本发明公开了一种孝顺竹来源的蛋白连接酶原或酶及其应用。所述蛋白连接酶酶原氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其突变体与SEQ ID NO:1相比具有G217V差异。本发明还公开了蛋白连接酶原激活后相应的蛋白连接酶或其突变体,编码酶原或酶的多核苷酸、包含其的重组表达载体和转化体,以及包含它们的试剂盒。本发明还公开了蛋白连接酶或蛋白连接酶突变体的制备方法、AEP型蛋白连接酶的辅助激活的方法以及利用蛋白连接酶连接或环化多肽或蛋白的方法。本发明从孝顺竹中鉴定出一个新的AEP型蛋白连接酶,其突变体具有相当高的蛋白连接酶活力,且水解酶活力显著降低,能有效催化蛋白质分子间连接和多肽分子内环化,有望作为一个新的工具酶。
本发明公开了一种长链非编码RNA APCDD1L‑DT在制备检测胰腺癌的产品中的应用,所述APCDD1L‑DT的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了试剂盒在制备检测胰腺癌的产品中的应用、胰腺癌诊断和/或预后评估的系统、可读介质、胰腺癌诊断和/或预后评估的装置以及所述系统、可读介质和装置在胰腺癌诊断和/或预后评估中的应用。本发明提供的产品及应用,具有操作简单、灵敏性高、特异性强和周期短等特点,有利于胰腺癌的早期诊断和治疗,具有广阔的应用前景。
本发明公开了一种耐热型逆转录酶突变体及其制备方法及应用,涉及基因工程和酶工程技术领域。所述的逆转录酶突变体的氨基酸序列与氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列相比,在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的第8位、第204位、第249位、第289位、第306位、第309位、第524位、第562位、第571位、第583位、第664位中的一种或多种位点进行突变,本发明的逆转录酶突变体的纯度可达到98%以上,实现了50℃、55℃逆转录温度的耐受同时还保留50%以上的逆转录酶活性,实现了一步法RT‑PCR,拓展了逆转录酶的应用效率和前景。