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[发明专利]通过不定胚方式固定水稻杂种优势的方法-CN201910589002.1有效
发明人：赵炳然;吕启明;毛毕刚 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-07-02 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过不定胚方式固定水稻杂种优势的方法，将OsMADS24启动子与BBM1基因编码序列连接，构建到表达载体中得到载体A；构建ZEA1双靶点CRISPR/Cas9敲除的载体B；将载体A和载体B通过农杆菌介导法共转化到杂交水稻种子中得到T0代植株；筛选ZEA1基因双等位纯合敲除同时成功异位表达BBM1基因的T0代植株，进行自交得到自交种子。本发明利用水稻珠心组织特异表达启动子，将水稻成胚关键基因在杂交水稻珠心组织中特异表达，诱导珠心组织体细胞形成不定胚；将在水稻卵细胞中特异表达并对卵细胞生长发育发挥作用的基因敲除；使杂交水稻自交。这种方法可以固定水稻的杂种优势，大大提高杂交水稻配组效率，消除杂交水稻繁制种风险。
通过不定方式固定水稻杂种优势方法

[发明专利]一种实现水稻杂种优势固定的方法-CN202010014813.1有效
发明人：赵炳然;吕启明;张秀丽;毛毕刚;唐丽;黄志远;郑文杰 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-01-07 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种实现水稻杂种优势固定的方法，将OsMADS13启动子与水稻BBM1基因编码序列连接，构建表达盒A；构建水稻合子胚发育关键基因OsMPK6双靶点CRISPR/Cas9敲除表达盒B；将表达盒A和B整合到同一表达载体上，并通过农杆菌介导法转化到杂交水稻种子中得到T0代植株；T0代植株进行自交得到自交种子。本发明利用水稻珠心组织特异表达启动子，将水稻成胚关键基因在杂交水稻珠心组织中特异表达，诱导珠心组织体细胞形成不定胚；将水稻合子胚发育关键基因敲除，破坏水稻有性生殖过程；最后通过杂交水稻自交，形成以体细胞不定胚方式固定水稻杂种优势的种子，可以大大提高杂交水稻配组效率，无需年年制种。
一种实现水稻杂种优势固定方法

[发明专利]调控水稻雌性发育的突变型基因及其编码的蛋白、应用以及引物-CN201911384828.0有效
发明人： 毛毕刚;赵炳然;彭彦;韶也;郑文杰;胡远艺;唐丽;李曜魁;张丹 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-12-28 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了调控水稻雌性发育的突变型基因，分别为OsMLH1基因上的突变型基因Osmlh1‑1和突变型基因Osmlh1‑2，以及OsMLH3基因上的突变型基因Osmlh3‑1和突变型基因Osmlh3‑2。这几种突变类型的基因编码的蛋白在控制水稻雌性器官育性方面具有明显作用，其编辑的突变体Osmlh3和Osmlh1出现相似表型，结实率都下降到10％左右，可以利用上述突变型基因通过遗传工程的手段产生水稻雌性不育恢复系，用来生产杂交种子，开展轮回选择，在农业生产上具有十分重要的应用前景。本发明还公开了上述突变型基因所编码的蛋白、在调控水稻雌性发育中的应用，以及扩增上述基因的引物对。
调控水稻雌性发育突变型基因及其编码蛋白应用以及引物

[发明专利]水稻镉低积累分子标记、突变型基因、检测试剂盒及其快速鉴定方法和应用、分型引物-CN202111192651.1在审
发明人：赵炳然;韶也;毛毕刚;余丽霞;彭彦;柏连阳;李文建;袁智成;唐丽;李曜魁;彭选明;胡远艺;张丹;罗武中 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2021-10-13 - 公布日： 2022-01-25 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻镉低积累分子标记，其核苷酸序列以日本晴水稻的基因组为参考基因组，其包含位于第7号染色体8874101‑8874103的位置有CTG三个碱基的缺失，其最终得到了一种水稻R001‑OsNramp5突变型基因，该基因CDS区包含有特定的核苷酸序列或者氨基酸序列；本发明还提供一种分子标记检测试剂盒，包括一设计的引物对；以及基于该检测试剂盒的快速鉴定方法，还提供了该分子标记或突变型基因在作物分子辅助育种或品种改良中的应用以及相应的KASP分型引物，本发明可减少培育镉低积累水稻工作量并缩短培育周期，具有简便、快速、高通量等优点。
水稻积累分子标记突变型基因检测试剂盒及其快速鉴定方法应用引物

