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[发明专利]一种人工抗体的制备方法-CN202210917136.3在审
发明人： 翁炳焕;黄荷凤;贺林;王伟平;汪辉;姚旭峰;朱智勇;董旻岳;林佳丽;徐威 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-08-01 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种人工抗体的制备方法，其特征在于，从冠状病毒保守基因或微卫星中筛选靶标siRNA，由两条互补的正反义siRNA链合成带loop环的小发夹shRNA，并合成以受体结合域RBD为配体的ACE2，然后将ACE2分别连接到shRNA的正反义链上，合成由shRNA区和ACE2区构成的人工抗体，其中双价ACE2起中和RBD和靶向递送shRNA的作用，shRNA通过ACE2连接病毒，并随着病毒的感染进入靶细胞，不但可避免shRNA的非特异性递送给未感染细胞的副作用，而且还能产生抗变异毒株和以ACE2中和病毒的作用，另外以两分子ACE2和1分子shRNA合成的人工抗体及shRNA的免疫佐剂作用可使ACE2具有更强的抗原性，刺激机体产生的抗‑ACE2又具有抗病毒作用。
一种人工抗体制备方法

[发明专利]一种靶向药物nCoVshRNA·2ACE2的合成方法-CN202210917146.7在审
发明人： 翁炳焕;李兰娟;贺林;朱智勇;姚旭峰;汪辉;马端;师越;盛国平;俞佳玲;罗玉琴 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-08-01 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： A61K47/64 文献下载
摘要：一种新型冠状病毒靶向药物nCoVshRNA·2ACE2的合成方法，其特征在于，设计冠状病毒及其变异株的共有RNAi序列siRNA，将两条互补的siRNA合成带loop环的小发夹shRNA，并合成以受体结合域RBD为配体的ACE2或穿胞肽ACE2，然后将ACE2分别连接到shRNA的正反义链上，合成由shRNA区和ACE2区构成的nCoVshRNA·2ACE2，其中双价ACE2起中和RBD和靶向递送shRNA的作用，以ACE2桥接的“shRNA‑ACE2‑RBD‑病毒”复合物使shRNA随着病毒的感染进入靶细胞，不但可避免将shRNA非特异性递送给未感染细胞的副作用，而且还能产生抗变异毒株和以ACE2中和病毒的作用，另外以两分子ACE2和1分子shRNA合成的化合物，因改变了ACE2的分子量和分子结构，以及因shRNA的免疫佐剂作用，使ACE2具有更强的抗原性，刺激机体产生的抗‑ACE2又具有抗病毒作用。
一种靶向药物 ncovshrna ace2 合成方法

[发明专利]一种化学药物nCoVshRNA·2RBD的合成方法-CN202210920201.8在审
发明人： 翁炳焕;黄荷凤;贺林;王伟平;姚旭峰;朱智勇;马端;林佳丽;陈敏;严恺 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-08-01 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种靶向药物nCoVshRNA·2RBD的合成方法，将源自新型冠状病毒受体结合域的RBD作为靶向递送载体，将源自新型冠状病毒及其变异毒株的各毒株共有RNAi序列siRNA合成shRNA，并使shRNA正反义链分别连接RBD的N端，构成以RBD靶向递送shRNA的具有靶向基因药物和大分子疫苗双重作用的化合物，并使RBD和shRNA相互增效产生诸多新功能。其中shRNA既是广谱抗病毒药物又是使RBD疫苗增效的免疫佐剂；RBD作为靶向递送载体从而可避免非靶向治疗的副作用，同时RBD又是蛋白疫苗，其免疫产生的抗‑RBD能中和病毒、阻止病毒通过ACE2感染，且2分子RBD与shRNA合成的化合物增加了分子量及结构复杂性从而增强抗原性，被RBD结合的shRNA不易被酶降解、易通过细胞膜、易被递送到靶细胞浆。
一种化学药物 ncovshrna rbd 合成方法

[发明专利]一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法-CN202210473225.3在审
发明人： 翁炳焕;王伟平;师越;俞光平;陈敏;杨艳梅;俞佳玲;王庭璋;杨昊堃;杨含金 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-05-01 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： A61K47/64 文献下载
摘要：一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，从冠状病毒保守基因或微卫星中筛选靶标siRNA，由两条互补的正反义siRNA链合成带loop环的小发夹shRNA，并合成以受体结合域RBD为配体的ACE2或穿胞肽ACE2，然后将ACE2分别连接到shRNA的正反义链上，合成由shRNA区和ACE2区构成的ACE2siRNA，其中双价ACE2起中和RBD和靶向递送shRNA的作用，以ACE2桥接的“shRNA‑ACE2‑RBD‑病毒”复合物使shRNA随着病毒的感染进入靶细胞，不但可避免将shRNA非特异性递送给未感染细胞的副作用，而且还能产生抗变异毒株和以ACE2中和病毒的作用，另外以两分子ACE2和1分子shRNA合成的ACE2siRNA及shRNA的免疫佐剂作用可使ACE2具有更强的抗原性，刺激机体产生的抗‑ACE2又具有抗病毒作用。
一种 ace2 靶向递送 shrna ace2sirna 药物制备方法

