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[发明专利]一种使干细胞大量分泌目标因子的培养基组合和方法-CN202310884942.X在审
发明人：陆晓;廉云飞;张晓欢 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供一种诱导脐带间充质干细胞分泌脑源性神经营养因子的方法，(1)第一诱导阶段：将贴壁脐带间充质干细胞采用诱导培养基1培养至细胞成星型聚集生长；诱导培养基1配方为：人血小板裂解物(HPL)3％、N2添加物1‑3％、外用人表皮生长因子(EGF)10‑100ng/ml、外用重组人碱性成纤维生长因子(bFGF)10‑100ng/ml、DMEM/F‑12培养基至使用量；(2)第二诱导阶段：弃去诱导培养基1，将步骤(1)获得的细胞采用诱导培养基2进行培养，获得脑源性神经营养因子；诱导培养基2配方为：外用重组人碱性成纤维生长因子(bFGF)20ng/ml、人血小板裂解物(HPL)0.1％、1‑甲基‑3‑异丁基黄嘌呤(IBMX)0.1‑2mM、无水醋酸钠5‑20mM、DMEM/F‑12培养基至使用量。本发明方法操作简单、成本低，安全性高、效率高。
一种干细胞大量分泌目标因子培养基组合方法

[发明专利]一种低毒、高效的细胞治疗用载体的制造方法-CN202310884943.4在审
发明人：秦静;陆晓 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： A61K47/22 文献下载
摘要：本发明提供一种低毒、高效的细胞治疗用载体的制造方法，具体涉及提供DMTMM在制备药物递送脂质体中的应用，一种药物递送脂质体的制备方法，前述的制备方法制备得到的药物递送脂质体，前述的药物递送脂质体在制备核酸药物中的应用。本发明提供的制备方法制备得到的脂质体毒性低且与生物分子偶联的获取率高。本方法安全性高、获得量大、工艺难度低，适于推广应用。
一种低毒高效细胞治疗载体制造方法

[发明专利]一种可供冻存的细胞保存制剂-CN202310884940.0在审
发明人：廉云飞;陆晓;张晓欢 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提供一种可供冻存的细胞保存制剂，包括5.0％～10.0％(v/v)的丙三醇、0.1％‑3.4％的琥珀酰明胶(m/v)、不高于1％(m/v)的泊洛沙姆188、1.0％‑10.0％(m/v)的羟乙基淀粉、1.0％～10.0％(m/v)的人血白蛋白，采用复方电解质注射液加至处方量。可供冻存的细胞保存制剂能够使得细胞制剂在回输前的较长时间内保持高活率，保证细胞制剂治疗效果的同时，对人体无毒副作用。此种细胞制剂处方安全性高、稳定性强，适于推广应用。
一种可供冻存细胞保存制剂

[实用新型]一种防止恒温金属浴中反应液蒸发的简易装置-CN202223230164.2有效
发明人：张舒;李天邦;陆晓 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2022-12-02 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： B01L7/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种防止恒温金属浴中反应液蒸发的简易装置，属于生物医药实验器材技术领域，包括恒温金属浴本体，所述恒温金属浴本体上安装有基座，所述基座上预留有多排样品孔，所述基座的一端嵌有加热片，所述恒温金属浴本体上安装有盖子，所述盖子内部的上端安装有导热管，所述导热管的一头固定连接有温度传感器，所述加热片上固定连接有压紧片，所述导热管的另一端与加热片通过压紧片压紧相连。本实用新型解决了现有的恒温金属浴上的盖子一般为塑料材质，无法保证内部温度环境均一，当孵育时间或者孵育温度要求较长或较高时，反应管底部和顶部温度相差较大，反应液容易发生蒸发，蒸发的反应液附着在离心管的盖子上，导致反应失败的问题。
一种防止恒温金属反应蒸发简易装置

[实用新型]一种用于大鼠肛瘘造模的简易装置-CN202223275465.7有效
发明人：杨盼盼;赵颖;廉云飞 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： A61D1/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种用于大鼠肛瘘造模的简易装置，包括穿刺体，所述穿刺体采用柔性材料制成，穿刺体的一端螺纹连接有钩针，穿刺体的另一端设有螺纹接头；所述钩针与穿刺体拆卸分离后，穿刺体经过两端弯曲并通过螺纹接头螺纹连接其另一端。相比传统的钢丝引流方法，同时省去了使用人力修剪钢丝和穿透皮肤后弯曲端部进行固定的过程，节约了人力，缩短了制造肛瘘造模实验时间，更适用于需要造模动物数多的实验。
一种用于大鼠肛瘘简易装置

