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[发明专利]与氨基甲酸乙酯特异性结合的核酸适配体及制备方法和应用-CN202210233420.9有效
发明人： 吴远根;夏恋;安明哲;周韩玲 -专利权人：宜宾五粮液股份有限公司
申请日： 2022-03-10 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明属于生物医药技术领域，具体涉及与氨基甲酸乙酯特异性结合的核酸适配体及制备方法和应用。为解决现有技术的不足，本发明提供一种与氨基甲酸乙酯特异性结合的核酸适配体及制备方法和应用。通过Capture‑SELEX技术筛选得到氨基甲酸乙酯的核酸适配体EC1，并通过预测可能的结合位点和结构特点，对序列进行截短优化，得到具有较好的结合性能的适配体EC1‑34。本发明的核酸适配体EC1和EC1‑34对于在线监测、降低白酒中氨基甲酸乙酯水平和防范致癌风险具有重要应用前景。
氨基甲酸特异性结合核酸适配体制备方法应用

[发明专利]一种基于V6-CN202110401464.3有效
发明人：黄小焕;吴远根;曾洪;周程寅;李志;刘松 -专利权人：贵阳海关综合技术中心（贵州国际旅行卫生保健中心、贵阳海关口岸门诊部）
申请日： 2021-04-14 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明的一种基于V6O13纳米带催化活性的Cd(II)和Pb(II)检测方法，所用试剂主要包括V6O13、H2O2、NaAc缓冲液和3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺(TMB)，V6O13在酸性条件NaAc缓冲液下催化底物H2O2生成一定量的羟基自由基，羟基自由基进一步氧化下一步底物TMB形成最终产物(oxTMB)，使传感溶液呈现出蓝色，并在652 nm处有一个特征峰；加入目标重金属后，V6O13与H2O2溶液之间的电子转移被重金属阻断，过氧化物模拟酶活性受到抑制，不再催化氧化底物产生显色产物，且652 nm处吸光值变化幅度与目标重金属的浓度成正比。本发明对Cd(II)和Pb(II)最低检测限分别为1.89μg⋅L‑1，2.11μg⋅L‑1，具有灵敏度高、检测特异性好、肉眼可辨和操作简便等优点。
一种基于 base sub

[发明专利]基于抑制多孔Co3-CN202110402744.6有效
发明人：黄小焕;吴远根;邹文英;周程寅;李志;刘松 -专利权人：贵阳海关综合技术中心（贵州国际旅行卫生保健中心、贵阳海关口岸门诊部）
申请日： 2021-04-14 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于抑制多孔Co3O4纳米盘催化活性的多种重金属检测方法，所用试剂包括多孔Co3O4纳米盘、H2O2和3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺(TMB)，多孔Co3O4纳米盘在H2O2作用下催化氧化TMB，氧化后的TMB呈蓝色且在652 nm处存在一个显著的特征吸收峰。当加入重金属后，重金属阻碍了催化反应过程中的电子转移，使得TMB不再被氧化，此时没有蓝色产物生成，体系在652 nm处的吸收峰降低，且652 nm处吸光值变化幅度与重金属的浓度成正比。本发明对重金属的最低检测限低至0.085μg·L‑1，具有检测灵敏度高、肉眼可辨、特异性强、操作简便等优点，不需要依赖大型仪器就可以实现重金属残留的快速检测。
基于抑制多孔 co base sub

[发明专利]白酒氨基甲酸乙酯快检试纸制备方法-CN202210100674.3在审
发明人： 吴远根;夏恋;安明哲;周韩玲 -专利权人：宜宾五粮液股份有限公司
申请日： 2022-01-27 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明涉及快速检测装置技术领域，尤其是氨基甲酸乙酯快检试纸；本发明所要解决的技术问题是提供一种能够快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的白酒氨基甲酸乙酯快检试纸制备方法。白酒氨基甲酸乙酯快检试纸制备方法，包括以下步骤：A.使用Capture‑SELEX技术筛选出氨基甲酸乙酯核酸适配体；B.制备核酸适配体‑纳米金标记物；C.制备样品垫、结合垫；D.将制备好的核酸适配体‑纳米金标记物均匀喷于结合垫，然后将结合垫置于烘箱中干燥，取出备用；E.将包被有阳离子聚合物聚二甲基二烯丙基氯化铵的检测线固定于硝酸纤维素膜上，将硝酸纤维素膜置于烘箱中干燥，取出备用；F.将前述备用的样品吸收垫、结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫依次搭接固定于底板上。
白酒氨基甲酸乙酯快检试纸制备方法

