本发明公开了一种编码重组尿酸氧化酶蛋白，该编码重组尿酸氧化酶蛋白的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明将编码尿酸氧化酶蛋白的核酸序列连接phoA启动子以及周质分泌信号肽StII序列，并转入大肠杆菌中，构建得到高效、稳定分泌表达的UOX大肠杆菌工程菌，然后用低磷酸盐培养基进行培养，发酵结束后，离心去除发酵液上清，获得菌体，用TSE溶液抽提得到所述重组尿酸氧化酶蛋白。纯化后，经检测尿酸氧化酶蛋白具有较好的生物学活性。
本发明公开了一种重组人卵细胞透明带ZP3蛋白及其制备方法。编码该重组人卵细胞透明带ZP3蛋白的核酸序列如SEQ ID NO1所示。所述编码ZP3蛋白的核酸序列，是经过大量筛选得到，该核酸序列经过密码子偏好改造，并消除了不利于表达的二级结构。所获ZP3序列，除了保证一级结构和天然一样，更能保证空间结构和天然的更接近。本发明将编码ZP3蛋白的核酸序列连接phoA启动子以及周质分泌信号肽StII序列，并转入大肠杆菌YK537中，构建得到高效、稳定分泌表达的ZP3大肠杆菌工程菌。经高密度发酵培养，磷浓度的高低调节诱导，ZP3以可溶形式存在于细胞周质。ZP3表达水平高，占菌体总蛋白20％左右。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2E1药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达的重组载体。食蟹猴P450 2E1药物代谢酶能催化氯唑沙宗的6’－羟基化，其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2E1药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2E1药物代谢酶序列的开放阅读框和食蟹猴的P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴的P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2E1亚型，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2C18药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体。食蟹猴的P450 2C18药物代谢酶能催化吡罗昔康的羟基化，其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2C18药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2C18药物代谢酶序列的开放阅读框和食蟹猴的P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴的P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2C18亚型，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2B6药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体。食蟹猴P450 2B6药物代谢酶能催化盐酸丁氨苯丙酮的羟基化与3－甲基苯乙妥因的N端脱甲基，其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2B6药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2B6药物代谢酶序列的开放阅读框和食蟹猴的P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴的P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2B6亚型，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
