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[发明专利]用于生产β-丙氨酸的工程菌及生产β-丙氨酸的方法-CN201510067784.4有效
发明人：蔡真;张君丽;李寅;张冬竹;郭恒华 -专利权人：中国科学院微生物研究所;安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2015-02-09 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本申请公开了用于生产β‑丙氨酸的工程菌及生产β‑丙氨酸的方法。本发明的工程菌是在大肠杆菌基因组上的一个或多个位点整合有DNA序列的重组菌，其中所述DNA序列包含选自如下一种基因：编码枯草芽孢杆菌L‑天冬氨酸α羧化酶的基因和编码与该酶具有至少60％、优选80％、更优选90％、进一步优选95％和最优选98％、甚至99％同源性且具有所述酶活性的多肽的基因。该菌株可在不添加抗生素的情况下大量表达高活性L‑天冬氨酸α羧化酶。使用上述菌株可将底物L‑天冬氨酸高效转化为β丙氨酸。解决了菌株培养过程中质粒易丢失的问题，并节省了培养菌体过程中抗生素的使用以及含抗生素废水的后续处理，降低了工业生产的成本。
用于生产丙氨酸工程方法

[发明专利]一种球形固定化含D-泛解酸内酯水解酶细胞及其制备方法和水解D-泛解酸内酯的方法-CN201910203561.4在审
发明人：孟小川;刘树蓬;郭恒华;张冬竹;章晖;田宋魁 -专利权人：合肥华恒生物工程有限公司
申请日： 2019-03-18 - 公布日： 2019-07-12 - 主分类号： C12N11/10 文献下载
摘要：本发明属于生物催化技术领域，具体涉及一种球形固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞及其制备方法和水解D‑泛解酸内酯的方法。所述球形固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞的制备方法，包含如下步骤：以海藻酸钠、明胶和聚乙烯醇为原料制备固定化载体，以含CaCl2的硼酸溶液为固化剂，固定化产D‑泛解酸内酯水解酶大肠杆菌得到固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞。本发明的球形固定化含D‑泛解酸内酯水解酶细胞对D‑泛解酸内酯的选择性高，重复使用性好。
泛解酸内酯固定化水解酶细胞制备水解生物催化技术大肠杆菌固定化载体重复使用性明胶海藻酸钠聚乙烯醇硼酸溶液原料制备固化剂

[发明专利]一种利用超氧化物歧化酶提高对苯二酚转化率的方法-CN201910204160.0在审
发明人：刘魏宇;刘树蓬;郭恒华;张冬竹;章晖;田宋魁 -专利权人：合肥华恒生物工程有限公司
申请日： 2019-03-18 - 公布日： 2019-07-09 - 主分类号： C12P19/44 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用超氧化物歧化酶提高对苯二酚转化率的方法。所述利用超氧化物歧化酶提高对苯二酚转化率的方法，包括如下步骤：将超氧化物歧化酶、蔗糖磷酸化酶粗酶和对苯二酚在蔗糖溶液中进行接触反应。本发明采用超氧化物歧化酶作为还原剂，其抗氧化效果更好，能更好的提升对苯二酚的利用率，并且在后端提取时直接经膜系统可以被分离，不会影响α‑熊果苷的质量。
超氧化物歧化酶对苯二酚生物技术领域蔗糖磷酸化酶接触反应蔗糖溶液还原剂抗氧化膜系统熊果苷粗酶

[发明专利]一种L-丙氨酸的生物发酵方法-CN201811068291.2在审
发明人：张学礼;郭恒华;徐洪涛;张冬竹;唐思青;刘洋 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司;中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2018-09-13 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： C12P13/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种L‑丙氨酸的生物发酵方法。本发明保护一种生产L‑丙氨酸的方法，包括如下步骤：采用种子培养基培养L‑丙氨酸菌株，所述种子培养基中采用酵母浸粉和硫酸铵作为氮源。本发明通过优化种子培养阶段的发酵工艺，提高种子的活力，进而有效提高了L‑丙氨酸的生产强度，而且不会额外增加原料成本。通过优化种子培养阶段的发酵工艺，包括优化培养基和发酵模式，提高了L‑丙氨酸的生产强度，降低了生物制备L‑丙氨酸的生产成本，有利于L‑丙氨酸的生物法工业生产。
丙氨酸发酵工艺生物发酵种子培养种子培养基培养硫酸铵优化培养基种子培养基发酵模式酵母浸粉生物制备原料成本生物法氮源菌株生产成本生产优化

[发明专利]一种富含丙氨酸的鱼露及其制备方法-CN201510903922.8有效
发明人：纪静;郭恒华;张冬竹;章晖 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2015-12-09 - 公布日： 2018-10-02 - 主分类号： A23L27/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种富含丙氨酸的鱼露及其制备方法，属于食品加工技术领域。以鱼虾加工后的下脚料为原料，经加曲发酵获得鱼露原液，再用调配液进行调配，获得鱼露成品。本发明以调配液替代传统工艺中的HVP，避免了HVP中含有的3‑MCPD带来的致癌等食品安全问题，同时可增加鱼露的风味，满足消费者对食品安全和美味需求。
一种富含丙氨酸及其制备方法

