本发明公开了一种热稳定性提高的植酸酶突变体及其制备方法和应用，属于基因工程和酶工程领域。所述植酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述植酸酶突变体的基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明采用USERecDNA重组技术将植酸酶YiAPPA中结构片段Val23～Thr67替换为植酸酶rPhyXT52中结构片段Val21～Thr65、以及将植酸酶YiAPPA中结构片段Leu381～Ile424替换为植酸酶rPhyXT52中结构片段Leu379～Asp423，获得了热稳定性显著提高并且植酸酶活性基本不变的植酸酶突变体Yr‑Mut，在动物饲料添加剂领域具有良好的应用前景。
本发明公开了一种制备玉米抗性淀粉的III型普鲁兰水解酶突变体及其制备方法和应用，涉及生物酶工程和基因工程领域。所述III型普鲁兰水解酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明对III型普鲁兰水解酶TK‑PUL中邻近催化活性中心的第500位异亮氨酸以及第538位亮氨酸进行饱和突变，构建得到了氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示的III型普鲁兰水解酶突变体。本发明提供的突变型III型普鲁兰水解酶突变体对普通玉米淀粉的比活力由突变前的48.08U/mg提高到133.66U/mg，利用该III型普鲁兰水解酶突变体制备玉米抗性淀粉的制备得率由突变前的30.87％提高到59.15％。