[发明专利]一种基于寡聚核苷酸调控四氧化三锰催化活性的重金属比色检测方法-CN201910770174.9有效
发明人： 吴远根;王佳佳;陶菡;王雪郦 -专利权人：贵州大学
申请日： 2019-08-20 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于寡聚核苷酸调控四氧化三锰催化活性的重金属比色检测方法，制备已知靶标重金属(汞(II)或镉(II))浓度的待测样液A1品；制备空白对照溶液A2品；取A1品和A2品分别微板分光光度计进行测定450nm处溶液的吸光度值，获得吸光度差值(ΔA)；根据吸光度差值绘制得到靶标重金属浓度与吸光度变化量标准曲线；根据标准曲线建立有关靶标重金属浓度与吸光度之间相互关系的回归方程；制备未知靶标重金属浓度的待测溶液(河水、湖水、自来水)C品；取C品用微板分光光度计测定450nm处溶液的吸光度值，计算C品与A2品的吸光度差值，将该差值代入线性回归方程中，即可获得C品中靶标重金属的浓度。该方法具有构建方便、灵敏度高、特异性好等优势。
一种基于核苷酸调控氧化催化活性重金属比色检测方法

[发明专利]一种与百草枯特异性结合的核酸适配体PQ-15及其应用-CN201910063068.7有效
发明人： 吴远根;冉旭东;杨玉霞;陶菡 -专利权人：贵州大学
申请日： 2019-01-23 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明公开了一种与百草枯特异性结合的核酸适配体PQ‑15及其应用，所述的核酸适配体是单链DNA，由68个核苷酸组成,适配体碱基序列为：5′‑ACCGACCGTGCTGGACTCTCGCGCAGCGCCGAGT CCGAACTGGGTGGGGAGTATGAGCGAGCGTTGCG‑3′(68bp)；可将本发明所述核酸适配体PQ‑15可作为百草枯的识别分子，以阳离子化合物聚集的纳米金作为传感信号，首次建立了基于核酸适配体识别的百草枯农药比色检测新方法，其最低检测限为25.2nmol/L，其它竞争性靶标对百草枯检测无明显干扰，实际样品中百草枯的加标回收率为91.13％～99.60％。此检测方法的优势在于构建方便、快速可肉眼辨别、灵敏度高所需时间短、低成本且易操作。可广泛应用于实际样品中百草枯残留的快速检测。
一种百草特异性结合核酸适配体 pq 15 及其应用

[发明专利]一种基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法-CN201910818207.2有效
发明人： 吴远根;陆婷婷;王金龙;陶菡 -专利权人：贵州大学
申请日： 2019-08-30 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法，制备已知乐果浓度的待测样液A1品；制备空白对照溶液A2品；取A1品和A2品分别用荧光光度计进行扫描测定440 nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，获得其荧光发射光谱；根据荧光发射光谱绘制得到乐果浓度与荧光强度变化量标准曲线；根据标准曲线建立有关乐果浓度与荧光强度之间相互关系的回归方程；制备未知乐果浓度的待测溶液C品；取C品用荧光光度计进行扫描测定440 nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，计算C品与A2品的荧光强度差值，将该差值代入线性回归方程中，即可获得C品中乐果的浓度。该方法具有构建方便、灵敏度高、特异性好等优势。
一种基于适配体调控荧光乐果农药检测方法

[实用新型]基于多孔Co3-CN202120516208.4有效
发明人：黄小焕;周程寅;刘松;李志;吴远根 -专利权人：贵阳海关综合技术中心（贵州国际旅行卫生保健中心、贵阳海关口岸门诊部）
申请日： 2021-03-11 - 公布日： 2021-10-29 - 主分类号： G01N31/10 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种基于多孔Co3O4催化活性检测草甘膦农药的比色酶片，其特征在于：包括由塑料板(1)、Co3O4酶片(2)、吸水垫(3)和底板(4)，塑料板(1)上开两个孔分别为阴性对照孔(5)和加样孔(6)，阴性对照孔(5)和加样孔(6)与Co3O4酶片(2)位置相对应，使用底板(4)、塑料板(1)和吸水垫(3)将Co3O4酶片(2)固定；所述Co3O4酶片(2)外部用薄膜覆盖。本实用新型具有操作简便、检测结果准确度较高、对草甘膦农药的检测具有灵敏度和特异性较高、检测时间短、肉眼可辨等优势，可大量应用于现场检测。
基于多孔 co base sub