[发明专利]调控水稻雌性器官育性的基因及其编码蛋白和应用-CN201711195274.0有效
发明人： 毛毕刚;赵炳然;彭彦;韶也;胡远艺;张丹;唐丽;李曜魁;袁智成;罗武中;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2017-11-24 - 公布日： 2022-01-14 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明公开了一种调控水稻雌性器官育性的基因及其编码蛋白和应用，其中调控水稻雌性器官育性的基因为OsMLH3基因；OsMLH3基因的序列为SEQ ID NO.3的核苷酸序列。由OsMLH3基因编码得到的蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO.4的核苷酸序列。OsMLH3基因可应用于调控水稻雌性器官育性，培育出新的水稻雌性不育恢复系。
调控水稻雌性器官基因及其编码蛋白应用

[发明专利]一种水稻镉低积累分子标记、突变型基因、检测试剂盒及其快速鉴定方法和应用、分型引物-CN202111210318.9在审
发明人：赵炳然;韶也;毛毕刚;余丽霞;彭彦;柏连阳;李文建;袁智成;唐丽;李曜魁;彭选明;胡远艺;张丹;罗武中 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2021-10-18 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻镉低积累分子标记，其核苷酸序列以日本晴水稻的基因组为参考基因组，其包含位于第7号染色体的8874042‑8874040的位置有CCA三个碱基的缺失，其最终得到了一种水稻lcd100‑OsNramp5突变型基因，该基因CDS区包含有特定的核苷酸序列或者氨基酸序列；本发明还提供一种分子标记检测试剂盒，包括一设计的引物对；以及基于该检测试剂盒的快速鉴定方法，还提供了该分子标记或突变型基因在作物分子辅助育种或品种改良中的应用以及相应的KASP分型引物，本发明可减少培育镉低积累水稻工作量并缩短培育周期，具有简便、快速、高通量等优点。
一种水稻积累分子标记突变型基因检测试剂盒及其快速鉴定方法应用引物

[发明专利]一种高通量靶向鉴定理化诱变植株M1代突变及获取突变体的方法-CN201911223356.0有效
发明人：韶也;赵炳然;毛毕刚;彭彦;唐丽;李曜魁;胡远艺;张丹;柏连阳;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-12-03 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量靶向鉴定理化诱变植株M1代突变及获取突变体的方法，鉴定方法包括：通过非致死剂量的理化诱变方式对植物进行诱变，将获得的M1代的植株分单株进行种植，将各单株的叶片混合后提取出混池DNA并进行目的基因区域的高深度靶向测序；将测序结果与目的基因区域的相关序列进行比对，鉴定是否存在目标SNP和/或Indel。在鉴定出含有目的基因区域突变的嵌合体单株的基础上，对嵌合体单株进行DNA鉴定，选择含有该突变的穗子并混收其种子进行混播，然后分单株提进行DNA鉴定，获得具有目标遗传表型的M2单株。本发明的方法效率高、准确性好、操作简便，对创新种质的鉴定和获取具有显著的进步意义。
一种通量靶向鉴定理化诱变植株 m1 突变获取突变体方法

