本发明公开了一种机器学习基因挖掘方法及氨基转位用草铵膦脱氢酶突变体。所述氨基转位用草铵膦脱氢酶突变体由氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的野生型草铵膦脱氢酶突变所得,所述氨基转位用草铵膦脱氢酶突变体的突变位点选自以下一种:(1)E263D‑K134R‑H96A‑R290V;(2)E263D‑K134R‑H96A;(3)E263D‑K134R;(4)E263D;(5)E263N;(6)E263C;(7)E263G。本发明利用定点饱和突变技术对SEQ ID No.1所示的草铵膦脱氢酶基因进行突变,发现第263位、第134位、第290位、第290位是影响酶活和立体选择性的关键位点,获得酶活和ee值远高于母本草铵膦脱氢酶的突变体。
本发明公开了一种脂肪酸光脱羧酶突变体及其在L‑草铵膦合成中的应用,该脂肪酸光脱羧酶突变体为将SEQ ID No.2所示氨基酸第402位甘氨酸突变为苯丙氨酸;或者,第402位突变的同时第370位苏氨酸突变为精氨酸;或者,第402位突变、第370位突变的同时第513位丝氨酸突变为甘氨酸等。本发明利用定点饱和突变技术脂肪酸光脱羧酶基因进行突变,发现第370位、第371位、第402位、第513位、第514位是影响酶活和立体选择性的关键位点,获得酶活和ee值远高于母本脂肪酸光脱羧酶的突变体,最高的转化率为50%,产物ee值为96%。