本发明第一方面提供一种提升烟草植株抗青枯病的方法，其包括以下步骤：利用CRISPR/CAS9基因编辑系统定点敲除烟草中NtCCoAOMT6、NtCCoAOMT6L和Nt4CL基因，得到基因发生编辑的抗青枯病烟草植株，所述的NtCCoAOMT6、NtCCoAOMT6L和Nt4CL基因的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明第二方面提供一种第一方面所述方法用来提升烟草农艺性状的用途，所述基因发生编辑的抗青枯病烟草植株的株高、有效叶片、叶宽、叶长均高于基因未发生编辑的烟草植株。本发明获得的烟草种质具有较好的抗烟草青枯病的抗性。本发明的烟草的株高、有效叶片、叶宽、叶长等农业性状相对于对照有一定的提升。
本发明提供了一种提升烟草植株中S木质素与G木质素比值的方法，其包括以下步骤：利用CRISPR/CAS9基因编辑系统定点敲除烟草中NtCCoAOMT6和NtCCoAOMT6L基因，所述的NtCCoAOMT6和NtCCoAOMT6L基因的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明获得的烟草具有较高的高S木质素/G木质素比值，同时对烟草中木质素总含量影响较小。本发明获得的烟草烤后烟叶总糖和还原糖含量降低10％以上。
本发明第一方面提供了一种提升烟草植株抗赤星病的方法，其包括以下步骤：利用CRISPR/CAS9基因编辑系统定点敲除烟草中NtCCoAOMT6、NtCCoAOMT6L和NtCAD14基因，所述的NtCCoAOMT6、NtCCoAOMT6L和NtCAD14基因的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明第二方面提供了一种第一方面所述的抗赤星病烟草植株的烤后烟叶用于卷烟燃烧的用途。本发明获得的烟草种质具有较好的抗烟草赤星病的抗性。本发明的烟草烟叶制备的卷烟燃烧性能较好，CO含量较低明显，烟草有害性降低。
本发明公开了一种酿香型酵母、筛选方法及在烟叶醇化中的应用。所述酿香型酵母的筛选方法包括以下步骤：(1)从酒曲中分离酵母菌并制成培养液；(2)将培养液涂布于平板培养，挑取单菌落分离纯化；(3)单菌落接种于液体培养基振荡培养；(4)筛选香味品质好的酿香酵母；(5)将初筛酿香酵母制成发酵液均匀喷洒在烟丝表面发酵醇化；(6)筛选最佳的酿香型酵母。本发明的酿香型酵母的菌株为Saccharomyces cerevisiae JNC001.01，保藏号为CCTCC M 20221915。经酿香酵母发酵醇化烟叶制成的卷烟能够显著提高抽吸品质。