[发明专利]高翻译稳定性BDNF mRNA的设计和制备方法-CN202111580132.2在审
发明人：李天邦;廉云飞;强斌;张舒 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-12-22 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：一种高翻译稳定性BDNF mRNA的设计和制备方法，包括：在野生型人BDNF基因序列的基础上，通过哺乳动物细胞密码子偏好设计优化基因序列来作为稳定型BDNF序列；同时，舍弃了野生型人BDNF基因中原有的5’‑/3’‑非翻译区(UTR)，转而采用长度短于100nt的5’‑UTR和珠蛋白的3’‑UTR来修饰BDNF mRNA。此设计下的BDNF mRNA在经过体外转录合成、加帽/加尾反应后可被用于包括转染间充质干细胞在内的下游应用。结合其方法有效避免了现有技术中体外转录操作存在花费高以及耗时长等问题、制约了相关细胞药物研发的进度的缺陷。
翻译稳定性 bdnf mrna 设计制备方法

[发明专利]mRNA-LNP递送系统、制备工艺及其在人源间充质干细胞应用-CN202210838884.2在审
发明人：张晓欢;廉云飞;刘璐;陆晓;李天邦;葛婷 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2022-07-18 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C12N15/88 文献下载
摘要：本发明涉及医药生物技术领域，尤其涉及一种mRNA‑LNP递送系统、递送工艺及其在人源间充质干细胞应用，包括负载一种或多种mRNA的LNP非病毒载体，所述LNP非病毒载体包括可电离阳离子脂质、胆固醇、中性辅助磷脂或/且PEG脂质，所述可电离阳离子脂质为Dlin‑MC3‑DMA或DOTAP；所述中性辅助磷脂为DSPC或DOPE；所述PEG脂质为DSPE‑PEG2000。本发明创新点在于一方面自设计脂质组分比例形成mRNA‑LNP，另一方面这些复合表征的mRNA‑LNP能够实现难转染细胞MSC的有效转染，mRNA‑LNP对MSC安全性良好，孵育24h无明显细胞毒、转染过程操作简便，本发明为MSC转染提供了新的简便思路，对增强基因修饰型干细胞的胞内蛋白表达提供了更佳的选择。
mrna lnp 递送系统制备工艺及其人源间充质干细胞应用

[实用新型]一种免疫细胞的培养装置-CN202122820443.3有效
发明人：廖联明;刘璐;廉云飞;毛慧玲 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-11-17 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种免疫细胞的培养装置，属于免疫细胞培养技术领域，包括培养箱，所述培养箱的左侧活动连接有箱门，所述箱门的中部安装有观察窗，所述培养箱的内底壁固定连接有支撑柱，所述支撑柱的顶部固定连接有支撑台。本实用新型解决了培养装置中放置有多个培养皿对培养基的酸碱性进行检测的话需要多次拿取，操作麻烦并且增大对培养装置的污染几率影响免疫细胞的培养的问题，本实用新型中，一次性将多个培养皿中的培养基都取样出来，不用将培养皿取出更不用分别将不同培养皿分别取出，减少与外界接触的时间，直接在培养箱的内侧进行培养基的取样，操作简单并且降低对培养装置的污染几率，保证对免疫细胞的培养。
一种免疫细胞培养装置

[实用新型]一种干细胞处理用分离装置-CN202122865026.0有效
发明人：刘璐;廉云飞;廖联明;徐静 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-11-22 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种干细胞处理用分离装置，属于干细胞处理技术领域，包括分离箱，所述分离箱的顶部设置有箱盖，所述箱盖的底部固定连接有连接环，所述分离箱的内侧固定连接有支撑板，所述分离箱的内底壁固定连接有电机，所述电机的输出端固定连接有传动轴，所述传动轴的顶部贯穿支撑板且固定连接有主动齿轮。本实用新型解决了分离效率低、对试管的固定不稳定、不能对不同尺寸的试管进行固定的问题，本实用新型中，螺纹杆转动会使螺纹杆向试管壳的内侧移动带动旋转接头、夹持板、夹持垫向试管靠近并夹持试管，保证试管在分离提取过程中的稳定，并且通过控制夹持板136的移动可以固定不同直径大小的试管。
一种干细胞处理分离装置

[实用新型]一种间充质干细胞新型制剂用存储装置-CN202122866977.X有效
发明人：廖联明;刘璐;廉云飞;余小芹 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-11-22 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： B65D81/18 文献下载
摘要：本实用新型提供一种间充质干细胞新型制剂用存储装置，属于间充质干细胞新型制剂用装置技术领域，包括恒温箱，所述恒温箱上安装有控温组件，所述恒温箱内安装有平移结构，所述平移结构上安装有存储箱。本实用新型解决了现有间充质干细胞新型制剂用存储装置一般都是采用简单的存储，无法保证装置内的温度处于制剂最佳放置温度，同时在取制剂时无法对取出制剂的量进行量取，也无法对不同制剂进行标注，进而给制剂的使用带来很大的不便的问题。
一种间充质干细胞新型制剂存储装置

