本发明公开了特异性结合H1.4移码突变蛋白的单克隆抗体制备及其应用。具体地公开了特异性结合H1.4移码突变蛋白的检测性抗体或其抗原结合部分,包含氨基酸序列是SEQ ID No.1的重链和氨基酸序列是SEQ ID No.2的轻链。本发明首次利用H1.4移码突变体多肽半抗原制备了针对H1.4移码突变蛋白的鼠单克隆抗体,并且制备的抗体可以与H1.4移码突变蛋白特异性结合,能快速、灵敏、准确地检测出H1.4移码突变,为H1.4移码突变导致自闭症机制发生的研究提供了必不可少的实验材料,为自闭症患者的诊断提供了检测基础,在自闭症的诊断或辅助诊断领域、相关疾病的靶向药物开发领域,具有广泛的应用前景和重要的意义。