[发明专利]多孔Co3-CN202110173590.8在审
发明人：黄小焕;周程寅;刘松;徐佳;吴远根 -专利权人：贵阳海关综合技术中心（贵州国际旅行卫生保健中心、贵阳海关口岸门诊部）
申请日： 2021-02-09 - 公布日： 2021-06-15 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种多孔Co3O4过氧化物酶应用于草甘膦快速比色检测方法，包括以下步骤：(1)将含有草甘膦的样品与1ug/mL浓度的多孔Co3O4溶液混匀，在30℃下孵育10min；(2)随后向混合溶液中加入pH为6.0、浓度为5mM的NaAc缓冲溶液和浓度为8 mM的H2O2和浓度为1.5 mM的TMB底物溶液进行显色反应，反应10min，通过测定混合溶液在650 nm处的吸光值变化来判定草甘膦的含量。本发明对草甘膦最低检测限为2.37 ug/L，具有检测特异性好、肉眼可辨、操作简便等优点，不需要依赖大型仪器就可以实现草甘膦农药残留的快速检测，可以广泛应用于农产品中有机磷农药检测。
多孔 co base sub

[实用新型]一种用于实验室液态发酵的混合发酵装置-CN201921329245.3有效
发明人：王春晓;张文毅;吴远根 -专利权人：贵州大学
申请日： 2019-08-16 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于实验室液态发酵的混合发酵装置。本实用新型解决了实验室普通液态发酵装置不能将混合接种的两种菌分离而使发酵液充分接触的问题。一种用于实验室液态发酵的混合发酵装置，包含罐体，其特征在于：所述的罐体设置罐口和侧口，两个罐体通过罐口连通，罐口设置外螺纹，连接处通过设置有与罐口外螺纹匹配的内螺纹的连接装置密封连接，罐口处设置垫层。本实用新型通过增加正反螺纹连通装置、中央带网孔的独立垫层和滤纸，可确保两个玻璃罐体内发酵液在充分接触的同时所接种菌体细胞分隔，解决普通装置不能在发酵液接触的同时保证菌体分隔的问题，为实验室研究混合接种发酵对菌体和发酵影响提供合适的科研用装置。
一种用于实验室液态发酵混合装置

[发明专利]一种用于实验室液态发酵的混合发酵装置-CN201910756709.7在审
发明人：王春晓;张文毅;吴远根 -专利权人：贵州大学
申请日： 2019-08-16 - 公布日： 2019-10-11 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于实验室液态发酵的混合发酵装置，属于酿酒工程领域。本发明解决了实验室普通液态发酵装置不能将混合接种的两种菌分离而使发酵液充分接触的问题。一种用于实验室液态发酵的混合发酵装置，包含罐体（1），其特征在于：所述的罐体（1）设置罐口（7）和侧口（6），两个罐体（1）通过罐口（7）连通，罐口（7）设置外螺纹，连接处通过设置有与罐口（7）外螺纹匹配的内螺纹的连接装置（2）密封连接，罐口（7）处设置垫层（3）。本发明通过增加正反螺纹连通装置、中央带网孔的独立垫层和滤纸，可确保两个玻璃罐体内发酵液在充分接触的同时所接种菌体细胞分隔，解决普通装置不能在发酵液接触的同时保证菌体分隔的问题，为实验室研究混合接种发酵对菌体和发酵影响提供合适的科研用装置。
罐口液态发酵混合发酵装置发酵液罐体充分接触外螺纹垫层菌体分隔工程领域接种发酵连接装置连通装置密封连接正反螺纹玻璃罐接种菌内螺纹体细胞中央带侧口滤纸网孔酿酒发酵连通匹配接种体内科研保证研究