[发明专利]一种人工抗体的制备方法-CN202210491741.9在审
发明人： 翁炳焕;王伟平;黄荷凤;姚旭峰;朱智勇;俞光平;潘小平;陈松长;李素萍;徐威 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-05-01 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种人工抗体的制备方法，其特征在于，从冠状病毒保守基因或微卫星中筛选靶标siRNA，由两条互补的正反义siRNA链合成带loop环的小发夹shRNA，并合成以受体结合域RBD为配体的ACE2，然后将ACE2分别连接到shRNA的正反义链上，合成由shRNA区和ACE2区构成的人工抗体，其中双价ACE2起中和RBD和靶向递送shRNA的作用，shRNA通过ACE2连接病毒，并随着病毒的感染进入靶细胞，不但可避免shRNA的非特异性递送给未感染细胞的副作用，而且还能产生抗变异毒株和以ACE2中和病毒的作用，另外以两分子ACE2和1分子shRNA合成的人工抗体及shRNA的免疫佐剂作用可使ACE2具有更强的抗原性，刺激机体产生的抗‑ACE2又具有抗病毒作用。
一种人工抗体制备方法

[发明专利]一种以RBD靶向递送shRNA的nCOVsiRNA药物制备方法-CN202210491811.0在审
发明人： 翁炳焕;王伟平;李娟;姚旭峰;应俊;朱智勇;李小平;陆燕;陈敏;严恺 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-05-01 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： A61K39/215 文献下载
摘要：本发明涉及一种以RBD靶向递送shRNA的nCOVsiRNA药物制备方法，发现源自冠状病毒受体结合域的新型靶向递送载体RBD和源自冠状病毒保守基因的抗变异毒株靶标shRNA。合成shRNA和RBD，并使shRNA正反义链分别连接RBD的N端，构成以RBD靶向递送shRNA的具有基因药物和大分子疫苗双重作用的化合物，并使RBD和shRNA相互增效产生诸多新功能。其中shRNA既是广谱抗病毒药物又是使RBD疫苗增效的免疫佐剂；RBD既作为靶向递送载体从而可避免非靶向基因治疗的副作用，又是常用的蛋白疫苗，其免疫产生的抗‑RBD能中和病毒、阻止病毒通过ACE2感染，双份RBD与shRNA合成的化合物增加了分子量及结构复杂性从而增强抗原性，被RBD结合的shRNA不易被酶降解、易通过细胞膜、易被递送到靶细胞浆。
一种 rbd 靶向递送 shrna ncovsirna 药物制备方法

[发明专利]一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物-CN202210116885.6在审
发明人： 翁炳焕;陈敏;许亚丽;姚旭峰;罗玉琴;杨艳梅;李小平;俞佳玲;师越 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-02-08 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： A61K47/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物，从冠状病毒保守基因或微卫星中筛选靶标siRNA，由两条互补的正反义siRNA链合成带loop环的小发夹shRNA，并合成以受体结合域RBD为配体的ACE2或穿胞肽ACE2，然后将ACE2分别连接到shRNA的正反义链上，合成由shRNA区和ACE2区构成的ACE2siRNA，其中双价ACE2起中和RBD和靶向递送shRNA的作用，以ACE2桥接的“shRNA‑ACE2‑RBD‑病毒”复合物使shRNA随着病毒的感染进入靶细胞，不但可避免将shRNA非特异性递送给未感染细胞的副作用，而且还能产生抗变异毒株和以ACE2中和病毒的作用，另外以两分子ACE2和1分子shRNA合成的ACE2siRNA及shRNA的免疫佐剂作用可使ACE2具有更强的抗原性，刺激机体产生的抗‑ACE2又具有抗病毒作用。
一种 ace2 靶向递送 shrna ace2sirna 药物

[发明专利]一种人工抗体-CN202210163969.5在审
发明人： 翁炳焕;姚旭峰;杨含金;徐威;虞晓鹏;罗玉琴;王丽雅;杨昊堃;李素萍 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-02-22 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种人工抗体，其特征在于，从冠状病毒保守基因或微卫星中筛选靶标siRNA，由两条互补的正反义siRNA链合成带loop环的小发夹shRNA，并合成以受体结合域RBD为配体的ACE2，然后将ACE2分别连接到shRNA的正反义链上，合成由shRNA区和ACE2区构成的人工抗体，其中双价ACE2起中和RBD和靶向递送shRNA的作用，shRNA通过ACE2连接病毒，并随着病毒的感染进入靶细胞，不但可避免shRNA的非特异性递送给未感染细胞的副作用，而且还能产生抗变异毒株和以ACE2中和病毒的作用，另外以两分子ACE2和1分子shRNA合成的人工抗体及shRNA的免疫佐剂作用可使ACE2具有更强的抗原性，刺激机体产生的抗‑ACE2又具有抗病毒作用。
一种人工抗体