[发明专利]酶法生产α-熊果苷废液的处理方法及其应用-CN201711472244.X在审
发明人： 郭恒华;张冬竹;田宋魁;刘树蓬;章晖 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2017-12-29 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： C12P13/14 文献下载
摘要：本发明涉及化学技术领域，具体涉及一种酶法生产α‑熊果苷废液的处理方法及其应用；包括如下步骤：(1)使用酸性调节剂调节α‑熊果苷生产废液的PH至4～5，加入糖化酶进行水解反应；(2)使用酸性调节剂调节废液PH至3～4，絮凝、过滤，之后使用碱性调节剂调节废液PH至中性，得到转化液，最后将转化液配制成发酵培养基即可；本发明提供的处理方法简单、处理成本低、资源利用率高。
废液熊果苷酸性调节剂酶法生产转化液化学技术领域发酵培养基碱性调节剂资源利用率生产废液水解反应糖化酶絮凝应用过滤

[发明专利]基于神经网络结合遗传算法实时优化补料产丙氨酸的方法-CN201710067111.8在审
发明人： 郭恒华;刘洋;张冬竹;唐思青 -专利权人：秦皇岛华恒生物工程有限公司
申请日： 2017-02-07 - 公布日： 2017-06-06 - 主分类号： G06F19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于神经网络结合遗传算法实时优化补料产丙氨酸的方法，包括以下步骤S1以葡萄糖为原料，采用XZ‑A26菌株厌氧流加发酵产L‑丙氨酸，建立历史数据集，构建并训练BP神经网络模型，构建遗传算法模型并优化计算；S2发酵过程取样并测定各时刻的各发酵参数和L‑丙氨酸浓度，发酵进行至吸光度达到预定值时，获得T+1时刻L‑丙氨酸浓度最大时T时刻葡萄糖流加量的最优值，并完成补料。本发明能够根据发酵输入与输出构建神经网络模型，对葡萄糖流加量进行二进制编码，执行选择、交叉、变异，获得能够产生最优值的补料参数，通过应用此补料参数到发酵过程控制中以提高L‑丙氨酸的转化速率。
基于神经网络结合遗传算法实时优化补料产丙氨酸方法

[发明专利]一种高产L‑丙氨酸且耐受自来水的菌株及其构建方法-CN201410140630.9有效
发明人：张学礼;郭恒华;张冬竹 -专利权人：秦皇岛华恒生物工程有限公司;安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2014-04-09 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产L‑丙氨酸且耐受自来水的菌株及其构建方法。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为突变出发菌中的lon基因和clpA基因，得到重组菌；所述突变出发菌中的lon基因为将所述出发菌中的lon基因核苷酸序列自5’末端第1310位的C突变为A；所述突变出发菌中的clpA基因为将所述出发菌中的clpA基因核苷酸序列自5’末端第1895位的T突变为G。本发明的实验证明，本发明通过将大肠杆菌工程菌XZ‑A26中的lon基因和clpA基因进行突变，得到的重组菌XZ‑A47，不仅能够提高L‑丙氨酸产量，而且还可以在自来水配置的发酵培养基中高产L‑丙氨酸，采用自来水配置可以节约成本。
一种高产丙氨酸耐受自来水菌株及其构建方法

[发明专利]一种用于降解食物中亚硝酸盐的含有丙氨酸的调味料-CN201610483086.7在审
发明人：麻姗姗;郭恒华;张冬竹;章晖 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2016-06-28 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： A23L27/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于降解食物中亚硝酸盐的含有丙氨酸的调味料，属于食品加工技术领域。所述调味品中是在常规调味料中添加丙氨酸和抗坏血酸，通过两者以适量的比例复合及对亚硝酸盐的清除作用，有效降低了发色食品中亚硝酸盐的含量，避免了食物中亚硝酸盐引起的致癌等食品安全问题，同时丙氨酸的加入还可以提高调味料的风味，同时满足消费者对食品安全和美味需求。
一种用于降解食物中亚硝酸盐含有丙氨酸调味料

[发明专利]一种富含丙氨酸的低钠鲜味盐-CN201610483570.X在审
发明人：麻姗姗;郭恒华;张冬竹;章晖 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2016-06-28 - 公布日： 2016-11-09 - 主分类号： A23L27/40 文献下载
摘要：本发明公开了一种富含丙氨酸的低钠鲜味盐，属于食品加工技术领域。所述低钠盐由食品级氯化钠、氯化钾、氯化铵、糊精、大米粉、丙氨酸构成。所述低钠盐中钠含量较低,在减钠的同时，丙氨酸的加入掩盖了氯化钾、氯化铵的苦涩味，还可以提升咸度和鲜味，能提升食物的柔和口感，同时满足消费者对食品安全和美味需求。
一种富含丙氨酸鲜味

