本发明公开了一种S‑1‑BOC‑3羟基哌啶的酶催化制备方法，所述酶催化制备方法以1‑BOC‑3哌啶酮为底物，在辅酶、辅酶循环体系和酮还原酶存在条件下反应，得到含S‑1‑BOC‑3羟基哌啶的反应液；所述的酮还原酶编码基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示，所述酮还原酶的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。与其他S‑1‑BOC‑3羟基哌啶的制备方法相比，本发明提供的酮还原酶催化合成S‑1‑BOC‑3羟基哌啶的路线简单，不仅避免了化学合成法的繁琐步骤，而且还解决了现有酶催化技术中辅酶用量大、单位酶活低、底物1‑BOC‑3哌啶酮耐受浓度低的问题。底物浓度可提高到400g/L，辅酶用量0.1g/L，反应24小时转化率高达99.9％，光学纯度e.e％为99.9％，降低了S‑1‑BOC‑3羟基哌啶的生产成本，经济环保，具有很好的工业应用前景。
本发明公开了一种水解酶，所述水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，同时提供了一种使用该水解酶合成(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸的方法，以3‑异丁基戊二酰亚胺为底物，在水解酶的催化下合成产物(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸。本发明提供的(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸酶催化合成方法，整体工艺简单，反应条件温和，转化率高，具有极高的手性选择性，且绿色环保，适合大规模工业化生产，应用前景广阔。
本发明涉及医药中间体技术领域，具体涉及一种烯酮还原酶与一种布瓦西坦中间体的制备方法，该制备方法包括以下步骤：在吗啉的催化下，戊醛和乙醛酸反应生成5‑羟基‑4‑正丙基‑2(5H)‑呋喃酮；在硼氢化钠的催化下，5‑羟基‑4‑正丙基‑2(5H)‑呋喃酮脱除羟基生成4‑正丙基‑2(5H)‑呋喃酮；在烯酮还原酶的存在下，4‑正丙基‑2(5H)‑呋喃酮发生还原反应生成目标产物布瓦西坦中间体；该烯酮还原酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，且其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的布瓦西坦中间体的制备方法仅需3步反应，即可制得布瓦西坦中间体，无需额外化学拆分，整体工艺绿色环保，成本较低，易于实施。
本发明适用于生物化学技术领域，提供了一种L‑赖氨酸脱羧酶与酶法合成1,5‑戊二胺的方法，该L‑赖氨酸脱羧酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；该酶法合成1,5‑戊二胺的方法包括以下步骤：将L‑赖氨酸盐酸盐与磷酸吡哆醛和L‑赖氨酸脱羧酶进行脱羧反应，得到所述1,5‑戊二胺。本发明所使用L‑赖氨酸脱羧酶能够适用于高浓度的L‑赖氨酸盐酸盐，具有高效的催化作用。并且，在所述酶法合成1,5‑戊二胺的方法中，湿菌体全细胞用量低，pH范围广，反应条件温和，反应中无需添加缓冲液，反应时无需使用盐酸进行中和，从而大大简化了采用化学工艺合成1,5‑戊二胺的繁琐步骤。