[发明专利]一种以RBD靶向递送shRNA的nCOVsiRNA药物-CN202210116884.1在审
发明人： 翁炳焕;应俊;师越;严恺;陈敏;黄颖芝;钱欣;杨艳梅;姚旭峰;徐洁颖 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-02-08 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： A61K39/215 文献下载
摘要：本发明涉及一种以RBD靶向递送shRNA的nCOVsiRNA药物，发现了源自冠状病毒受体结合域的新型靶向递送载体RBD和源自冠状病毒保守基因的抗变异毒株靶标shRNA。合成shRNA和RBD，并使shRNA正反义链分别连接RBD的N端，构成以RBD靶向递送shRNA的具有基因药物和大分子疫苗双重作用的化合物，并使RBD和shRNA相互增效产生诸多新功能。其中shRNA既是广谱抗病毒药物又是使RBD疫苗增效的免疫佐剂；RBD既作为靶向递送载体从而可避免非靶向基因治疗的副作用，又是常用的蛋白疫苗，其免疫产生的抗‑RBD能中和病毒、阻止病毒通过ACE2感染，双份RBD与shRNA合成的化合物增加了分子量及结构复杂性从而增强抗原性，被RBD结合的shRNA不易被酶降解、易通过细胞膜、易被递送到靶细胞浆。
一种 rbd 靶向递送 shrna ncovsirna 药物

[发明专利]一种以新型载体递送的抗变异毒株保守靶标nCOVsiRNA的筛选方法-CN202210116888.X在审
发明人： 翁炳焕;钱欣;姚旭峰;余夏飞;俞佳玲;陈敏;杨艳梅;师越;徐洁颖;梁妙玲 -专利权人：杭州痴创生物科技有限公司
申请日： 2022-02-08 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： A61K47/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种以新型载体递送的抗变异毒株保守靶标nCOVsiRNA的筛选方法，从不随病毒变异而变异的冠状病毒保守基因、超保守基因和/或保守微卫星中筛选siRNA，获得以保守基因为靶标、具有广谱抗变异毒株作用的siRNA，进而合成siRNA；并根据冠状病毒特异性感染ACE2表达细胞，及配体RBD与受体ACE2的关系，合成RBD或ACE2，并将合成的RBD或ACE2分别与合成的siRNA连接为以RBD为靶向递送载体的RBDnCoVsiRNA或以ACE2为靶向递送载体的ACE2nCoVsiRNA，其中RBD将CoVsiRNA递送给ACE2受体，通过ACE2受体通道进入靶细胞；而ACE2则将CoVsiRNA递送给病毒RBD，进而随病毒感染靶细胞而进入靶细胞。
一种新型载体递送变异保守靶标 ncovsirna 筛选方法

[发明专利]一种以酸奶益生菌为载体的冠状病毒ACE2疫苗-CN202110393668.7在审
发明人： 翁炳焕 -专利权人： 翁炳焕
申请日： 2021-04-09 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： A61K39/42 文献下载
摘要：一种以酸奶益生菌为载体的冠状病毒ACE2疫苗，其特征在于，构建表达ACE2和半乳糖苷酶的重组载体并转化半乳糖苷酶缺陷型嗜酸乳杆菌，获得过表达ACE2并以半乳糖苷酶为筛选标志的基因重组嗜酸乳杆菌，以替换传统发酵菌制备乳制品，或以海藻酸钠包被成抵抗胃液的微胶囊配制乳制品，当吃乳制品或喝酸奶时，其中的嗜酸乳杆菌到达并定植于肠道，在乳糖诱导下持续表达ACE2蛋白，进而ACE2蛋白刺激宿主产生抗‑ACE2，其中ACE2蛋白能封闭冠状病毒受体结合区，抗‑ACE2能封闭宿主细胞ACE2受体，表达在益生菌体表面的ACE2能竞争吸附冠状病毒，三者共同预防病毒感染，而且ACE2有益于氨基酸吸收和保护心血管，益生菌有益于肠道微生态，是与病毒抗原、抗体无关的食品级新型疫苗。
一种酸奶益生菌载体冠状病毒 ace2 疫苗