[发明专利]水稻OsRR22-1-CN201911223359.4有效
发明人：韶也;余丽霞;赵炳然;李文建;毛毕刚;杜艳;胡远艺;彭彦;唐丽;李曜魁;张丹;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-12-03 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻OsRR22‑1突变型基因，该OsRR22‑1突变型基因相比日本晴水稻的OsRR22基因序列，包含有以下碱基缺失，即：在OsRR22基因的4138902位置(RAP_Locus)存在[G/‑]1个bp的缺失。同时公开了水稻OsRR22‑1突变型基因在作物分子辅助育种中的应用以及在选育或制备耐盐表型水稻品种中的应用，取得了显著的技术效果。本发明还公开了用于检测、筛选或获取水稻OsRR22‑1突变型基因的突变体的KASP分型引物，可对高深度靶向测序发现的SNP/Indel进行不同个体的精确分型，进一步提高现有创新种质筛查鉴定的准确性及效率。
水稻 osrr22 base sup

[发明专利]水稻OsRR22-7-CN201911223360.7有效
发明人：赵炳然;余丽霞;韶也;李文建;毛毕刚;杜艳;胡远艺;唐丽;彭彦;李曜魁;张丹;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-12-03 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻OsRR22‑7突变型基因及其鉴定方法，该OsRR22‑7突变型基因相比日本晴水稻的OsRR22基因序列，包含有以下碱基缺失段，即：在4140861‑4140867位置(RAP_Locus)存在[CGGCTTT/‑]7个bp的缺失。同时公开了水稻OsRR22‑7突变型基因在作物分子辅助育种中的应用以及在选育或制备耐盐表型水稻品种中的应用，取得了显著的技术效果。本发明还公开了用于检测、筛选或获取水稻OsRR22‑7突变型基因的突变体的KASP分型引物，可对高深度靶向测序发现的SNP/Indel进行不同个体的精确分型，进一步提高现有创新种质筛查鉴定的准确性及效率。
水稻 osrr22 base sup

[发明专利]水稻镉吸收相关基因OsNRAMP5的SNP分子标记及其应用-CN201911296360.X有效
发明人：唐丽;赵炳然;何含杰;李曜魁;董家瑜;吕启明;毛毕刚;韶也;胡远艺 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-12-16 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种水稻镉吸收相关基因OsNRAMP5的SNP分子标记，其SNP位点位于水稻OsNRAMP5基因编码区起始密码子ATG下游+938位核苷酸，存在C/T多态性。该SNP分子标记与水稻籽粒镉含量相关，可方便快捷地预测水稻籽粒的镉含量，筛选低镉水稻种质资源，该位点基因型为TT的水稻品种既具有镉低积累的特性，其锰含量降幅又相对较小。本发明还公开了利用该SNP分子标记在鉴定水稻籽粒中镉含量以及培育镉低积累水稻品种的应用，以及用于检测水稻基因组中所含SNP分子标记的多态性或基因型的特异性引物，能够快速、准确地鉴定或选育出镉低积累水稻品种，为实现轻中度镉污染大田稻米的安全生产提供技术基础。
水稻吸收相关基因 osnramp5 snp 分子标记及其应用

[发明专利]通过抑制植物除草剂抗性基因表达去除色选漏检转基因种子的方法-CN202010626377.3在审
发明人：赵炳然;韶也;袁定阳;彭彦;余东;吕启明;毛毕刚;柏连阳;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-07-01 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过抑制植物除草剂抗性基因表达去除色选漏检转基因种子的方法，包括如下步骤：将抑制植物除草剂抗性基因表达的元件，与育性恢复基因、花粉致死基因和荧光标记基因构建四元连锁表达载体，转化入对对应类型除草剂具有抗性的不育系中，获得对对应类型除草剂敏感的繁殖系；繁殖系自交结实，采用对应类型除草剂对色选机筛选得到的不育系种子进行除杂，去除色选漏检的含有四元转基因元件的繁殖系种子。该方法可以杀死色选漏检的含有转基因成分的繁殖系，可以百分之百规避第三代杂交水稻制种或机械化混播混收制种使用不育系因色选漏检带来的杂交制种及获得的杂交种子转基因污染风险，操作简单、高效。
通过抑制植物除草剂抗性基因表达去除漏检转基因种子方法

