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[发明专利]一种烟草δ（24）-固醇还原酶基因及其应用-CN202110580248.X在审
发明人：曾婉俐;许力;黄海涛;陈千思;李晶;杨文武;米其利;刘欣;向海英;邓乐乐;蒋佳芮 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2021-05-26 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明涉及一种烟草δ(24)‑固醇还原酶基因及其应用，δ(24)‑固醇还原酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本申请中，通过对特定δ(24)‑固醇还原酶基因的初步研究，发现其与烟草叶片中豆甾醇含量高度相关，在本氏烟草中将该基因沉默，烟草叶片中豆甾醇含量发生了明显降低，降低了27.9％，而甾醇总量变化不明显。基于这一特性，可利用基因工程手段，为烟叶品质调控、烟草新品种培育提供一定的应用基础和参考借鉴。
一种烟草 24 固醇还原酶基因及其应用

[发明专利]一种测定吸烟者尿液中尼古丁和可替宁的方法-CN201811216023.0有效
发明人：李晶;李雪梅;杨光宇;刘欣;杨叶昆;陈建华;张承明;耿永勤;米其利;向明 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-10-18 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种测定吸烟者尿液中尼古丁和可替宁的方法，包括如下步骤：(1)标准工作曲线的建立：配制标准工作液和内标工作液，并以实际尿液样品为基质进行混合标准溶液的配制，利用UPLC‑MS/MS分析并建立标准工作曲线；(2)收集尿液样品，并进行前处理，利用甲醇和水调节尿液的稳定性；(3)将步骤(2)调节后的尿液样品过滤，利用UPLC‑MS/MS对尿液样品进行检测，根据步骤(1)建立的标准曲线计算吸烟者尿液样品中尼古丁和可替宁含量。本发明采用甲醇替代硫酸氢钠来调节尿液的稳定性，避免加入硫酸氢钠所造成的基质效应，大大提高了质谱检测器灵敏度。
一种测定吸烟者尿液尼古丁可替宁方法

[发明专利]一种检测滤棒抑菌效果的方法-CN202110373074.X在审
发明人：李雪梅;米其利;孔维松;高茜;师建全;宁玉婷;刘欣;黄海涛;李晶;许永;杨光宇;杨叶昆;王晋 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2021-04-07 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测滤棒抑菌效果的方法，包括如下步骤：活化测试菌株并制备菌悬液，制备测试及对照滤棒样品，加样并接触作用，洗脱菌并检测存活菌数，计算抑菌率。本技术方案的检测滤棒抑菌效果的方法可以快捷地检测滤棒的抑菌效果，操作简便，利于推广应用。
一种检测滤棒抑菌效果方法

[发明专利]一种基因突变素材中纯合突变种子的筛选方法及筛选系统-CN202110284414.1在审
发明人：邓乐乐;杨文武;阴耕云;米其利;高茜;单秋甫;朱玲超;许力;张建铎;蒋佳芮;向海英;曾婉俐;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2021-03-17 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： G16B20/20 文献下载
摘要：本发明提供一种基因突变素材中纯合突变种子的筛选方法及筛选系统，属于烟草育苗领域。纯合突变种子的筛选方法为：S1：查询待筛选的突变素材的保存信息；S2：筛选出未点种的种子；S3：去除未基因突变的种子，筛选出未点种的已基因突变的种子；S4：筛选出未点种的已基因突变的纯合体种子；S5：在所述纯合突变种子中筛选出具有特定基因的种子。该筛选方法能根据要求有效地筛选出特定基因种子；同时采用筛选系统可快速高效，准确的筛选出种子。包括种子保存信息库模块，种子查询模块，未点种种子的筛选模块，已基因突变种子的筛选模块，纯合体突变种子的筛选模块，特定基因种子的筛选模块。
一种基因突变素材中纯合突变种子筛选方法系统

[发明专利]一种基于变形链球菌快速筛选电子烟液的方法-CN201810119204.5有效
发明人： 米其利;高茜;段沅杏;赵伟;巩效伟;楼牧梦;刘晓艳;郭绍翠;夭建华 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-02-06 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于变形链球菌快速筛选电子烟液的方法，属于电子烟研发技术领域。本发明将体外抑菌检测法和烟液调配技术组合，首先制备含不同植物提取物的烟液，采用微量稀释抑菌检测技术对所制备的烟液进行筛选，获得具有抑菌活性的烟液。本发明方法的特点在于：采用变形链球菌作为测试菌株，确定了适用于电子烟液的微量稀释抑菌检测体系，筛选检测效率高，可在较短时间内获得具抑菌活性的烟液配方，为安全、高品质电子烟液的获得提供有效技术支持。
一种基于变形链球菌快速筛选电子方法