[发明专利]一种以重组益生菌为载体的冠状病毒口服疫苗-CN202110393666.8在审
发明人： 翁炳焕 -专利权人： 翁炳焕
申请日： 2021-04-09 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：一种以重组益生菌为载体的冠状病毒口服疫苗，其特征在于，利用ACE2基因表达的ACE2蛋白能封闭冠状病毒S1‑RBD以及ACE2蛋白刺激宿主产生的抗‑ACE2能封闭宿主细胞ACE2受体的机制，建立以ACE2基因表达的ACE2蛋白中和冠状病毒以及以ACE2蛋白诱导的抗‑ACE2中和宿主细胞ACE2受体从而阻断冠状病毒通过ACE2受体感染的新型ACE2疫苗制备技术方案，并基于ACE2基因可将S1‑RBD和/或IL‑10基因联合克隆至表达载体，构建食品级重组子，使被转化的重组益生菌共表达ACE2、S1‑RBD和/或IL‑10基因，以海藻酸钠包被成抵抗胃液的微胶囊，制成冠状病毒食品级口服多价疫苗，食用后的重组益生菌长期定植并持续表达目的基因，起联合免疫和维持肠道微生态、提高免疫力、产生多种维生素等益生作用。
一种重组益生菌载体冠状病毒口服疫苗

[发明专利]一种预防冠状病毒感染的益生酸奶及制备方法-CN202110393667.2在审
发明人： 翁炳焕 -专利权人： 翁炳焕
申请日： 2021-04-09 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：一种预防冠状病毒感染的益生酸奶及制备方法，将ACE2、S1‑RBD和/或IL‑10基因连接胞壁锚定基因或分泌型基因，然后克隆至以半乳糖苷酶为筛选标志的质粒、胞外锚定质粒或分泌型质粒，构建重组质粒，转化半乳糖苷酶缺陷型嗜酸乳杆菌，获得能在胞内、胞壁或胞外定位表达ACE2、RBD和/或IL‑10融合蛋白的以半乳糖苷酶筛选的重组益生菌，以海藻酸钠包被成抵抗胃液的微胶囊，配制成发酵酸奶，口服后重组菌定植于肠道持续表达外源基因，其中表达的ACE2蛋白能封闭病毒RBD并有利于氨基酸吸收和心血管，IL‑10起抗炎作用；产生的抗‑ACE2能封闭ACE2受体，抗‑RBD能封闭病毒RBD，阻断病毒通过RBD与ACE2受体结合感染；重组菌有维持肠道微生态、提高免疫力、产生多种维生素等益生作用。
一种预防冠状病毒感染酸奶制备方法

[发明专利]一种新冠肺炎单克隆抗体疫苗的制备方法-CN202110151510.9在审
发明人： 翁炳焕 -专利权人： 翁炳焕
申请日： 2021-01-27 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：一种新冠肺炎单克隆抗体疫苗的制备方法，其特征在于，因有报道某些病毒进入宿主后产生的非中和抗体或亚中和抗体反而增强易感性或加重病情，接种新冠病毒抗原是否有这种被称为抗体依赖性感染增强(ADE)的副作用尚未定论。本发明将新冠病毒易感基因ACE2和永生化基因SV40LT转染干细胞以制备永生化新冠病毒孵化细胞，使新冠病毒与孵化细胞共同培养时随孵化细胞的无限生长而大量繁殖，用以产业化制备新冠病毒、灭活病毒，进而免疫动物制备杂交瘤细胞及(单克隆)抗体，可在体外筛选后去除有ADE风险的非中和或亚中和抗体，选择无ADE的抗体作为被动免疫抗体疫苗用于紧急预防或治疗，以防抗原疫苗接种后少数体质在体内产生有ADE风险的非中和或亚中和抗体。
一种肺炎单克隆抗体疫苗制备方法

[发明专利]一种基于人造新冠病毒孵化细胞的灭活疫苗制备方法-CN202110151509.6在审
发明人： 翁炳焕 -专利权人： 翁炳焕
申请日： 2021-01-27 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： A61K39/215 文献下载
摘要：一种基于人造新冠病毒孵化细胞的灭活疫苗制备方法，根据新冠病毒通过ACE2受体感染宿主细胞并易在表达ACE2的宿主细胞中繁殖的机制，从产前诊断后废弃的细胞中分离肺干细胞，转染ACE2和SV40LT基因，开发易使新冠病毒进入细胞内繁殖的永生化新冠病毒孵化细胞，使病毒与孵化细胞共培养时能随孵化细胞的扩增而大量繁殖，孵化所得病毒液经滤器过滤、超滤浓缩、层析纯化、除菌过滤、甲醛灭活、纯度检测、中和抗体及残留蛋白和DNA检测合格后，制成灭活疫苗。本发明不使用异种动物或细胞扩增病毒而是以同种人类永生干细胞制备的孵化细胞扩增新冠病毒，使所制新冠疫苗不会残留具有免疫原或致瘤等风险的异种动物蛋白或基因片段，疫苗接种理论上较安全。
一种基于人造病毒孵化细胞疫苗制备方法

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