[发明专利]一种基于碳点荧光内滤效应的卡那霉素检测方法-CN201910551029.1在审
发明人： 吴远根;王金龙;陶菡;王雪郦 -专利权人：贵州大学
申请日： 2019-06-24 - 公布日： 2019-08-27 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于碳点荧光内滤效应的卡那霉素检测方法，制备已知卡那霉素浓度的待测样液A1品；制备空白对照溶液A2品；取A1品和A2品分别用荧光光度计进行扫描测定430nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，获得其荧光发射光谱；根据荧光发射光谱绘制得到卡那霉素浓度与荧光强度变化量标准曲线；根据标准曲线建立有关卡那霉素浓度与荧光强度之间相互关系的回归方程；制备未知卡那霉素浓度的待测溶液C品；取C品用荧光光度计进行扫描测定430nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，计算C品与A2品的荧光强度差值，将该差值代入线性回归方程中，即可获得C品中卡那霉素的浓度。该方法具有构建方便、灵敏度高、特异性好等优势。
卡那霉素荧光制备荧光发射光谱荧光光度计发射峰扫描标准曲线建立空白对照溶液线性回归方程荧光强度变化标准曲线待测溶液回归方程测样液灵敏度检测构建绘制

[发明专利]一种基于氯化血红素催化反应的四环素比色检测方法-CN201610905116.9有效
发明人： 吴远根;石彬;王啸;陶菡 -专利权人：贵州大学
申请日： 2016-10-17 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于氯化血红素催化反应的四环素比色检测方法，包括将功能性ssDNA序列与含有四环素的样品混匀孵育，制备出待检测样液的步骤；还包括将待检测样液与氯化血红素混匀孵育，之后加入磷酸二氢钠缓冲溶液混匀，然后加入H₂O₂和TMB，通过测定混合溶液在450nm处吸光值变化来判断四环素的含量的步骤。本发明提供的检测方法不需要依赖大型仪器设备，检测特异性性好，且操作简单快速，借助手持型比色计就可以实现四环素残留现场检测，因而可以广泛应用于食品中四环素残留的快速检测。
一种基于氯化血红素催化反应四环素比色检测方法

[发明专利]一种肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法-CN201610638495.X有效
发明人： 吴远根;陈华云;陶菡;唐维媛;王啸 -专利权人：贵州大学
申请日： 2016-08-08 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种NaH₂PO₄缓冲液中，随机ssDNA序列与氯化血红素(Hemin)、靶标三者相互作用催化比色特异性检测水胺硫磷的方法，该方法所用试剂主要包括随机ssDNA序列、Hemin、H₂O₂和3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺(TMB)。当随机ssDNA序列先与Hemin孵育一定时间后，其可以覆盖在Hemin表面，暂时抑制后者催化氧化TMB的活性，使底物分子中N原子失去一个电子，导致体系颜色发生显著变化，由原先的无色变成浅蓝色或蓝色，此时产物的特征吸收峰为370 nm和650 nm。如果在上述体系中加入水胺硫磷共同作用一定时间后，则hemin的催化活性大大增强，使得底物TMB失去两个电子，变成二亚胺结构，此时体系由蓝色变成黄色，在450 nm处出现特征吸收峰，且450 nm处吸光值变化幅度与水胺硫磷的浓度成正比。
水胺硫磷特征吸收峰四甲基联苯胺氯化血红素特异性检测比色检测变化幅度催化活性催化氧化底物分子显著变化成正比二亚胺缓冲液浅蓝色无色靶标比色底物孵育吸光催化覆盖

[发明专利]一种基于碳点荧光内滤效应的啶虫脒农药检测方法-CN201811360617.9在审
发明人： 吴远根;王金龙;杨文平;陶菡;冯才伟 -专利权人：贵州大学
申请日： 2018-11-15 - 公布日： 2019-03-26 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于碳点荧光内滤效应的啶虫脒农药检测方法，A1:制备已知啶虫脒浓度的待测样液得A1品；A2：制备空白对照溶液得A2品；A3：取A1品和A2品分别用荧光光度计进行扫描测定437nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，获得其荧光发射光谱；A4：根据荧光发射光谱绘制得到啶虫脒浓度与荧光强度变化量标准曲线；B、根据标准曲线建立有关啶虫脒浓度与荧光强度之间相互关系的回归方程；C:制备未知啶虫脒浓度的待测溶液得C品；D:取C品用荧光光度计进行扫描测定437nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，计算C品与A2品的荧光强度差值，将该荧光强度差值代入线性回归方程中，即可获得C品中啶虫脒的浓度。该方法具有构建方便、灵敏度高、特异性好等优势。
啶虫脒荧光制备荧光发射光谱荧光光度计农药检测发射峰扫描标准曲线建立空白对照溶液线性回归方程荧光强度变化标准曲线待测溶液回归方程测样液灵敏度构建绘制

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