[发明专利]抑制OsHIS1基因表达的植物连锁表达载体及其构建方法和应用-CN202010628397.4在审
发明人：韶也;赵炳然;袁定阳;彭彦;余东;吕启明;毛毕刚;柏连阳;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-07-01 - 公布日： 2020-10-09 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种抑制OsHIS1基因表达的植物连锁表达载体，其包括抑制OsHIS1基因表达的元件、育性恢复基因元件、花粉致死基因元件和荧光标记基因元件。还公开了该植物连锁表达载体的构建方法，其得到的植物连锁表达载体转化不育系后，可以通过β三酮类除草剂杀死色选漏检的含有转基因成分的繁殖系，转基因效果精准，除杂效率高。本发明还公开了该植物连锁表达载体在第三代杂交水稻制种或机械化混播混收制种中的应用，可以有效规避第三代杂交水稻制种或机械化混播混收制种使用不育系因色选漏检带来的杂交制种及获得的杂交种子转基因污染风险，操作简单、高效。
抑制 oshis1 基因表达植物连锁载体及其构建方法应用

[发明专利]一种利用除草剂进行两系杂交稻制种的方法-CN202010239405.6在审
发明人：吕启明;赵炳然;张秀丽;黄志远;毛毕刚 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-03-30 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用除草剂进行两系杂交稻制种的方法，包括如下步骤：利用对除草剂敏感的两系不育系母本和对该除草剂具有抗性的两系恢复系父本配成两系杂交稻组合，进行杂交制种，得到的杂交后代植株用所述除草剂对其进行均匀喷洒，以除去因温度不稳定导致母本自交接种的后代，即获得真杂种后代。该方法在两系杂交稻制种过程中可很好地解决“打摆子”现象，大大提高制种纯度，快速、准确、高效的获得真杂交种后代，筛选的效率可达到100％，操作简单，大大解放了劳动力，在杂交水稻种子纯度提升以及种质资源创新上都具有重要意义。
一种利用除草剂进行杂交制种方法

[发明专利]用于检测水稻HIS1基因是否存在BBC类除草剂抗性的分子标记物及其应用-CN202010239426.8在审
发明人：吕启明;张秀丽;赵炳然;唐丽;韶也;毛毕刚;黄志远 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-03-30 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于检测水稻HIS1基因是否存在BBC类除草剂抗性的分子标记物，及其应用，可以快速、高效、准确、方便地鉴定水稻品系HIS1基因中是否存在BBC类除草剂抗性，并鉴定水稻HIS1基因显隐性类型，为BBC类除草剂的使用提供一定的理论依据。本发明还公开了上述分子标记物在杂交水稻制种中的应用，可大大提高制种纯度，快速、准确、高效的获得真杂交种后代，操作简单，大大解放了劳动力，还可以在“两系法”制种过程中缓解“打摆子”现象，在杂交水稻种子纯度提升以及种质资源创新上都具有重要意义。本发明还公开了上述分子标记物在转育抗/感BBC类除草剂水稻材料中的应用，适用性广，操作简单，快速，准确。
用于检测水稻 his1 基因是否存在 bbc 除草剂抗性分子标记及其应用

[发明专利]一种培育水稻普通核不育系的方法-CN201710014870.8有效
发明人：袁定阳;段美娟;余东;孙志忠;谭炎宁;孙学武;袁光杰;袁贵龙;赵炳然;毛毕刚;韶也;李新奇;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2017-01-09 - 公布日： 2020-04-24 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种培育水稻普通核不育系的方法，包括以下步骤：利用CRISPR/Cas9系统，根据水稻普通核不育基因设计靶位点序列；构建含靶位点序列片段的pCRISPR/Cas9重组载体；将所获得的pCRISPR/Cas9重组载体导入保持系的胚性愈伤组织中得到转基因苗；筛选转基因苗中的转基因阳性植株；筛选转基因阳性植株中的突变植株；将突变植株进行繁种，于后代植株中分离不含转基因成分的普通核不育系。本发明通过编辑普通核不育基因，实现快速培育普通核不育系的目标，育种周期短、成本低且实用性强。
一种培育水稻普通不育方法

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