[发明专利]一种基于金黄色葡萄球菌快速筛选电子烟液的方法-CN201810119218.7有效
发明人： 米其利;管莹;夭建华;张霞;段沅杏;刘晓艳;楼牧梦;赵伟;郭绍翠 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-02-06 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于金黄色葡萄球菌快速筛选电子烟液的方法，属于电子烟研发技术领域。本发明将体外抑菌检测法和烟液调配技术组合，首先制备含不同植物提取物的烟液，采用微量稀释抑菌检测技术对所制备的烟液进行筛选，获得具有抑菌活性的烟液。本发明方法的特点在于：确定了适用于电子烟液的微量稀释抑菌检测体系，筛选检测效率高，可在较短时间内获得具抑菌活性的烟液配方，为安全、高品质电子烟液的获得提供有效技术支持。
一种基于金黄色葡萄球菌快速筛选电子方法

[发明专利]一种贝莱斯芽孢杆菌及其制备方法和应用-CN201711454636.3有效
发明人：夭建华;米其利;李晶;朱昆;楼牧梦;张崇阳;李雪梅;陈建华;杨光宇;莫明和 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-28 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）YGA1及其制备方法和应用，属于微生物应用技术领域。本发明所用贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）YGA1菌株已于2017年11月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017705。用YGA1菌株制备的浓缩发酵液在料液中添加0.1‑1.0%时，能够有效稳定料液的感官质量，抑制料液中腐败细菌的增殖，延长料液保质期，卷烟感官评吸结果表明上述添加量对卷烟感官抽吸品质没有影响。本发明方法成本低，操作方法易行，在延长料液保质期、防止料液变质方面具有很大应用潜力。
一种贝莱斯芽孢杆菌及其制备方法应用

[发明专利]一种菌株Bacillus nealsonii-CN201711454135.5有效
发明人：李雪梅;米其利;管莹;楼牧梦;李晶;高茜;夭建华;杨光宇;陈建华;莫明和 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-28 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种菌株Bacillus nealsoniiYFM3及其在料液保质提质中的应用，属于微生物应用技术领域。本发明所用Bacillus nealsonii YFM3菌株已于2017年11月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO.M 2017704。用YFM3菌株制备的浓缩发酵液在料液中添加1‑10%时，能够抑制腐败细菌的增殖延缓料液的腐败变质，延长保质期，还能够降低卷烟烟气刺激性和杂气，使烟气圆润、柔和，提升津润感和舒适性。本发明方法成本低，操作易行，高效，在延长料液保质期、防止料液变质方面具有很大应用潜力。
一种菌株 base italic bacillus nealsonii

[发明专利]一种具有抗菌活性的萘甲醛类化合物、其制备方法及用于卷烟纸中用途-CN201810893186.6有效
发明人：高茜;刘欣;李晶;王晋;李雪梅;米其利;张承明;黄海涛;周敏;杨光宇;胡秋芬;李干鹏 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-08-07 - 公布日： 2021-05-07 - 主分类号： C07C49/258 文献下载
摘要：本发明公开了一种萘甲醛类化合物，该化合物具有如下所示的结构：该化合物命名为：5‑甲氧基‑2‑甲基‑7‑(2‑氧代丙基)‑1‑萘甲醛，分子式为C16H16O3。本发明还公开了从喉毛花中提取所述萘甲醛类化合物的方法和将该化合物用于卷烟纸中的用途。
一种具有抗菌活性甲醛化合物制备方法用于卷烟用途

[发明专利]一种测定新鲜烟叶中氨基酸含量的方法-CN202110145273.5在审
发明人：邓乐乐;宋春满;杨文武;许永;米其利;向海英;李雪梅;杨光宇 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2021-02-02 - 公布日： 2021-04-30 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种测定新鲜烟叶中氨基酸含量的方法，包括如下步骤：①配制18种氨基酸的标准溶液；②样品处理：③高效液相色谱分析；④计算求得样品中的各氨基酸的含量。本发明的方法简单，适用于新鲜烟叶中18种游离氨基酸的含量分析。
一种测定新鲜烟叶氨基酸含量方法

