本发明公开了一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述单克隆抗体的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所得猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体能够用于胞内劳森菌，以制备的单克隆抗体为一抗，IFTC‑标记的羊抗鼠抗体为二抗，检测感染细胞中的胞内劳森菌，为肠上皮细胞中胞内劳森菌抗原检测方法的建立奠定基础。
本发明公开了一种重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述单克隆抗体的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所制备的重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体纯度高、特异性好、灵敏度高，与其它肠道致病菌无交叉反应性，可用于ELISA、IFA检测，对于临床LI诊断和实验室LI诊断技术研发具有重要意义。
本发明公开了一种基因缺失的无毒猪痘病毒及其在制备疫苗中的应用，所述无毒猪痘病毒是野生猪痘病毒的SPV009基因缺失病毒，所述SPV009基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。相对于现有技术，本发明经过大量试验成功构建了SPVSPV009基因缺失的猪痘病毒，该病毒对猪安全无毒，可作为疫苗表达载体用于其他动物疫病的活载体疫苗的研制，减少养殖业的经济损失。
本发明公开了一种用于检测胞内劳森菌的绝对荧光定量PCR引物对、试剂盒及检测方法，所述引物对包括上游引物和下游引物，其核酸序列如下所示：上游引物：GCTGTGGATTGGGAGAAATC(SEQ ID NO.1)；下游引物：CAAGTTGACCAGCCTCTGC(SEQ ID NO.2)。本发明还建立了一种胞内劳森菌绝对荧光定量PCR检测方法，该方法包括利用所述的引物对，进行荧光定量PCR检测。与传统方法相比，基于核酸特异性序列分子方法的实时荧光定量PCR具有快速、敏感、特异且稳定的优点。本发明可用于临床样品中低含量胞内劳森菌的快速和特异检测，可通过定量方法检测胞内劳森菌含量，从而为了解胞内劳森菌在猪体内的变化规律，以及为猪增生性回肠炎的诊断、流行病学调查及胞内劳森菌致病机制研究奠定基础。
本发明属于生物制品领域，提供一种鼠伤寒沙门菌外膜蛋白L的编码基因、包括该基因的转移载体pUSG11/P28‑OmpL、重组猪痘病毒rSPV‑OmpL及其应用、制备方法。编码基因序列如SEQ ID NO.1所示。重组猪痘病毒是在猪痘病毒VR‑363中插入鼠伤寒沙门菌外膜蛋白L基因获得的。重组猪痘病毒载体疫苗rSPV‑OmpL能够在免疫动物体内大量表达目的蛋白OmpL，能够诱导动物体内产生较高效价的针对OmpL的抗体，并对免疫动物产生良好的保护作用，对小鼠的免疫保护率可高达80％，兼具有弱毒疫苗的免疫效果好和灭活疫苗的安全性高等特点，是一种理想的新型疫苗。
