本发明提供了一种单胺氧化酶突变体及其应用，所述单胺氧化酶突变体为发生了氨基酸突变的单胺氧化酶；所述单胺氧化酶包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；所述氨基酸突变的类型包括V239I、N240D、H241C、V243M、N333S、D344S、R345P、H394A、I396K、A397M或Q400E中的任意一种或至少两种的组合。本发明所述单胺氧化酶突变体的酶活得到了显著提升，降低了(1R,5S)‑6,6‑二甲基‑3‑氮杂双环[3.1.0]己烷‑2‑烯的生产难度及生产成本，提高了目标产物的得率及生产效率，促进了相关产品的推广与使用，具有重要的应用价值。
本发明公开了一种羧酸酯酶突变体及其制备方法和用其制备(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸的方法。所述羧酸酯酶突变体在氨基酸序列SEQ ID NO.1的基础上发生如下突变中的任意一种或至少两种的组合：I232L、P234V、S235A或F391L。本发明创造性地发现通过设计氨基酸的多个不同位点的突变，能够提高羧酸酯酶的活性，例如显著提高了其催化外消旋3‑环己烯‑1‑羧酸甲酯生产(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸的活力，有效降低酶使用量，降低生产成本，提高产物(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸的收率，同时提高羧酸酯酶的可溶性表达能力，有利于通过微生物发酵进行规模化生产，更适于商业和工业应用。
本发明提供一种亚胺还原酶突变体及其制备方法和在催化制备右美沙芬中间体的应用，所述亚胺还原酶突变体为发生了氨基酸突变的亚胺还原酶，所述亚胺还原酶包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述氨基酸突变的类型包括I122T、D212A或G228R中的任意一种或至少两种的组合。本发明通过在亚胺还原酶中引入突变，显著提高了酶的活性以及立体选择性，能够在温和条件下高收率反应合成右美沙芬中间体(S)‑1‑(4‑甲氧基苄基)‑1,2,3,4,5,6,7,8‑八氢异喹啉，大大降低了生产成本，适用于工业化生产。
本发明提供一种催化水解生成卡托普利中间体D‑β‑乙酰硫代异丁酸的方法，其特征在于，所述方法为：以DL‑β‑乙酰硫代异丁酸甲酯的外消旋混合物为底物，在酯酶的作用下，使得外消旋混合物中的D‑β‑乙酰硫代异丁酸甲酯发生水解反应生成D‑β‑乙酰硫代异丁酸；所述酯酶包括SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明中可以将外消旋混合物中的D‑β‑乙酰硫代异丁酸甲酯进行水解生成D‑β‑乙酰硫代异丁酸，收率达到45％，光学纯度达到99％，并且对于L构型体不会产生影响，高效实现两种异构体的拆分，具有酶成本低，转化时间短、工艺操作简单等特点，具有大规模工业应用的广阔前景。
本发明提供一种新型蔗糖磷酸化酶突变体及其在合成甘油葡糖苷中的应用，该突变体的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO.2相比，在氨基酸序列SEQ ID NO：2中第L195位、第L235位、第H294位进行单突变、两两联合突变、三个联合突变中的一种突变；该新型蔗糖磷酸化酶突变体酶用于催化合成甘油葡糖苷。本发明构建的新型蔗糖磷酸化酶突变体酶具有成本低，转化时间短、工艺操作简单等特点，具有大规模工业应用的广泛前景。
本发明提供一种烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体及其应用。所述烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第59位、第119位或第149位中的任意一个或至少两个氨基酸经取代获得的氨基酸序列，且其具有烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶的活性。本发明中对烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶的位点进行筛选，定点突变其中与催化相关的位点，获得了酶活较高的突变体，能够提升烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的产量，降低烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的生产成本。