[发明专利]一种安全、美味的酱油及其配方-CN201510904380.6在审
发明人：纪静;郭恒华;张冬竹;章晖 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2015-12-09 - 公布日： 2016-05-11 - 主分类号： A23L27/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种安全、美味的酱油及其配方，属于调味品技术领域。它包括丙氨酸，味精，呈味核苷酸二钠，酵母提取物，脯氨酸、缬氨酸、甘氨酸、亮氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、丝氨酸中的一种或多种，低钠盐，酱油原油。本发明利用丙氨酸与其他呈味物质产生的增味效果制备口感柔和、味道鲜美的酱油，有效避免了传统酱油使用HVP引入3-MCPD等致癌物的问题，并用低钠盐代替食盐降低酱油中的钠含量，满足了消费者对酱油安全、健康、营养、美味的需求。
一种安全美味酱油及其配方

[发明专利]一种高产L-丝氨酸重组谷氨酸棒杆菌的构建及其发酵方法-CN201410699878.9有效
发明人：张晓梅;许正宏;史劲松;朱勤健;郭恒华;张冬竹 -专利权人：江南大学;安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2014-11-28 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明提出了代谢工程改造和发酵工艺相结合的策略，一方面通过代谢工程手段转变代谢流从糖酵解途径流向L-丝氨酸合成途径，提高了L-丝氨酸的糖酸转化效率；另一方面通过添加营养成分满足代谢改造后导致的谷氨酸棒杆菌对营养物质的需求，解决菌体生长缓慢的问题，提高L-丝氨酸的生产强度。
一种高产丝氨酸重组谷氨酸杆菌构建及其发酵方法

[发明专利]氨基酸产品中美拉德产物的去除方法-CN201410765940.X有效
发明人：张冬竹;郭恒华;刘洁;唐思青;刘洋;彭承骏 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2014-12-11 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： C07C229/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种氨基酸产品中美拉德产物的去除方法，其步骤如下：收集氨基酸发酵液或转化液，先进行过滤处理，调至pH为5.5-6.5，加入活性炭，在50-90℃条件下通入空气曝气搅拌0.5-2h，最后过滤除去活性炭即可，所述氨基酸发酵液或转化液中活性炭的加入量为0.5-3.0g/L，通气量为10-200m3/(h·m3)，搅拌速度为20-100r/min。本发明通过通气搅拌混合液，使活性炭在将料液脱色的同时，还可以有效吸附料液中的美拉德产物，然后在后续的活性炭过滤脱除时一并将料液中的美拉德产物去除，这样一方面可以有效保证氨基酸产品的品质，另一方面还可以避免因美拉德产物的存在而降低氨基酸产品的膜抽滤通过率，该法相对未通气脱色法氨基酸产品的膜抽滤合格率提高10倍。
氨基酸产品中美拉德产物去除方法

[发明专利]菌体细胞的破碎方法-CN201410766776.4在审
发明人： 郭恒华;张冬竹;吴照和;刘洁;唐思青;刘洋 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2014-12-11 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种菌体细胞的破碎方法，其步骤如下：a)冷冻：收集菌体发酵液，泵入片冰机的分水盘，分水盘上的菌体发酵液洒落在片冰机内的结冰面上结成冰层；b)融解破碎：菌液冰片通过冰刀从结冰面上刮离并落入冰仓先在-5～-90℃条件下冷冻1-10h，再在10-60℃条件下融解，即得破碎的菌体细胞液。本发明通过片冰机将菌体发酵液进行冷冻，使得菌体发酵液与片冰机内的结冰面进行大面积接触，实现了菌体发酵液快速制成冰片且极易融解，首次将片冰机应用于生物发酵行业，有效提高了菌体细胞的破碎效率，破碎率达95％，酶活保留率达97％。
菌体细胞破碎方法

[发明专利]β-丙氨酸的合成方法-CN201410765939.7在审
发明人： 郭恒华;张冬竹;刘洁;唐思青;刘洋;章晖 -专利权人：安徽华恒生物科技股份有限公司
申请日： 2014-12-11 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： C12P13/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种β-丙氨酸的合成方法，其步骤如下：a)配制底物：向酶反应器中投入浓度为5g/L-80g/L的L-天冬氨酸底物溶液，用碱化剂调pH为5.0-8.5；b)酶催化反应：向底物溶液中加入含酶菌液进行催化反应，反应过程中分批次加入适量L-天冬氨酸以调节反应物的pH为5.0-9.0，所述含酶菌液由高产L-天冬氨酸α-脱羧酶的工程菌经发酵培养、浓缩、破碎后得到；c)将酶反应器中的反应物进行过滤、脱色、结晶处理，即得β-丙氨酸。采用含酶菌液一步催化L-天冬氨酸转化为β-丙氨酸具有如下优点：生产条件温和，工艺简单，环境污染小；下游提取简便，产品品质高，纯度高达99.0％；β-丙氨酸的转化效率高达99.5％。
丙氨酸合成方法