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[发明专利]一种rhTNK-tPA的分离纯化方法-CN202310385210.6在审
发明人： 卢俊裕;李桂花;王森 -专利权人：石药集团明复乐药业（广州）有限公司
申请日： 2023-04-11 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种rhTNK‑tPA的分离纯化方法，该方法包括：将rhTNK‑tPA细胞收获液依次进行Blue Sepharose 6Fast Flow亲和层析、Lysine HyperD亲和层析和Capto S ImpAct离子交换层析。该方法通过三步层析就能分离rhTNK‑tPA且能达到较高的分离纯度，同时大幅度降低原液中宿主细胞蛋白残余量。另外，通过改变洗脱成分来提高纳滤膜的载量，减少纳滤膜使用面积，从而大幅减少纳滤成本。
一种 rhtnk tpa 分离纯化方法

[发明专利]一种检测I、II型rhTNK-tPA含量的方法-CN202210170512.7在审
发明人：蒋凡;王森;李桂花;卢俊裕 -专利权人：广州铭康生物工程有限公司
申请日： 2022-02-24 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： G01N30/89 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测I、II型rhTNK‑tPA含量的方法，涉及分析化学技术领域。该方法包括(1)将I、II型rhTNK‑tPA标准品按不同百分比含量配制混合溶液，进行样品前处理，然后采用反相高效液相色谱法进行分析检测，建立标准曲线；(2)将待测rhTNK‑tPA样品溶液进行与步骤(1)相同的前处理，采用与步骤(1)相同的色谱法进行分析检测，得出I、II型rhTNK‑tPA的含量。通过本发明的方法，可使rhTNK‑tPA的I/II型峰的基线完全分离，分离度可达到2.8以上；本发明的方法准确度可达到86.52％～116.90％，重复性和精密度的相对标准偏差(RSD)＜2％。
一种检测 ii rhtnk tpa 含量方法

[发明专利]一种大规模快速分离纯化rhTNK-tPA I/II型的方法-CN202110681384.8有效
发明人：李桂花;卢俊裕;王森 -专利权人：广州铭康生物工程有限公司
申请日： 2021-06-18 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N9/48 文献下载
摘要：本发明属于蛋白分离纯化技术领域，具体涉及一种大规模快速分离纯化rhTNK‑tPA I/II型的方法。本发明提供了一种适合分离rhTNK‑tPA I/II型的层析方法，使得分离同等量的rhTNK‑tPA I/II型的层析时间较公开技术减少50％以上，实现了短时间内高效处理和大规模制备rhTNK‑tPA I/II型的目标。分离后的rhTNK‑tPA I型冻干成品经SDS‑PAGE检测I型比例95％，比活为3.3×105IU/mg；rhTNK‑tPA II型冻干成品经SDS‑PAGE检测II型比例为100％，比活为6.5×105IU/mg。
一种大规模快速分离纯化 rhtnk tpa ii 方法

[发明专利]具有组成型启动子活性的DNA及其应用和巴斯德毕赤酵母表达载体-CN201210390049.3有效
发明人：林影;叶燕锐;邹承娟;张轩薇;卢俊裕;韩双艳;郑穗平 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2012-10-15 - 公布日： 2018-04-27 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有组成型启动子活性的DNA及其应用和巴斯德毕赤酵母表达载体，所述DNA的碱基序列如SEQ No.1所示，该DNA在构建巴斯德毕赤酵母（Pichia Pastoris）表达载体中的应用。本发明所述的DNA具有组成型启动子活性，不需要诱导物即可起始其下游结构基因的转录；在乙醇、甲醇、葡糖糖和甘油四种不同培养基中转录活性变化不大；具有高效转录活性，其起始转录的效率是毕赤酵母GAPDH启动子的4倍以上。本发明构建的巴斯德毕赤酵母表达载体不需要甲醇诱导即可高效表达外源蛋白，其表达外源蛋白EGFP的效率约为GAPDH启动子表达体系的6~8倍、TEF1启动子表达体系的1.5~2倍。
具有组成启动子活性 dna 及其应用巴斯德毕赤酵母表达载体