[发明专利]一种植物抗逆性延续筛选方法-CN202011611387.6在审
发明人：许力;高茜;米其利;蒋佳芮;杨文武;向海英;曾婉俐;李雪梅;杨光宇;刘馨芮彤;邓乐乐;张建铎 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2020-12-30 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： A01G7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物抗逆性延续筛选方法，包括：将待测植物种子消毒后，点种于培养基中培养至露白及十字期；将露白的种子移至添加有胁迫剂的培养基中培养；获取添加有胁迫剂的培养基培养的植物种子的根长、叶片尺寸及叶色；将十字期的种子移栽至含有基质土的培养基中培养，得到植株幼苗；对植株幼苗进行浇灌盐溶液处理或干旱处理，获取抗逆性指标；挑选植株幼苗继续培养至特定生长时期，对特定生长时期的植株进行相同的抗逆性试验，获取抗逆性指标。本公开的植物抗逆性延续筛选方法可对植物不同生长阶段的抗逆性进行筛选，可系统全面地完成植物抗逆性的筛选。
一种植物抗逆性延续筛选方法

[发明专利]一种植物抗逆性快速筛选方法-CN202011611386.1在审
发明人：许力;米其利;高茜;蒋佳芮;刘欣;向海英;曾婉俐;李雪梅;刘馨芮彤;杨文武;杨光宇;邓乐乐;张建铎 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2020-12-30 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： A01C1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物抗逆性快速筛选方法，包括如下步骤：步骤(1)：将吸水纸和滤纸层叠放置于培养皿中，吸水纸位于滤纸的下方；步骤(2)：采用添加有胁迫剂的培养液浸湿吸水纸和滤纸；步骤(3)：将植物种子放置于滤纸上，在培养温度为25±1℃，光照强度为30‑50μmol/(m2·s)，光照时间为16h/d的条件下培养7‑15d；步骤(4)：获取添加有胁迫剂的培养液培养的植物种子的发芽率、根系发达程度、叶片尺寸及叶色，得到具有抗逆性的植物种子。本公开的植物抗逆性快速筛选方法可快速简便地筛选得到具有较高抗逆性的植物种子，从而实现植物抗逆性的快速筛选。
一种植物抗逆性快速筛选方法

[发明专利]一种混合库基因编辑T2代烟株筛选方法-CN201811482785.5有效
发明人：高茜;向海英;曾婉俐;黄海涛;米其利;李晶;许永;孔维松;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-12-05 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： G01N33/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种混合库基因编辑T2代烟株筛选方法，包括：(1)使用掌上电脑采集样品信息并与服务器终端进行无线连接；(2)根据掌上电脑与服务器终端无线连接的结果对烟叶样品进行管理，实时完成需进行烟叶样品采集的烟株的筛选、烟叶样品的采集、签收、处理、存储、派样、检测、验余样品存储和验余样品处置的操作；并将检测结果反馈给烟株种植人员，从而完成混合库基因编辑T2代烟株筛选。本发明的方法可以达到对相似的海量的混合库基因编辑T2代烟株的高效、精准的筛选。
一种混合基因编辑 t2 代烟株筛选方法

[发明专利]一种唾液产气微生物的分离方法-CN202011410962.6在审
发明人：高茜;米其利;罗娜;王雪;许力;管莹;向海英;曾婉俐;杨光宇;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2020-12-03 - 公布日： 2021-03-16 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种唾液产气微生物的分离方法，包括如下步骤：(1)稀释采集的唾液；(2)将稀释的唾液涂布于不同类型的培养基上，在厌氧环境中恒温培养；(3)待培养基上生长出菌落后，取无菌薄膜贴于培养基上，判断菌落是否产气；(4)选取产气的菌落进行划线纯化后，接种至同类型的培养基上；(5)重复执行步骤(3)和(4)；(6)对步骤(5)中得到产气菌落进行划线纯化，直到得到单菌落；(7)将单菌落接种至装有同类型的培养基并放置了杜氏小管的离心管中进行恒温培养，出现气泡的菌落即为唾液产气微生物。本公开的唾液产气微生物的分离方法在菌株分离的同时展开产气微生物的筛选，可有效提高唾液产气微生物的分离和筛选效率。
一种唾液微生物分离方法

[发明专利]一种混合库基因编辑T1代烟株筛选方法-CN201811482766.2有效
发明人：李雪梅;高茜;曾婉俐;向海英;杨光宇;米其利;李晶;黄海涛;宋春满 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-12-05 - 公布日： 2021-03-16 - 主分类号： G01N33/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种混合库基因编辑T1代烟株筛选方法，包括：(1)使用掌上电脑采集样品信息并与服务器终端进行无线连接；(2)根据掌上电脑与服务器终端无线连接的结果对烟叶样品进行管理，实时完成需进行烟叶样品采集的烟株的筛选、烟叶样品的采集、签收、处理、存储、派样、检测、验余样品存储和验余样品处置的操作；并将检测结果反馈给烟株种植人员，从而完成混合库基因编辑T1代烟株筛选。本发明的方法可以达到对相似的海量的混合库基因编辑T1代烟株的高效、精准的筛选。
一种混合基因编辑 t1 代烟株筛选方法