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[发明专利]内皮细胞及其前体细胞在治疗脱髓鞘疾病中的应用-CN202111184190.3在审
发明人： 顾雨春;张会远 -专利权人：呈诺再生医学科技（北京）有限公司
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了内皮细胞及其前体细胞在治疗脱髓鞘疾病中的应用。本发明的研究发现，内皮细胞及其前体细胞可以促进OPC细胞增殖、迁移和成熟、促进星形胶质细胞反应、促进微胶质细胞/巨噬细胞激活从而促进髓鞘形成、再生和修复。本发明的研究成果为临床提供了一种主动调控髓鞘形成与再生的方法。
内皮细胞及其体细胞治疗脱髓鞘疾病中的应用

[发明专利]诱导性多能干细胞分化来源的EPC在制备脑卒中治疗剂中的应用-CN202111184174.4在审
发明人： 顾雨春;张会远 -专利权人：呈诺再生医学科技（北京）有限公司
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2021-11-12 - 主分类号： A61K35/44 文献下载
摘要：本发明公开了诱导性多能干细胞分化来源的EPC在制备脑卒中治疗剂中的应用。本发明通过将内皮祖细胞静脉注射到脑卒中动物模型中发现这一方式可通过抑制动脉粥样硬化、降低脑梗死水平、促进病灶脑组织血管新生、改善病灶脑组织炎症反应、修复神经损伤以及脑损伤从而达到治疗脑卒中的目的。本发明的上述研究成果为临床上治疗脑卒中提供了一种新的治疗方式。
诱导性多能干细胞分化来源 epc 制备脑卒中治疗中的应用

[发明专利]WTN多肽及其在检测前列腺癌中的用途-CN202110797547.9在审
发明人：尹乐;顾雨春 -专利权人：呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司
申请日： 2021-07-14 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明提供了WTN多肽及其在检测前列腺癌中的用途，同时提供了包括WTN多肽的多肽复合物、其编码DNA分子、其所在的载体、宿主细胞和药物组合物、检测PSMA的试剂盒，所述试剂盒包括前述WTN多肽的缀合物。
wtn 多肽及其检测前列腺癌中的用途

[发明专利]以外泌体为载体的miRNA给药系统及其应用-CN202110801214.9在审
发明人：吴理达;顾雨春 -专利权人：呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司
申请日： 2021-07-15 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种以外泌体为载体的miRNA给药系统及其应用。本发明的研究证明分选基序G‑X‑Y‑G，其中X为G、A、U，Y为A、U，可以调控miRNA进入外泌体。本发明还公开了一种方法，所述方法将特定作用的miRNA作为治疗剂，加载进外泌体。使用装载有特定miRNA的外泌体作为药物，可以治疗特定疾病。
以外载体 mirna 系统及其应用

[发明专利]以iPSC来源的细胞为载体、基因治疗湿性年龄相关性黄斑变性-CN202110894938.2在审
发明人：吴理达;顾雨春 -专利权人：呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司
申请日： 2021-08-05 - 公布日： 2021-10-19 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了以iPSC来源的细胞为载体、基因治疗湿性年龄相关性黄斑变性，本发明利用CRISPR技术将iPSC进行定点双基因基因编辑，同时表达神经营养因子CNTF和miR‑126，再将基因编辑后的iPSC诱导分化为RPE细胞，所述经诱导分化得到的RPE细胞能够修复已经损伤的CNV上的RPE细胞、抑制脉络膜新生血管的产生，此外，所述RPE细胞还能表达神经营养因子CNTF和miR‑126，从根本上治疗湿性年龄相关性黄斑变性，具有非常好的临床应用前景。
ipsc 来源细胞载体基因治疗年龄相关性黄斑变性

[发明专利]间充质干细胞的快速诱导分化方法、试剂盒及其应用-CN202110922736.4在审
发明人：吴理达;顾雨春 -专利权人：呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司
申请日： 2021-08-12 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了间充质干细胞的快速诱导分化方法、试剂盒及其应用，本发明提供的间充质干细胞的快速诱导分化方法不仅可以在短时间内以高产率制备可满足临床需求的足够数量的间充质干细胞，而且由于没有胚状体形成的步骤，因此制备工艺简单，具有分化效率高、便于纯化分离等优点，此外，在分化过程中不涉及动物血清和其它非人源添加物，更适合临床的需求，分化得到的间充质干细胞增殖能力强，细胞活力旺盛。
间充质干细胞快速诱导分化方法试剂盒及其应用

