氢酶的C‑端截短10个氨基酸所得。该突变体具有底物选择性,能够专一性催化CDCA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物,对于CA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物没有催化活性,可用于从复杂底物鸡胆粉中高效合成TUDCA,而不产生有毒物质即副产物TUCA,在特异性生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。