本发明公开了一种检测耐甲氧西林金葡菌的CPA引物及其检测试剂盒和检测方法，该CPA引物是针对两个靶点femA及mecA设计的，包括剥离引物4s、5a，交叉扩增引物2a1s，以及特异引物2a、3a，引物序列如前文SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.10所示；其检测方法是建立检测femA和mecA的交叉引物恒温扩增反应体系，进行交叉引物恒温扩增反应，观察两个反应体系颜色变化，若两个反应体系颜色都变为绿色，说明待检测样品中含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；否则说明检测样品中不含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。本发明的引物和方法检测时间快，可以在60分钟左右获得检测结果；此外，检测灵敏度高，达到fg/μL的级别。
本发明公开了一种PSR等温扩增反应检测副溶血性弧菌的引物、试剂盒及其方法。本发明针对副溶血性弧菌特异性靶序列tlh设计了一对检测引物Ft/Bt和一对加速引物IF/IB，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～4所示，该引物保证了检测结果的可靠性。本发明中还提供了一种PSR等温扩增反应检测副溶血性弧菌的试剂盒，其具有灵敏度高、特异性好，操作简便快速，结果准确可靠，检测成本低，适合中小型单位及现场检测应用的特点。本发明利用试剂盒对单增李斯特菌进行聚合酶螺旋反应的检测，该方法不会因温度的改变而造成时间损失，耗时短，扩增产物不需要凝胶电泳，直接用荧光染料显色后可凭肉眼判断结果。
本发明公开了一种PSR检测耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素的引物、试剂盒与方法。本发明针对耐热直接溶血毒素阳性的副溶血弧菌的特异性靶序列tdh及trh保守区的特异区域各设计了一对检测引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～4所示，该引物对于副溶血弧菌耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素均可实现快速、准确的检出，且适用性好。发明中还提供了一种PSR检测耐热直接溶血毒素及耐热相关溶血毒素的试剂盒，利用该试剂盒对待测样品进行检测时，可以通过显色剂对结果直接进行肉眼判读，期操作简便快捷，结果准确，检测成本低。
本发明公开了一种基于聚合酶螺旋反应恒温检测单增李斯特菌的引物、试剂盒及检测方法。该引物包括检测引物Ft和Bt；其中，检测引物Ft的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；检测引物Bt的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了一种基于聚合酶螺旋反应恒温检测单增李斯特菌的试剂盒，该试剂盒包括上述引物，Bst DNA聚合酶，以及钙黄绿素和氯化锰的混合溶液等。利用上述引物或试剂盒能对单增李斯特菌进行聚合酶螺旋反应的检测，不会因温度的改变而造成时间损失，耗时短，反应过程简便、检测周期短、特异性强、可用肉眼观察检测结果。本发明对新型恒温扩增技术扩增的开发及微生物的现场检测具有重要的意义。