[发明专利]一种细胞产品的无菌检查验证方法-CN202111580135.6在审
发明人：廉云飞;陆晓;张春娟;张万山 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-12-22 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本申请公开一种细胞产品的无菌检查验证方法，属于生物医药领域，具体包括如下步骤：(1)试验组：取供试品，每个滤筒过滤2管供试品，每管全量过滤；向滤筒内泵入150ml灭菌注射用水，使细胞充分裂解后过滤；(2)对照组；(3)阴性对照组；(4)菌液组：平皿计数所加的试验菌数；(5)培养：将试验组、对照组的培养基按照下表所示条件培养，观察并记录结果。判断依据：在规定的培养时内，与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，可照此检查方法和检查条件进行供试品的无菌检查。本发明解决了细胞制品采用薄膜过滤法进行方法验证时，滤膜孔径堵塞的问题。
一种细胞产品无菌检查验证方法

[发明专利]一种节约脐带间充质干细胞培养工序的培养方法-CN202111599514.X在审
发明人：杨晟;强斌;廉云飞;毛慧玲 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-12-24 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本申请公开一种节约脐带间充质干细胞培养工序的培养方法，属于生物医药领域，包括：脐带获取；华通氏胶获取；剪碎；铺瓶：用去前段的移液枪枪头将组织块转入到T175细胞培养瓶中，每个培养瓶加入20ml原代培养液，置于培养箱中静置培养；传代或冻存：显微镜下观察每个培养瓶10个组织块爬出细胞，每个集落融合度80％‑90％时进行消化传代或冻存，消化下来的细胞进行计数后，结果未到达冻存要求，按照不少于4000个/cm2密度接种至新的培养瓶中，置于培养箱中静置培养，若计数结果达到冻存要求则按5×106个/ml进行冻存。本发明极大简化了脐带间充质干细胞培养工序，降低了生产成本的同时也保证了细胞质量，另外简单的操作工序也大大降低了因操作导致的污染风险。
一种节约脐带间充质干细胞培养工序方法

[实用新型]一种干细胞药物制备用混料装置-CN202122820458.X有效
发明人：廉云飞;廖联明;刘璐;余小芹;余雷 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-11-17 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： B01F27/706 文献下载
摘要：本实用新型提供一种干细胞药物制备用混料装置，属于干细胞药物制备技术领域，包括卸料机构，所述卸料机构上安装有两个支撑架，所述连接轴一与连接轴二之间安装有混料桶，所述混料桶内安装有搅拌结构，所述连接轴一的外侧设置有外驱动组件，所述搅拌结构的外侧设置有内驱动组件，所述连接轴二上设置有预混料机构。本实用新型解决了现有干细胞药物制备用混料装置药物容易在装置底部沉淀，进而导致药物混料不充分，大大降低了药物的质量，同时无法对添加药物进行预混合，需要一一投入进行混料，大大降低了混料速度，进而降低了药物的制备效率的问题。
一种干细胞药物制备用混料装置

[发明专利]利用荧光定量PCR检测人源脐带间充质干细胞制剂中真菌的方法-CN202111610623.7在审
发明人：陆晓;张春娟;张万山;马进 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本申请公开利用荧光定量PCR检测人源脐带间充质干细胞制剂中真菌的方法，属于生物医药领域，具体包括如下步骤：(1)将人源间充质干细胞制品进行离心弃上清后，向沉淀中加入裂解液重悬并转移至裂解管中进行研磨，对真菌进行破碎后，提取纯化获得真菌DNA；(2)对样本DNA进行荧光定量PCR检测；(3)通过Ct值判断样本的结果。由于真菌的28SrRNA具有一定的保守性，保守区序列是大部分真菌所共有的；通过设计28srRNA的特异性上游引物、下游引物及荧光探针，采用荧光探针法实时荧光定量PCR技术可提高检测的特异性并且能大大缩短检测时间。
利用荧光定量 pcr 检测脐带间充质干细胞制剂真菌方法

[发明专利]利用荧光定量PCR检测人源脐带间充质干细胞制剂中细菌的方法-CN202111634766.1在审
发明人：张春娟;陆晓;强斌;马进 -专利权人： 江苏拓弘康恒医药有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本申请公开利用荧光定量PCR检测人源脐带间充质干细胞制剂中细菌的方法，属于生物医药领域，具体包括如下步骤：(1)将人源间充质干细胞制品进行离心弃上清后，向沉淀中加入裂解液破环细菌细胞壁后，提取纯化获得细菌DNA；(2)对样本DNA进行荧光定量PCR检测；(3)通过Ct值判断样本的结果。由于细菌的16S rRNA具有一定的保守性，保守区序列是大部分细菌所共有的；通过设计16s rRNA的特异性上游引物、下游引物及荧光探针，采用荧光探针法实时荧光定量PCR技术可提高检测的特异性并且能大大缩短检测时间。
利用荧光定量 pcr 检测脐带间充质干细胞制剂细菌方法

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