[发明专利]一种重组载体CAR-CD244-antiPSMA的制备方法-CN201810984124.6有效
发明人： 顾雨春;尹乐 -专利权人：国健呈诺生物科技（北京）有限公司
申请日： 2017-03-31 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组载体CAR‑CD244‑antiPSMA的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将特异性抗体编码基因使用末端带有BfuAI限制性内切酶识别位点的引物进行PCR扩增；所述特异性抗体编码基因序列为PSMA抗体的部分序列，为序列表序列3；步骤2、将步骤1的PCR产物分别进行纯化；步骤3、将步骤2纯化的PCR产物在BfuAI限制性内切酶识别位点进行单酶切，并同时将含有改造的CD244骨架的克隆载体在BfuAI限制性内切酶识别位点进行单酶切；步骤4、将酶切后产物进行纯化；步骤5、将纯化后的产物按抗体片段与含有改造的CD244骨架的克隆载体摩尔比为3:1配比后，使用T4连接酶进行连接、转化、涂板、挑取单克隆提取质粒测序；将连接正确的质粒，命名为：重组载体CAR‑CD244‑antiPSMA。
一种重组载体 car cd244 antipsma 制备方法

[发明专利]一种重组载体CAR-CD244-antiCD19的制备方法-CN201810984136.9有效
发明人： 顾雨春;尹乐 -专利权人：国健呈诺生物科技（北京）有限公司
申请日： 2017-03-31 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组载体CAR‑CD244‑antiCD19的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将特异性抗体编码基因使用末端带有BfuAI限制性内切酶识别位点的引物进行PCR扩增；所述特异性抗体编码基因序列为CD19抗体的部分序列，为序列表序列2；步骤2、将步骤1的PCR产物分别进行纯化；步骤3、将步骤2纯化的PCR产物在BfuAI限制性内切酶识别位点进行单酶切，并同时将含有改造的CD244骨架的克隆载体在BfuAI限制性内切酶识别位点进行单酶切；步骤4、将酶切后产物进行纯化；步骤5、将纯化后的产物按抗体片段与含有改造的CD244骨架的克隆载体摩尔比为3:1配比后，使用T4连接酶进行连接、转化、涂板、挑取单克隆提取质粒测序；将连接正确的质粒，命名为：重组载体CAR‑CD244‑antiCD19。
一种重组载体 car cd244 anticd19 制备方法

[发明专利]一种提高多能干细胞定向诱导心肌细胞产量及纯度的方法-CN202110612164.X在审
发明人：吴理达;顾雨春;刘润琪;朱杰瑞 -专利权人：呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司
申请日： 2021-06-02 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高多能干细胞定向诱导心肌细胞产量及纯度的方法，其特征包含以下步骤中的一个或多个：EB形成培养；心脏祖细胞诱导分化培养；心肌细胞诱导分化培养；心肌细胞成熟培养和心肌纯化培养。另一方面本发明还提供了提高多能干细胞定向诱导心肌细胞产量及纯度的培养基、培养基组合、细胞培养系统及试剂盒。
一种提高多能干细胞定向诱导心肌细胞产量纯度方法

[发明专利]药物组合制剂在制备治疗2019-nCoV感染重症患者药物中的应用-CN202110396734.6在审
发明人： 顾雨春;刘晓庆;毛淦明 -专利权人：北京呈诺医学科技有限公司
申请日： 2021-04-13 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： A61K35/28 文献下载
摘要：本发明公开了药物组合制剂在制备治疗2019‑nCoV感染重症患者药物中的应用，属于药物技术领域。本发明首次发现ACE‑h i s MSC和CAR‑NK ant i Hi s联用，可以用于制备治疗2019‑nCoV感染重症患者的药物，既开拓了ACE‑h i s MSC和CAR‑NK ant i Hi s新的应用领域，也开拓了新的治疗2019‑nCoV感染重症患者的药物，具有积极的药学价值和广泛的社会意义。
药物组合制剂制备治疗 2019 ncov 感染重症患者中的应用

[实用新型]一种细胞外泌体提纯装置-CN202022254333.0有效
发明人： 顾雨春 -专利权人：北京诺德观呈医疗科技有限公司;北京呈诺医学科技有限公司
申请日： 2020-10-12 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种细胞外泌体提纯装置，包括第一中空纤维柱和第二中空纤维柱，第一中空纤维柱内腔两端分别与原液瓶连通形成精滤回路，第二中空纤维柱内腔两端分别与中转瓶连通形成浓缩回路；第一中空纤维柱的外腔通过滤液管路与所述中转瓶连接，滤液管路上连接有第一手动夹；精滤回路上在所述原液瓶的出液口处依次连接有第一过滤膜和第一蠕动泵，浓缩回路上在所述中转瓶的出液口处连接有第二蠕动泵。本实用新型的提纯装置，将外泌体细胞原液先经过第一中空纤维柱进行过滤，然后再通过第二中空纤维柱进行浓缩，适用于大规模大量的上清液持续自动上样浓缩，大大节省了人工操作时间，可大规模制备含有外泌体的上清液，实现外泌体制备的标准化。
一种细胞外泌体提纯装置

