本发明提供了一种D‑杂环氨基酸的合成方法、试剂盒及应用。该合成方法包括:采用SEQ ID NO:1所示的二氨基庚二酸脱氢酶将D‑杂环类的酮酸类化合物转化成D‑杂环氨基酸。采用本申请的二氨基庚二酸脱氢酶将D‑杂环类的酮酸化合物转化生成D‑杂环氨基酸,能够得到较高转化率和较高ee的非天然手性氨基酸,且采用该二氨基庚二酸脱氢酶进行合成的方法所用的工艺条件稳定,反应条件温和,整个生产过程中操作简单、污染较低,为人工合成D‑杂环氨基酸提供一种新的思路方法。
本发明公开了一种D‑环状烷基氨基酸的合成方法。该合成方法包括以下步骤或在氨基酸脱氢酶的作用下在反应体系中反应生成或其中,n1≥0,n2≥1,M1为H或一价阳离子,m1≥0,m2≥1,M2为H或一价阳离子,氨基酸脱氢酶的氨基酸序列为选自如下之一的序列1)如SEQ ID NO1所示的氨基酸序列;2)如SEQ ID NO1所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而得到的具有高度立体选择性将或转化成或的氨基酸脱氢酶活性的氨基酸序列。应用本发明的技术方案,通过使用氨基酸脱氢酶将环状酮酸转化生成D‑环状烷基氨基酸,能够得到较高转化率和较高ee的非天然手型氨基酸。
本发明公开了一种转氨酶及其应用。该转氨酶具有SEQ ID NO.2或4所示的氨基酸序列;或与SEQ ID NO.2或4所示的氨基酸序列具有至少80%同一性或经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸且具有高度立体选择性‑R构型催化活性的ω‑转氨酶活性的氨基酸序列,其中,高度立体选择性是指其中一个立体异构体的含量是另一个的至少约1.1倍。本发明的转氨酶能够高效地合成手性纯度较高的R构型手性胺,适合手性胺合成的工业化应用。
本发明公开了一种R型ω-转氨酶及其应用。该R型ω-转氨酶含有SEQ ID NO.:2所示的氨基酸序列或者与SEQ ID NO.:2具有至少80%同一性或者经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸的具有高度立体选择性-R构型催化活性的ω-转氨酶活性的蛋白质的氨基酸序列,且不是如SEQ ID NO.:4所示的核苷酸序列所编码的氨基酸序列;高度立体选择性是指其中一个立体异构体的含量是另一个的至少约1.1倍。本发明的R型ω-转氨酶具有高度立体选择性,可以高效地合成手性纯度较高的R构型手性胺,适合用于手性胺的工业化生产。