本发明属于核酸检测技术领域,具体涉及基于微滴数字PCR技术检测猪链球菌的引物和探针及试剂盒和方法。用于检测猪链球菌的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示,探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。所述试剂盒包括所述引物对和探针;利用本发明的引物对和探针,或试剂盒进行检测,可以实现猪链球菌29个传统血清型(1/2型、1‑19型、21型、23‑25型、27‑31型)的检测,检测结果准确可靠。本发明基于微滴数字PCR技术,建立了猪链球菌微滴数字PCR定量检测方法,特异性好,灵敏度高,稳定性好,能对细菌数进行准确定量检测。