[发明专利]一种提升NK细胞转染效率的方法-CN201810830835.8有效
发明人： 顾雨春;尹乐;谭声江 -专利权人：国健呈诺生物科技（北京）有限公司
申请日： 2018-07-26 - 公布日： 2021-07-02 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及NK细胞体外扩增技术领域，具体而言，涉及一种提升NK细胞转染效率的方法。该种提升NK细胞转染效率的方法，NK细胞进行慢病毒感染时，第一次感染加入包含CAR的慢病毒载体的同时加入助感染剂1，第二次感染加入包含CAR的慢病毒载体的同时加入助感染剂2、助感染剂3和助感染剂4；所述助感染剂1为含有聚凝胺溶液；所述助感染剂2为含有IL2的溶液；所述助感染剂3为含有IL12的溶液；所述助感染剂4为含有PHA的溶液。本发明提供的Car‑NK转染的方法，通过在转染的过程中加入不同的助感染剂，提高了NK细胞的转染效率，可将NK细胞的慢病毒转染效率由不足10％提高到50％～60％。
一种提升 nk 细胞转染效率方法

[发明专利]一种细胞培养实验室综合管理系统及方法-CN201710613523.7有效
发明人： 顾雨春;刘晓庆 -专利权人：北京呈诺医学科技有限公司
申请日： 2017-07-25 - 公布日： 2020-12-04 - 主分类号： G06Q10/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞培养实验室综合管理系统及方法。该方法通过合理的功能设计、系统模块设计，有效地实现对细胞培养实验全流程综合管理，实现整个流程前、中、后端的电子化，提高工作效率，并采用面向接口设计的系统架构，有效地兼容各种操作终端的接入，适应现代实验室多种移动场景的使用需求，实现多终端协同管理。针对细胞培养过程管理，进行实时监控记录，培养数据实时上传，保证整个培养过程符合生产要求，针对细胞培养质控管理，通过设备使用、耗材使用、检测记录等数据和记录的实时录入，保证可追溯性，确保生产细胞质量。
一种细胞培养实验室综合管理系统方法

[发明专利]一种使用ESRG基因作为通用标记基因的iPSC残留检测方法-CN202010813518.2在审
发明人：吴理达;顾雨春;冯铁军 -专利权人：北京呈诺医学科技有限公司
申请日： 2020-08-13 - 公布日： 2020-11-27 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明的使用ESRG基因作为通用标记基因的iPSC残留检测方法，通过qPCR检测方法定量检测样品中的ESRG基因数量，从而检测样品中的iPSC残留。该方法采用ESRG基因片段作为通用标记基因，可以针对包括内皮祖细胞、神经干细胞、视网膜色素上皮细胞、肝细胞、自然杀伤细胞、心肌细胞以及胰岛小体等一系列细胞进行检测，不需要更换标记基因；同时能够在短时间内进行检测，大大提高了检测效率。本发明的方法在检测时，仅需要mRNA提取、反转录以及qPCR试剂，成本低，准确性高。
一种使用 esrg 基因作为通用标记 ipsc 残留检测方法

[发明专利]一种贴壁细胞传代培养系统及传代培养方法-CN202010636360.6在审
发明人：毛淦明;刘晓庆;顾雨春 -专利权人：国健呈诺生物科技（北京）有限公司
申请日： 2020-07-03 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12M3/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种贴壁细胞传代培养系统及传代培养方法，其包括：形成密闭空间的箱体、桥接设备、电动加液设备、电动去液设备、离心设备、电动摇匀设备、封闭通道以及培养箱，桥接设备、电动加液设备、电动去液设备、离心设备以及电动摇匀设备均设置在箱体中，桥接设备设置在电动加液设备、电动去液设备、离心设备、电动摇匀设备以及培养箱之间；电动加液设备、电动去液设备以及离心设备顺序排布设置；培养箱设置在箱体外，桥接设备的一端通过封闭通道与培养箱连通；用于控制所述桥接设备、电动加液设备、电动去液设备、离心设备、电动摇匀设备以及培养箱联动的控制器。
一种细胞传代培养系统方法